細胞簡介 ：

小鼠胰島β分離自胰腺組織 ；胰腺分為外分泌腺和內分泌腺兩部分 。外分泌腺由腺泡和腺管組成，腺泡分泌胰液 ，腺管是胰液排出的通道 。胰液中含有 、原 、脂肪酶 、 。胰液通過胰腺管排入十二指腸 ，有消化蛋白質 、脂肪和糖的作用 。內分泌腺由大小不同的細胞團──胰島所組成 ，胰島主要由4種細胞組成：α細胞 、β細胞 、γ細胞及PP細胞 。α細胞分泌胰高血糖素 ，升高血糖 ；β細胞分泌胰島素 ，降低血糖 ；γ細胞分泌 ，以旁分泌的方式抑製α 、β細胞的分泌 ；PP細胞分泌胰多肽 ，抑製胃腸運動 、胰液分泌和膽囊收縮 。胰島β細胞 ，即胰島B細胞 ，是胰島細胞的一種 ，屬內分泌細胞的一種 ，能分泌胰島素 ，與胰島α細胞分泌的胰高血糖素一起起到調節血糖的作用 。胰島B細胞功能受損 、胰島素分泌絕對或相對不足（胰島素抵抗） ，會使血糖升高 ，從而引發糖尿病 。而胰島B細胞癌變會生成胰島素瘤 ，引起惡性血糖降低症狀 。

方法簡介 ：

公司實驗室分離的小鼠胰島β采用先用膠原酶消化分離得到胰島 、再用逐級消化胰島製備而來 ，細胞總量約為5×10?cells/瓶 。

質量檢測

公司實驗室分離的小鼠胰島β經Insulin含量檢測 ，純度可達90%以上 ，且不含有HIV-1 、HBV、HCV 、支原體 、細菌 、酵母和真菌等 。

培養信息 ：

包被條件 PLL（0.1mg/ml）

培養基 含FBS 、生長添加劑 、Penicillin 、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態 梭形 、多角形

傳代特性 可傳1-2代

消化液 0.25%

培養條件 氣相 ：空氣 ，95% ；CO2 ，5%

實驗報告 ：

一、分離與培養 ：

1 、無菌條件下 ，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織 ，然後用PBS將此組織塊清洗2次 ，將組織剪成1mm3左右大小 ；

2 、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶） ，混懸10s ，置37℃條件下消化10min ，之後用滴管吹打製成單細胞懸液 ，自然沉澱並收集上清 ，用含10% FBS培養基終止消化後4℃放置 ；

3 、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液 ，混懸10s ，置37℃消化10 min後 ，按上述方法收集上清並終止消化後4℃放置 ，重複此步驟2-3次 ，直至組織被消化 ；

4 、用200目不鏽鋼篩網過濾細胞消化液 ，1200r/min 離心10min ，棄去上清 ，沉澱細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養基混懸 ，接種於25cm2培養瓶 ，放置於37℃  ，5％CO2 培養箱中培養 ；

5 、差速貼壁1h後 ，吸出培養基 ，按實驗需要接種於6孔板中繼續培養 ；二 、免疫熒光鑒定 ：

1、待心房肌細胞生長至80%融合時 ，棄去培養基 ，用溫育的PBS衝洗細胞2次 ，每次10min ，然後用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min ；

2 、PBS衝洗細胞2次 ，每次10min ，然後在4℃條件下 ，用0.1％Triton X-100透膜15min ；

3 、PBS衝洗細胞2次 ，每次10min ，然後在室溫條件下 ，用4% BSA封閉細胞30min ；

4 、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗 ，然後將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜 ；

5 、PBS衝洗細胞3次 ，每次10min ，按1 ：150的比例稀釋抗α-actin的二抗 ， 37℃條件下放置1h ；

6 、用PBS衝洗3次 ，每次10min ，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像並拍照 。

公司正在出售的產品 ：

大鼠天冬酸轉酶(AST)檢測試劑盒  ，英文名 ： AST ELISA Kit

Mouse myelin basic protein (MBP) ELISA Kit 小鼠髓0脂堿性蛋白(MBP)檢測試劑盒

Rati-iodothyronine,T3ELISAKit 大鼠三甲狀腺原(T3)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforHO-1ELISAKit大鼠血紅素氧合酶1

細胞PKCγ激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次

ELISAKi-proBNP大鼠N端前腦素

CD99L2重組小鼠 CD99L2 / MIC2L1 蛋白 (Fc 標簽) Protein

Bad (BCL-xL/BCL-2-associated death promoter 0.5mgBad (BCL-xL/BCL-2-associated death promoter) 相關死亡促進因子Bad抗原

SELM重組人 SELM / Selenoprotein M 蛋白 Protein

DUSP3 Protein Human 重組人 DUSP3 / VHR 蛋白 (His & GST 標簽)

TNFSF8 Protein Rat 重組大鼠 CD153 / CD30L / TNFSF8 蛋白 (Fc 標簽)

Bad (BCL-xL/BCL-2-associated death promoter 0.5mgBad (BCL-xL/BCL-2-associated death promoter) 相關死亡促進因子Bad抗原

DUSP3 Protein Human 重組人 DUSP3 / VHR 蛋白 (His & GST 標簽)

CD99L2重組小鼠 CD99L2 / MIC2L1 蛋白 (Fc 標簽) Protein

TNFSF8 Protein Rat 重組大鼠 CD153 / CD30L / TNFSF8 蛋白 (Fc 標簽)

SELM重組人 SELM / Selenoprotein M 蛋白 Protein

小鼠抗甲狀腺球蛋白抗體(ATGA/TGAB)ELISA 試劑盒 96T/48T

Ai endothelial cell aibodies (AECA) in rat ELISA Kit 大鼠抗內皮細胞抗體(AECA)檢測試劑盒

HumanflagellinELISAKit 人鞭毛蛋白(flagellin)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

HumanAngiotensinⅡReceptor2,AT2R檢測試劑盒人血管緊張素Ⅱ受體2(AT2R)檢測試劑盒規格 ：96T/48T

植物甘油-3-0酸脫氫酶(Glycerol-3-PhosphateDehydrogenase)總活性比色法定量檢測試劑盒20次

Humanβ-Thromboglobulin,β-TGELISAKit人β血小板球蛋白/β血栓環蛋白(β-TG)檢測試劑盒規格 ：96T/48T

小鼠胰島β細胞小鼠巰基轉移酶（GST）檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

小鼠過氧化酶（GSH-Px）檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

小鼠(GSH)檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

小鼠穀酸脫羧酶自身抗體(GAD-Ab)檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

注意事項 ：

1. 收到細胞後首先觀察細胞瓶是否完好 ，培養液是否有漏液 、渾濁等現象，若有上述現象發生請及時和老哥俱樂部聯係 。

2. 仔細閱讀細胞說明書 ，了解細胞相關信息 ，如細胞形態 、所用培養基 、血清比例 、所需細胞因子等 ，確保細胞培養條件一致 ，若由於培養條件不一致而導致細胞出現問題 ，責任由客戶自行承擔 。

3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表麵 ，顯微鏡下觀察細胞狀態 。因運輸問題 ，部分細胞由於溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片 ，是正常現象 。觀察好細胞狀態後 ，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置於37℃培養箱放置4-6h 。

4. 貼壁細胞可以消化 ，懸浮細胞直接混勻收集細胞 ，900 rpm-1000 rpm離心3 min，棄上清 。加5 mL PBS重懸細胞 ，再900 rpm-1000 rpm離心3 min ， ，用新鮮的*培養基重懸細胞 ，並接種到新的培養瓶或培養皿中 ，置於培養箱中進行培養 。

5. 請客戶用相同條件的培養基用於細胞培養 。

6. 建議客戶收到細胞後前3天各拍幾張細胞照片 ，記錄細胞狀態 ，便於和我司技術部溝通交流 。由於運輸的原因 ，個別敏感細胞會出現不穩定的情況 ，請及時和老哥俱樂部聯係 ，告知細胞的具體情況 ，以便老哥俱樂部的技術人員跟蹤回訪直至問題解決 。

7. 該細胞僅供科研使用 。

8. 備注 ：運輸用的培養基(灌液培養基)不能再用來培養細胞 ，請換用按照說明書細胞培養條件新配製的*培養基來培養細胞 。收到細胞後次傳代建議1 ：2傳代  。

9.注意 ： 1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿 。不是1個T25瓶傳2個10cm皿 。