① 組織塊培養法

組織塊培養是常用 、簡便易行和成功率較高的原代培養方法 。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種於培養瓶(或皿)中 ，瓶壁可預先塗以膠原薄層，以利於組織塊粘著於瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長 。

② 消化培養法

③ 懸浮細胞培養法

對於懸浮生長的細胞 ，如白血病細胞 、淋巴細胞 、骨髓細胞 、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化 ，可采用低速離心分離 ，直接培養 ，或經淋巴細胞分層液分離後接種培養。

④器官培養

器官培養是指從供體取得器官或組織塊後 ，不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養 ，器官培養可保持器官組織的相對完整性 ，可用於重點觀察細胞間的聯係 、排列情況和相互影響 ，以及局部環境的生物調節作用 。

產品名稱 ：小鼠腦微血管內皮細胞

英文名稱 ：Mouse Brain Microvascular Endothelial Cells

組織來源 ：腦組織

產品規格 ：5×105cells/T25細胞培養瓶

小鼠腦微血管內皮分離自腦組織 ；腦微血管內皮細胞是血腦屏障的主要組成成分 ，它是組成腦微血管腔麵單層扁平上皮樣細胞 ，能夠限製可溶性物質和細胞等從血液進入大腦 ，大腦微血管內皮細胞與外周內皮細胞相比具有一些相同特性 。它所產生和分泌的生物活性物質對維持血管張力 、調節血壓 、抗血栓形成等有重要作用 ，在腦血管疾病的發病機製中有重要病理生理學意義 。與外周內皮細胞相同 ，大腦微血管內皮細胞表麵表達細胞粘附分子 ，調控白細胞進入大腦 。由於微血管內皮細胞的器官特異性 ，內皮細胞通常取源於疾病研究的相關組織 。其主要特征如下 ：①腦微血管內皮細胞存在許多細胞間緊密連接 ，產生很高的跨內皮阻抗 ，延遲細胞旁的通量 ；②腦微血管內皮細胞缺乏內皮細胞的窗孔結構 ，其液相物質胞飲水平較低 ；③腦微血管內皮細胞具有不對稱定位酶和載體介導轉運係統 ，從而產生“兩極分化"的表現型 。

公司實驗室分離的小鼠腦微血管內皮采用膠原酶-混合消化法結合密度梯度離心法 、後通過內皮細胞專用培養基培養篩選製備而來 ，細胞總量約為5×10?cells/瓶 。

質量檢測

公司實驗室分離的小鼠腦微血管內皮經CD31免疫熒光鑒定 ，純度可達90%以上 ，且不含有HIV-1 、HBV 、HCV 、支原體 、細菌 、酵母和真菌等 。

包被條件 PLL（0.1mg/ml） ，明膠（0.1%）

培養基 含FBS 、生長添加劑 、Penicillin 、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態 內皮細胞樣

傳代特性 可傳2-3代

消化液 0.25%

培養條件 氣相 ：空氣 ，95% ；CO2，5%

取材→分離→培養和維持

1 、取材

人和動物細胞的取材是原代細胞培養成功的首要條件 ，直接影響細胞的體外培養 。

(1) 取材的基本要求

① 取材要注意新鮮和保鮮

② 應嚴格無菌

③ 防止機械損傷

④ 去除無用組織和避免幹燥

⑤ 應注意組織類型 、分化程度 、年齡等

⑥ 作好記錄

2 、分離

人或動物體內(或胚胎組織)由於多種細胞結合緊密 ，不利於各個細胞在體外培養中生長繁殖 ，必須將現有的組織塊充分散開 ，使細胞解離出來 。

(1)懸浮細胞的分離方法

組織材料若來自血液 、羊水 、胸水或腹水的懸液材料 ，的方法是采用1000r/min的低速離心10分鍾 。經離心後由於各種細胞的比重不同可在分層液中形成不同層 ，這樣可根據需要收獲目的細胞 。

(2)實體組織材料的分離方法

對於實體組織材料 ，由於細胞間結合緊密 ，為了使組織中的細胞充分分散 ，形成細胞懸液 ，可采用機械分散法(物理裂解)和消化分離法 。

① 機械分散法

特點:簡便 、快速,但對組織機械損傷大 ，而且細胞分散效果差,適用於處理纖維成分少的軟組織 。

② 消化分離法

組織消化法是把組織剪切成較小團塊(或糊狀) ，應用酶的生化作用和非酶的化學作用進一步使細胞間的橋連結構鬆動 ，使團塊膨鬆 ，由塊狀變成絮狀 ，此時再采用機械法 ，用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠瓶中振蕩 ，使細胞團塊得以較充分的分散 ，製成少量細胞群團和大量單個細胞的細胞懸液 ，接種培養後 ，細胞容易貼壁生長 。

小鼠遊離前列腺特異性抗原(fPSA)試劑盒   96T/48T

小鼠遊離甲狀腺素(FT4)試劑盒   96T/48T

小鼠遊離睾(F-TESTO)試劑盒   96T/48T

小鼠幽門螺旋菌IgG(Hp-IgG)試劑盒   96T/48T

小鼠血栓調節蛋白(TM)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human tyrosine kinase 2 (Tyk-2) ELISA Kit 人酪激酶2(Tyk-2)試劑盒

Humanβ-galactosidase,βGALELISAKit 人β半乳糖苷酶(βGAL)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitfor(DC-SIGN/CD209)ELISAKit大鼠樹突狀細胞表麵特異性C型凝集素-細胞間黏附分子3結合非整合素分子

熒光定量分析20樣本

MouseIerleukin1α,IL-1αELISAKit小鼠白介素1α(IL-1α)試劑盒規格 ：96T/48T

FCGR2A重組食蟹猴 CD32a / FCGR2A 蛋白 Protein

mouse IgA 小鼠IgA 1mgmouse IgA 小鼠IgA

PDZD11重組人 PDZD11 / PDZK11 / PISP 蛋白 Protein

CD300LG Protein Human 重組人 CLM-9 / TREM4 / CD300LG 蛋白

IL18 Protein Mouse 重組小鼠 IL18 / IL-18 蛋白

mouse IgA 小鼠IgA 1mgmouse IgA 小鼠IgA

CD300LG Protein Human 重組人 CLM-9 / TREM4 / CD300LG 蛋白

FCGR2A重組食蟹猴 CD32a / FCGR2A 蛋白 Protein

IL18 Protein Mouse 重組小鼠 IL18 / IL-18 蛋白

PDZD11重組人 PDZD11 / PDZK11 / PISP 蛋白 Protein

小鼠腦微血管內皮細胞大鼠甘露糖寡糖1,2-α-甘露糖苷酶IA(MAN1A1)試劑盒  ，英文名 ： MAN1A1 ELISA Kit

Porcine esadiol receptor (ER) ELISA Kit 豬雌二醇受體(ER)試劑盒

轉基因植物35S基因核酸試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T

CLIAKitforM-CSFELISAKit大鼠巨噬細胞集落刺激因子

體液酸性0酸酶總活性比色法定量試劑盒20次

ELISAKitIL-2R綿羊白介素2受體

視天氣狀況和運輸距離遠近,公司與客戶協商後選擇下述方式中的一種進行 。

1)1mL凍存細胞懸液裝於1.8ml的凍存管中,置於裝滿幹冰的泡沫保溫盒中進行運輸;收到細胞後請盡快解凍複蘇細胞進行培養,如無法立刻進行複蘇操作,凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月 。

T-25培養瓶充滿培養基後進行常溫運輸;收到細胞後請鏡下觀察細胞生長狀態,如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,如懸浮的細胞較多,請將培養瓶至於培養箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁 。

本公司的所有產品僅用於科學研究或者工業科研等非醫療目的 ，不可用於人類或動物的臨床診斷或治療 ，非藥用 ，非食用