GSK Elisa Kit應用雙抗體夾心法測定標本中人骨特異性堿性磷酸酶水平 。用純化的人骨特異性堿性磷酸酶抗體包被微孔板 ，製成固相抗體 ，往包被單抗的微孔中依次加入骨特異性堿性磷酸酶 ，再與HRP標記的骨特異性堿性磷酸酶抗體結合 ，形成抗體-抗原-酶標抗體複合物 ，經過*洗滌後加底物TMB顯色 。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色 ，並在酸的作用下轉化成zui終的黃色 。顏色的深淺和樣品中的骨特異性堿性磷酸酶呈正相關 。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值） ，通過標準曲線計算樣品中人骨特異性堿性磷酸酶濃度 。

　　GSK Elisa Kit使用要求如下 ：

　　試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30分鍾後方可使用 ，酶標包被板開封後如未用完 ，板條應裝入密封袋中保存 。

　　濃洗滌液可能會有結晶析出 ，稀釋時可在水浴中加溫助溶 ，洗滌時不影響結果 。

　　各步加樣均應使用加樣器 ，並經常校對其準確性 ，以避免試驗誤差 。一次加樣時間控製在5分鍾內 ，如標本數量多 ，推薦使用排槍加樣 。

　　請每次測定的同時做標準曲線 ，做複孔。如標本中待測物質含量過高 ，請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數（n倍）後再測定 ，計算時請最後乘以總稀釋倍數 。封板膜隻限一次性使用 ，以避免交叉汙染 。底物請避光保存 。

　　GSK Elisa Kit嚴格按照說明書的操作進行 ，試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準 。