操作步驟:
1. 標準品的稀釋與加樣 :在酶標包被板上設標準品孔10孔 ,在di一 、第二孔中分別加標準品100μl ,然後在di一 、第二孔中加標準品稀釋液50μl ,混勻 ;然後從di一孔 、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔 ,再在第三 、第四孔分別加標準品稀釋液50μl ,混勻 ;然後在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉 ,再各取50μl分別取50μl分別加到第七 、第八孔中 ,再在第七 、第八孔中分別加標準品稀釋液50μl ,混勻後從第七 、第八孔中加到第五、第六孔中 ,再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋液50ul ,混勻 ;混勻後從第五 、第六孔中各分別取50μl加到第九 、第十孔中 ,再在第九第十孔分別加標準品稀釋液50μl ,混勻後從第九第十孔中各取50μl棄掉 。(稀釋後各孔加樣量都為50μl ,濃度分別為180 ng/L ,120 ng/L ,60 ng/L ,30 ng/ ,15 ng/L) 。
2. 加樣 :分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑 ,其餘各步操作相同) 、待測樣品孔 。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl ,然後再加待測樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍) 。加樣將樣品加於酶標板孔底部 ,盡量不觸及孔壁 ,輕輕晃動混勻 。
3. 溫育 :用封板膜封板後置37℃溫育30分鍾 。
4. 配液 :將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋後備用 。
5. 洗滌 :小心揭掉封板膜 ,棄去液體 ,甩幹 ,每孔加滿洗滌液 ,靜置30秒後棄去 ,如此重複5次 ,拍幹 。
6. 加酶 :每孔加入酶標試劑50μl ,空白孔除外 。
7. 溫育 :操作同3 。
8. 洗滌 :操作同5 。
9. 顯色 :每孔先加入顯色劑A50μl ,再加入顯色劑B50μl ,輕輕震蕩混勻 ,37℃避光顯色15分鍾.
10. 終止 :每孔加終止液50μl ,終止反應(此時藍色立轉黃色) 。
11. 測定 :以空白空調零 ,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值) 。 測定應在加終止液後15分鍾 。
硫化亞鐵;硫化鐵Iron sulfide1317-37-9
氯化高鐵(陰涼);氯化鐵;三氯化鐵;氯化高鐵Iron(III) chloride solution;Iron (III) chloride hydrated;Iron(III) chloride;Ferric salts10025-77-1
依思明藍IsaMin blue;Brilliant sky blue 5G;C.I. 427001324-86-3
靛紅Isatin91-56-5
乙酸異戊酯;醋酸戊酯;醋酸異戊酯;香蕉水;香蕉油;異戊酯IsoaMyl acetate;γ-Methylbutyl ethanoate;Banana oil;AMyl acetate;Pear oil;3-Methyl-1-butanol acetate123-92-2
異戊醇;3-甲基-1-丁醇;異丁原醇IsoaMyl alcohol;Isobutylcarbinol;Isopentyl alcohol;IsoaMyl alcohol priMary123-51-3
異戊胺;異丁基甲胺;3-甲基丁胺;1-氨基-3-甲基丁烷IsoaMylaMine;3-MethylbutylaMine;1-AMino-3-Methylbutane;3-Methyl-1-butanaMine,IsopentylaMine107-85-7
乙酸異丁酯Isobutyl acetate110-19-0
氯甲酸異丁酯;氯蟻酸異丁酯;氯碳酸異丁酯Isobutyl chloroforMate543-27-1
甲酸異丁酯;蟻酸異丁酯Isobutyl forMate542-55-2
異丁胺;1-氨基異丁烷;2-甲基丙胺IsobutylaMine;1-AMinoisobutane;2-Methyl propylaMine78-81-9
異丁酸;2-甲基丙酸;二甲基乙酸;異丙基甲酸Isobutyric acid;IsopropylforMic acid;DiMethylacetic acid79-31-2cyclohexene-1-one;Isoacetophorone78-59-1
乙酸異丙酯;醋酸異丙酯Isopropyl acetate108-21-4
肉豆蔻酸異丙酯;十四酸異丙酯;十四酸1-甲基乙基酯Isopropyl Myristate;Isopropyl tetradecanoate110-27-0
4-氯間甲酚4-Chloro-3-methylphenol59-50-7
異丙基環己烷;六氫異丙苯;六氫枯烯;2-環己基丙烷Isopropylcyclohexane;HexahydrocuMene;2-Cyclohexylpropane696-29-7
異喹啉 97%Isoquinoline119-65-3
異戊醛;3-甲基丁醛;異纈草醛Isovaleraldehyde;3-Methylbutyraldehyde;Isovaleric aldehyde;3-Methyl butanal590-86-3
衣康酸;亞甲基琥珀酸;2-亞甲基丁二酸;分解烏頭酸Itaconic acid;Propylenedicarboxylic acid97-65-4