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      荚膜阿耶罗菌探针法荧光定量PCR试剂盒实验操作步骤
      点击次数 :677 更新时间:2022-04-12

      实验操作:

      1. 模板制备(样本制备区)

      建议使用配套水生动物病害基因组 DNA/RNA 提取试剂盒系列产品 ,具体过程详见产品说明书 。

      2.添加模板(模板添加区,放置于冰盒中进行)

      请于-20℃条件下保存 ,有效期 12 个月

      取出所需测试数的已含有反应液 A-TSV-I 的 PCR 管 ,将试剂*解冻,离心 30 秒 ,在管盖上标记管名(阴性对照管 NG 、样品 XX 、阳性对照管 PG)。打开管盖向各管管底分别加入 0.8μL B-I 及 0.2μL R-I,盖上阴性对照管管盖 ,其他各管分别沿管壁加入 2μL 模板,顺序为待测样品模板、PG-TSV-I,依次盖好各管管盖 ,离心 30 秒,立即进行扩增反应。

      3. 扩增反应(扩增及产物分析区)

      ①恒温仪器 63℃条件下反应 60 min 。待仪器升温至 63℃后,新建程序,设置实验名称及反应时间,将步骤 2中离心后的 PCR 反应管放入恒温荧光分子检测仪,点击开始检测 。

      ②若使用荧光定量 PCR 仪 ,则荧光基团选择 FAM,淬灭基团选择 None ,将 63℃ 15 s ,63℃ 45 s 作为一个循环,于 63℃ 45 s 处收集荧光信号 ,60 个循环。




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