对于贴壁细胞 ，传代可参考以下方法：
1. 弃去培养上清 ，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次 。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟 ，然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落 ，迅速拿回操作台 ，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化 。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液 ，补加1-2mL培养液后吹匀 。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞 ，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞 ，1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1 ：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中 。
方法二：可选择半数换液方式 ，弃去半数培养基后 ，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
小鼠结肠成纤维细胞 细胞冻存
待细胞生长状态良好时，可进行小鼠结肠成纤维细胞|细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量yi酶，细胞变圆脱落后 ，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中 ，再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时，应将细胞收集 ，1000RPM条件下离心4分钟，少量保存上清液(防止细胞吸走)，加入部分新鲜培养基，加入到冻存管中 ，在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
小鼠结肠成纤维细胞 细胞复苏的原则
快速融化：必须将冻存在-196℃液氮中的细胞快速融化至37℃，使小鼠结肠成纤维细胞|细胞外冻存时的冰晶迅速融化，避免冰晶缓慢融化时进入细胞形成再结晶，对细胞造成损害。