Hcy Elisa 試劑盒是一種廣泛應用在測定液體樣本中的蛋白 、抗體 、或激素的免疫分析技術 。酶聯免疫吸附試驗的標準程序 ，通常是把蛋白 、抗體 、或激素等（即抗原）直接或是以捕捉抗體固定在固相載體上 ，再加入一級檢測抗體 ，形成一個抗原抗體的複合物 。如果該抗體已經用酶標記了 ，即可用來直接測定抗原的量 ，若無 ，則可利用另一個酶標記的二級抗體來測定抗原的量 。測定抗原量的方法是加入該酶的底質 ，作用後產生出現的顏色深淺和樣本中的抗原量呈正比的關係 ，依此原理計算出樣本中的抗原總量或濃度 。

　　1.直接法（direct ELISA）

　　將抗原直接固定在固相載體上 ，加入酶標記的一級抗體 ，即可測定抗原總量 ，此一級抗體的特異性非常重要 。

　　優勢 ：操作手續簡短 ，因無須使用二抗可避免交互反應 。

　　缺點 ：試驗中的一抗都得用酶標記 ，但不是每種抗體都適合做標記 ，費用相對提高 。

　　2.間接法（indirect ELISA）

　　此測定方法與直接法類似 ，差別在於一級抗體沒有酶標記 ，改用酶標記的二級抗體去辨識一級抗體來測定抗原量 。

　　優勢 ：Hcy Elisa 試劑盒二抗可以加強信號 ，而且有多種選擇能做不同的測定分析 。不加酶標記的一級抗體則能保留它多的免疫反應性 。

　　缺點 ：交互反應發生的機率較高 。

　　3.雙抗體夾心法（sandwich ELISA）

　　被檢測的抗原包被在兩個抗體之間 ，其中一個抗體將抗原固定於固相載體上 ，即捕捉抗體 。另一個則是檢測抗體 ，此抗體可用酶標記後直接測定抗原的量 ；或不標記 ，再透過酶標記的二級抗體來測定抗原的量 。這兩種抗體必須小心選取 ，才可避免交互反應或競爭相同的抗原結合部位 。

　　優勢：高靈敏 、高專一性 ，抗原無須事先純化 。

　　缺點 ：抗原一定得擁有兩個以上的抗體結合部位 。

　　4.競爭法（competitive ELISA）

　　樣本裏的抗原（自由抗原）和純化並固定在固相載體上的抗原（固定抗原）一起競爭相同的抗體 ，當樣品裏的自由抗原越多 ，就可以結合越多的抗體 ，而固定抗原就隻能結合到較少的抗體 ，反之亦然 。經清洗步驟 ，洗去自由抗原和抗體的複合物 ，隻留下固定抗原和抗體的複合物 ，拿來與隻有固定抗原的對照組結果相比較 ，根據呈色差異就可計算出樣品裏的抗原含量 。

　　優勢 ：可適用比較不純的樣本 ，而且數據再現性很高 。

　　缺點 ：Hcy Elisa 試劑盒整體的敏感性和專一性都較差 。