使用方法 ：
一 、稀釋PCR陽性對照（以10E2-10E7拷貝/μL這6個10倍稀釋度為例）
1. 注意 ：由於標準品濃度非常高 ，因此下列稀釋操作一定要在獨立的區域進行 ，千萬不能汙染樣品或本試劑盒的其他成分） 。為增加產品穩定性和避免擴散傳染性病原 ，本產品不提供活體樣品做陽性對照 ，隻提供可以直接使用的DNA片段作為陽性對照 。
2. 標記6個離心管 ，分別為7 ，6 ，5 ，4 ，3 ，2 。
3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR專用模板稀釋液（用帶芯槍頭 ，下同） 。
4. 在7號管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽性對照 ，充分震蕩1分鍾 ，得1×10E7拷貝/μL的陽性對照 。放冰上待用 。
5. 換槍頭 ，在6號管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得) ，充分震蕩1分鍾 ，得1×10E6拷貝/μL的陽性對照 。放冰上待用 。
6. 換槍頭 ，在5號管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽性對照到5號管中 ，充分震蕩1分鍾 ，得1×10E5拷貝/μL的陽性對照 。放冰上待用 。
7. 重複上麵的操作直到得到6個稀釋度的陽性對照 。放冰上待用 。
二 、樣品DNA的製備
8. 如果有N個樣品 ，必須設置N+2個提取 ，多出的一個是PC（樣品製備陽性對照） ，一個是NC（樣品製備陰性對照） 。可以用10μL上步製備的PCR陽性對照的第4號（濃度為1×10E4 拷貝/μL，10μL相當於1萬拷貝）或第5號（濃度為1×10E5 拷貝/μL ，10μL相當於10萬拷貝）再加上一定量的水使總體積跟每次製備要求的體積一樣 ，以此作為PC 。另外用水作為NC 。如果每次製備需要200μL樣品 ，則PC和NC的體積也必須是200μL 。
9. 用自選方法純化樣品的DNA ，本試劑盒跟市場上大多數病毒DNA提取試劑盒兼容 。
三 、設置qPCR反應（20 μL體係 ，在樣品製備室進行）
10. 如果隻做1次重複 ，則標記N+9個PCR管 ，其中N+2個用於上步得到的N+2個樣品 ，1個用於PCR陰性對照 ，6個用於PCR陽性對照 。如果做2-3次重複 ，則反應設置數量相應增加2或3倍 。
11. 在標記管中按下表加入各成分（本表隻列出一次重複 。樣品管和陰性對照設置完畢後才設置陽性對照 ，並且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好後加）