老哥俱乐部

细胞简介：

血液中的单核细胞来源于骨髓干细胞分化出的髓样干细胞
，是机体防御系统的一个重要组成部分。单核细胞能吞噬异物产生抗体，在机体损伤治愈

、抗御病原的入侵和对的方面起着重要的作用。机体发生炎症或其他都可引起单核细胞总数百分比发生变化，因此检查单核细胞计数成为辅助诊断的一种重要方法。

细胞特性：

1）组织来源于实验动物的正常外周血组织。

2)细胞鉴定：MO-1或MO-2荧光染色为阳性。

3)经鉴定细胞纯度高于90%
。

4)不含有 HIV-1
、 HBV、HCV

、支原体、
、酵母和
。

5)细胞生长方式

：圆形细胞
，不规则细胞
，贴壁培养。

推荐培养基
：

老哥俱乐部推荐使用 Delf原代 巨噬 细胞培养体系 作为体外培养的培养基。

实验报告：

一、分离与培养：

1

、无菌条件下
，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织
，然后用PBS将此组织块清洗2次
，将组织剪成1mm3左右大小；

2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型胶原酶）
，混悬10s
，置37℃条件下消化10min
，之后用滴管吹打制成单细胞悬液
，自然沉淀并收集上清
，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；

3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织被消化
；

4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min

，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬
，接种于25cm2培养瓶
，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养
；

5、差速贴壁1h后
，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；二、免疫荧光鉴定：

1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min
；

2、PBS冲洗细胞2次，每次10min
，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS冲洗细胞2次，每次10min
，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min
；

4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；

5
、PBS冲洗细胞3次，每次10min
，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；

6
、用PBS冲洗3次
，每次10min，在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照
。

公司正在出售的产品：

大鼠B因子(BF)检测试剂盒
，英文名： BF ELISA Kit

Mouse Leptospira IgG (Lebtospira) ELISA Kit 小鼠钩端IgG(Lebtospira)检测试剂盒

MouseSomalcellderivedfactor1a,SDF-1aELISAKit 小鼠基质细胞衍生因子1a(SDF-1a/CXCL12)检测试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitforHumananspoerassociatedwithaigenprocessing,TAPELISAKit人抗原提呈相关转运蛋白/T细胞活化蛋白

通用型悬钩子丛矮病毒(RaspberryBushyDwarfVirus;RBDV)试剂盒20次

ELISAKitT3大鼠三甲状腺原

HA重组甲型流感 H8N4 (A/pintail duck/Alberta/114/1979) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 Protein

rh-BMP-7/BMP7(bone morphogenetic protein-7,BMP-7;rhBMP-7 100ugrh-BMP-7/BMP7(bone morphogenetic protein-7,BMP-7;rhBMP-7) 重组人骨形态发生蛋白7

CD4重组人 CD4 / LEU3 蛋白 Protein

ENPEP Protein Human 重组人 ENPEP / Aminopeptidase A 蛋白

IgG1 Protein Human 重组人 IgG1-Fc 蛋白 (103 Cys/Ser)

rh-BMP-7/BMP7(bone morphogenetic protein-7,BMP-7;rhBMP-7 100ugrh-BMP-7/BMP7(bone morphogenetic protein-7,BMP-7;rhBMP-7) 重组人骨形态发生蛋白7

ENPEP Protein Human 重组人 ENPEP / Aminopeptidase A 蛋白

HA重组甲型流感 H8N4 (A/pintail duck/Alberta/114/1979) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 Protein

IgG1 Protein Human 重组人 IgG1-Fc 蛋白 (103 Cys/Ser)

CD4重组人 CD4 / LEU3 蛋白 Protein

小鼠甲状腺素(T4)ELISA 试剂盒 96T/48T

Rat soluble Toll like receptor 6 (sTLR6) ELISA Kit 大鼠可溶性Toll样受体6(sTLR6)检测试剂盒

HumanMannmabindinglectieceptor,MBLRELISAKit 人甘露糖凝集素受体(MBLR)检测试剂盒 96T/48T 进口分装

Humanai-exactablenuclearaigenaibody,ENA-Ab检测试剂盒人抗可提取核抗原抗体(ENA-Ab)检测试剂盒规格
：96T/48T

植物精(arginine)含量高效液相色谱法定量检测试剂盒20次

HumanVitaminD3
，VD3ELISAKit人3(VD3)检测试剂盒规格：96T/48T

大鼠单核细胞小鼠雌二醇(E2)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠(Coisol)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠促甲状腺素(TSH)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠甲基化酶(Methylase)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

注意事项：

1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好

，培养液是否有漏液
、浑浊等现象，若有上述现象发生请及时和老哥俱乐部联系。

2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基
、血清比例
、所需细胞因子等，确保细胞培养条件一致，若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题

，责任由客户自行承担。

3. 用75%酒精擦拭细胞瓶表面
，显微镜下观察细胞状态。因运输问题，部分细胞由于温度变化及剧烈碰亡破碎形成碎片，是正常现象。观察好细胞状态后，75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置4-6h
。

4. 贴壁细胞可以消化，悬浮细胞直接混匀收集细胞，900 rpm-1000 rpm离心3 min

，弃上清。加5 mL PBS重悬细胞，再900 rpm-1000 rpm离心3 min，
，用新鲜的*培养基重悬细胞，并接种到新的培养瓶或培养皿中，置于培养箱中进行培养。

5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养
。

6. 建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片，记录细胞状态

，便于和我司技术部沟通交流。由于运输的原因，个别敏感细胞会出现不稳定的情况
，请及时和老哥俱乐部联系，告知细胞的具体情况，以便老哥俱乐部的技术人员跟踪回访直至问题解决
。

7. 该细胞仅供科研使用。

8. 备注：运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的*培养基来培养细胞。收到细胞后次传代建议1：2传代 。

9.注意： 1:2传代就是1个T25瓶传2个T25瓶或者2个6cm皿。不是1个T25瓶传2个10cm皿
。