老哥俱乐部

① 组织块培养法

组织块培养是常用

、简便易行和成功率较高的原代培养方法
。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中
，瓶壁可预先涂以胶原薄层，以利于组织块粘着于瓶壁，使周边细胞能沿瓶壁向外生长
。

② 消化培养法

③ 悬浮细胞培养法

对于悬浮生长的细胞
，如白血病细胞、淋巴细胞
、骨髓细胞
、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化，可采用低速离心分离，直接培养，或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。

④器官培养

器官培养是指从供体取得器官或组织块后，不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养
，器官培养可保持器官组织的相对完整性，可用于重点观察细胞间的联系
、排列情况和相互影响，以及局部环境的生物调节作用。

产品名称
：小鼠小肠血管内皮细胞

英文名称：Mouse Small Intestine Vascular Endothelial Cells

组织来源
：小肠组织

产品规格：5×105cells/T25细胞培养瓶

小鼠小肠血管内皮分离自小肠组织
；小肠位于腹中
，上端接幽门与胃相通
，下端通过阑门与大肠相连，是食物消化吸收的主要场所。小肠盘曲于腹腔内，上连胃幽门，下接盲肠，分为十二指肠
、空肠和回肠三部分。小肠内消化是至关重要的，因为食物经过小肠内胰液、胆汁和小肠液的化学性消化及小肠运动的机械性消化后
，基本上完成了消化过程，同时营养物质被小肠粘膜吸收了
。小肠管壁由粘膜、粘膜下层
、肌层和浆膜构成
。其结构特点是管壁有环形皱襞，粘膜有许多绒毛，绒毛根部的上皮下陷至固有层，形成管状的肠腺
，其开口位于绒毛根部之间
。绒毛和肠腺与小肠的消化和吸收功能关系密切；构成肠腺的细胞有柱状细胞
、杯状细胞
、潘氏细胞和未分化细胞。柱状细胞和内分泌细胞与绒毛上皮相似

，接近绒毛的柱状细胞与吸收细胞相似，绒毛深部的柱状细胞微绒毛少而短
，不形成纹状缘。小肠有三种功能即消化、吸收和分泌及运动功能，其中以吸收和分泌功能为主
。平滑肌细胞的收缩是负责肠蠕动的动力，促使食物向下运动
。血管内皮细胞除了吞噬异物、细菌、坏死和衰老的组织等

，还参与集体免疫活动

，包括：①血管收缩及血管舒张，从而控制血压
；②凝血（血栓形成及纤维蛋白溶解）；③动脉硬化
；④血管生成；⑤炎症及肿胀（浮肿）；⑥内皮细胞亦控制一些物质
，如白血球进出血管。

公司实验室分离的小鼠小肠血管内皮采用-胶原酶联合消化法结合差速贴壁法
、并通过内皮细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

质量检测

公司实验室分离的小鼠小肠血管内皮经CD31免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上
，且不含有HIV-1
、HBV、HCV、支原体
、细菌、酵母和真菌等。

包被条件 PLL（0.1mg/ml）
，明胶（0.1%）

培养基 含FBS
、生长添加剂
、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 内皮细胞样

传代特性 可传2-3代

消化液 0.25%

培养条件 气相
：空气
，95%；CO2
，5%

取材→分离→培养和维持

1、取材

人和动物细胞的取材是原代细胞培养成功的首要条件
，直接影响细胞的体外培养。

(1) 取材的基本要求

① 取材要注意新鲜和保鲜

② 应严格无菌

③ 防止机械损伤

④ 去除无用组织和避免干燥

⑤ 应注意组织类型、分化程度、年龄等

⑥ 作好记录

2、分离

人或动物体内(或胚胎组织)由于多种细胞结合紧密
，不利于各个细胞在体外培养中生长繁殖

，必须将现有的组织块充分散开
，使细胞解离出来
。

(1)悬浮细胞的分离方法

组织材料若来自血液、羊水、胸水或腹水的悬液材料
，的方法是采用1000r/min的低速离心10分钟。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层，这样可根据需要收获目的细胞。

(2)实体组织材料的分离方法

对于实体组织材料
，由于细胞间结合紧密，为了使组织中的细胞充分分散，形成细胞悬液
，可采用机械分散法(物理裂解)和消化分离法。

① 机械分散法

特点:简便、快速,但对组织机械损伤大
，而且细胞分散效果差,适用于处理纤维成分少的软组织。

② 消化分离法

组织消化法是把组织剪切成较小团块(或糊状)，应用酶的生化作用和非酶的化学作用进一步使细胞间的桥连结构松动
，使团块膨松
，由块状变成絮状，此时再采用机械法，用吸管吹打分散或电磁搅拌或在摇珠瓶中振荡，使细胞团块得以较充分的分散，制成少量细胞群团和大量单个细胞的细胞悬液
，接种培养后，细胞容易贴壁生长。

大鼠血管内皮生长因子C(VEGFC)检测试剂盒

，英文名： VEGFC ELISA Kit

Mouse noradrenaline (NA) ELISA Kit 小鼠去甲(NA)检测试剂盒

Mousemonocytechemotacticprotein1/monocytechemotacticandactivatingfactor,MCP-1/MCAFELISAkit 小鼠单核细胞趋化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)检测试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitforHumanbactericidal/permeabilityincreasingprotein,BPIELISAKit人杀菌性/通透性增加蛋白

细胞EPHA1激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)20次

ELISAKitPP大鼠蛋酸酶

LEPR重组人 Leptin Receptor / LEPR / CD295 蛋白 (His & Fc 标签) Protein

糖原合酶激酶3α(GSK3α)重组蛋白 Recombinant Glycogen Synthase Kinase 3 Alpha (GSK3a)

CNPY3重组人 CNPY3 / PRAT4A / ERDA5 蛋白 (Fc 标签) Protein

DLL4 Protein Human 重组人 DLL4 / Delta4 蛋白

HA Protein H5N1 重组甲型流感 H5N1 (A/Egypt/N05056/2009) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白

糖原合酶激酶3α(GSK3α)重组蛋白 Recombinant Glycogen Synthase Kinase 3 Alpha (GSK3a)

DLL4 Protein Human 重组人 DLL4 / Delta4 蛋白

LEPR重组人 Leptin Receptor / LEPR / CD295 蛋白 (His & Fc 标签) Protein

HA Protein H5N1 重组甲型流感 H5N1 (A/Egypt/N05056/2009) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白

CNPY3重组人 CNPY3 / PRAT4A / ERDA5 蛋白 (Fc 标签) Protein

小鼠颗粒酶A(Gzms-A)ELISA 试剂盒 96T/48T

Rat ai alpha fodrin aibody IgG/IgA (-Fodrin IgG/IgA) ELISA Kit 大鼠抗α-胞衬蛋白抗体IgG/IgA(α-Fodrin IgG/IgA)检测试剂盒

Humanglycosylatedserumprotein,GSPELISAKit 人糖化蛋白(GSP)检测试剂盒 96T/48T 进口分装

HumanAlpha-fetoprotein,AFP检测试剂盒人甲种胎儿球蛋白/甲胎蛋白(AFP)检测试剂盒规格：96T/48T

植物半胱(cysteine)含量高效液相色谱法定量检测试剂盒20次

Monkeyβ2-microglobulin,BMG/β2-MGELISAKit猴β2微球蛋白(BMG/β2-MG)检测试剂盒规格：96T/48T

小鼠小肠血管内皮细胞小鼠红细胞生成素受体(mouse EPOR)   作用：   ELISA   规格：      进口分装

小鼠嗜酸性粒细胞阳离子蛋白(mouse ECP)   作用

：   ELISA   规格
：      进口分装

小鼠上皮中性粒细胞活化肽-78(mouse ENA-78)   作用
：   ELISA   规格：      进口分装

小鼠血管内皮抑素(mouse Endostatin)   作用：   ELISA   规格：      进口分装

视天气状况和运输距离远近,公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。

1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中,置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输;收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养,如无法立刻进行复苏操作,冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月
。

T-25培养瓶充满培养基后进行常温运输;收到细胞后请镜下观察细胞生长状态,如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作,如悬浮的细胞较多,请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。

本公司的所有产品仅用于科学研究或者工业科研等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用，非食用