老哥俱乐部

细胞简介：

小鼠视乳头星形胶质分离自视神经乳头
；视乳头位于黄斑区鼻侧附近
，境界清楚，呈白色、圆盘状
，因此也称为视盘
。视网膜上视觉纤维在此汇集，并于此穿出眼球向视中枢传递
。视乳头中央有一小凹陷区，称为视杯或生理凹陷。视乳头是视神经纤维聚合组成视神经的起始端，它没有视细胞，因而没有视觉，在视野中是生理盲点。视乳头是开角型青光眼早受损的部位
，星形胶质细胞是视神经乳头处主要的胶质细胞类型，可为视网膜神经节细胞无髓鞘的轴突提供结构和生物支持。青光眼视变是位不可逆性致肓眼病
。青光眼视变以视网膜神经节细胞轴突丧失并伴有视乳头处细胞外基质重坦为主要特征。导致视网膜神经节细胞丧失的病理生理机制尚未阐明
，神经胶质细胞对调控神经元微环境起多重作用，越来越多的证据表明胶质细胞町能对神经系统发育、损伤、修复及再生起极为关键的作用。视乳头星形胶质细胞胞体多扁平，体积较大，形状多呈不规则的多边形，突起较粗

，胞核为椭圆形
，核仁清晰可见，核周有较密集物质，胞质稀疏
，骨架结构良好

，明显不同于长梭形的成纤维细胞形态。

方法简介：

公司实验室分离的小鼠视乳头星形胶质采用-胶原酶联合消化法、结合差速贴壁制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

质量检测

公司实验室分离的小鼠视乳头星形胶质经GFAP免疫荧光鉴定
，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV

、支原体
、细菌、酵母和真菌等。

培养信息：

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 梭形、多角形

传代特性 可传3代左右

消化液 0.25%

培养条件 气相：空气
，95%；CO2，5%

实验报告：

一、分离与培养
：

1
、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织
，然后用PBS将此组织块清洗2次
，将组织剪成1mm3左右大小；

2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型胶原酶），混悬10s
，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液
，自然沉淀并收集上清
，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；

3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液
，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织被消化；

4

、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液


，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃
，5％CO2 培养箱中培养；

5、差速贴壁1h后
，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；二、免疫荧光鉴定：

1
、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min

；

2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下
，用0.1％Triton X-100透膜15min
；

3、PBS冲洗细胞2次，每次10min

，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；

4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜

；

5、PBS冲洗细胞3次

，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h

；

6、用PBS冲洗3次，每次10min，在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。

公司正在出售的产品：

大鼠2,3-二0酸甘油酸(2,3-DPG)检测试剂盒 ，英文名： 2,3-DPG ELISA Kit

Mouse parathyroid hormone related protein (PTHrP) ELISA Kit 小鼠甲状旁腺激素相关蛋白(PTHrP)检测试剂盒

Mouseheatshockprotein27,HSP-27ELISAKit 小鼠热休克蛋白27(HSP-27)检测试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitforHumanProinsulin,PIELISAKit人胰岛素原

通用型猪胸膜肺感染(Actinobacilluspleuropneumoniae;App)试剂盒20次

ELISAKiteNOS大鼠内皮型合成酶

CD34重组人 CD34 蛋白 Protein

0脂酶A1(PLA1)重组蛋白 Recombinant Phospholipase A1 (PLA1)

INSL4重组人 INSL4 / EPIL 蛋白 Protein

DCN Protein Human 重组人 Decorin / DCN / SLRR1B 蛋白

HA Protein H1N1 重组甲型流感 H1N1 (A/Ohio/07/2009) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白

0脂酶A1(PLA1)重组蛋白 Recombinant Phospholipase A1 (PLA1)

DCN Protein Human 重组人 Decorin / DCN / SLRR1B 蛋白

CD34重组人 CD34 蛋白 Protein

HA Protein H1N1 重组甲型流感 H1N1 (A/Ohio/07/2009) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白

INSL4重组人 INSL4 / EPIL 蛋白 Protein

小鼠克拉拉细胞蛋白(CC16)ELISA 试剂盒 96T/48T

Fro of the human aial naiuretic peptide (Pro-ANP) ELISA Kit 人前心肽(Pro-ANP)检测试剂盒

HumanUbiquitin,UbELISAKit 人泛素蛋白(Ub)检测试剂盒 96T/48T 进口分装

Humanadrenomedullin,ADM检测试剂盒人肾上腺髓质素(ADM)检测试剂盒规格
：96T/48T

植物mRNA直接化试剂盒10次

MouseActivinA,ACV-AELISAKit小鼠活化素A(ACV-A)检测试剂盒规格：96T/48T

小鼠视乳头星形胶质细胞小鼠基质金属蛋白酶抑制因子1(TIMP-1)检测试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

小鼠基质金属蛋白酶9/明胶酶B(MMP-9/GelatinaseB)检测试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

小鼠基质金属蛋白酶8/中性粒细胞胶原酶(MMP-8)检测试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

小鼠基质金属蛋白酶7(MMP-7)检测试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

注意事项：

1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现象发生请及时和老哥俱乐部联系
。

2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例
、所需细胞因子等，确保细胞培养条件一致

，若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题，责任由客户自行承担
。

3. 用75%酒精擦拭细胞瓶表面
，显微镜下观察细胞状态。因运输问题
，部分细胞由于温度变化及剧烈碰亡破碎形成碎片

，是正常现象。观察好细胞状态后，75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置4-6h。

4. 贴壁细胞可以消化，悬浮细胞直接混匀收集细胞，900 rpm-1000 rpm离心3 min，弃上清。加5 mL PBS重悬细胞，再900 rpm-1000 rpm离心3 min
，，用新鲜的*培养基重悬细胞，并接种到新的培养瓶或培养皿中
，置于培养箱中进行培养。

5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。

6. 建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片，记录细胞状态
，便于和我司技术部沟通交流。由于运输的原因
，个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和老哥俱乐部联系，告知细胞的具体情况
，以便老哥俱乐部的技术人员跟踪回访直至问题解决。

7. 该细胞仅供科研使用。

8. 备注

：运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞
，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的*培养基来培养细胞。收到细胞后次传代建议1：2传代
。

9.注意： 1:2传代就是1个T25瓶传2个T25瓶或者2个6cm皿
。不是1个T25瓶传2个10cm皿。