老哥俱乐部

① 组织块培养法

组织块培养是常用
、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中
，瓶壁可预先涂以胶原薄层，以利于组织块粘着于瓶壁，使周边细胞能沿瓶壁向外生长
。

② 消化培养法

③ 悬浮细胞培养法

对于悬浮生长的细胞，如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化，可采用低速离心分离
，直接培养

，或经淋巴细胞分层液分离后接种培养
。

④器官培养

器官培养是指从供体取得器官或组织块后，不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养，器官培养可保持器官组织的相对完整性，可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响
，以及局部环境的生物调节作用。

产品名称：小鼠结肠黏膜上皮细胞

英文名称：Mouse Colonic Mucosal Epithelial Cells

组织来源：结肠组织

产品规格
：5×105cells/T25细胞培养瓶

小鼠结肠黏膜上皮分离自结肠组织；结肠在右髂窝内续于盲肠，在第3骶椎平面连接直肠
。结肠分升结肠、横结肠、降结肠和乙状结肠4部分，大部分固定于腹后壁，结肠的排列酷似英文字母“M"
，将小肠包围在内。结肠横切面由内到外依次为：黏膜（上皮层、固有层、黏膜肌层）
，黏膜下层（疏松结缔组织），肌层（内环形、外纵行两层平滑肌）
，外膜（纤维膜或浆膜）。肠黏膜上皮细胞是机体内外环境的重要屏障，持续暴露于大量抗原中，也是机体面对病原微生物的道防线。因此，肠黏膜上皮细胞除有吸收
、分泌和转运等重要生理功能之外
，在黏膜先天性和获得性免疫防御机制中也起着重要作用。肠黏膜上皮细胞作为先接触抗原的细胞
，在黏膜免疫反应的起始阶段发挥关键作用，它决定黏膜免疫反应的发生
、性质和强度。探讨正常结肠黏膜上皮细胞的分离、体外培养方法，为研究肠黏膜上皮细胞以及与肠黏膜相关疾病建立合适的细胞模型。

公司实验室分离的小鼠结肠黏膜上皮采用先机械分离法
、后胶原酶消化法并通过上皮细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶
。

质量检测

公司实验室分离的小鼠结肠黏膜上皮经Cytokeratin-18免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌
、酵母和真菌等。

包被条件 鼠尾胶原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 上皮细胞样

传代特性 可传1-2代

消化液 0.25%

培养条件 气相：空气，95%
；CO2，5%

取材→分离→培养和维持

1、取材

人和动物细胞的取材是原代细胞培养成功的首要条件，直接影响细胞的体外培养
。

(1) 取材的基本要求

① 取材要注意新鲜和保鲜

② 应严格无菌

③ 防止机械损伤

④ 去除无用组织和避免干燥

⑤ 应注意组织类型
、分化程度、年龄等

⑥ 作好记录

2、分离

人或动物体内(或胚胎组织)由于多种细胞结合紧密，不利于各个细胞在体外培养中生长繁殖，必须将现有的组织块充分散开，使细胞解离出来
。

(1)悬浮细胞的分离方法

组织材料若来自血液、羊水
、胸水或腹水的悬液材料，的方法是采用1000r/min的低速离心10分钟。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层
，这样可根据需要收获目的细胞。

(2)实体组织材料的分离方法

对于实体组织材料，由于细胞间结合紧密，为了使组织中的细胞充分分散，形成细胞悬液，可采用机械分散法(物理裂解)和消化分离法
。

① 机械分散法

特点:简便
、快速,但对组织机械损伤大

，而且细胞分散效果差,适用于处理纤维成分少的软组织。

② 消化分离法

组织消化法是把组织剪切成较小团块(或糊状)
，应用酶的生化作用和非酶的化学作用进一步使细胞间的桥连结构松动
，使团块膨松
，由块状变成絮状

，此时再采用机械法
，用吸管吹打分散或电磁搅拌或在摇珠瓶中振荡，使细胞团块得以较充分的分散
，制成少量细胞群团和大量单个细胞的细胞悬液
，接种培养后，细胞容易贴壁生长
。

大鼠白介素13(IL-13)检测试剂盒 ，英文名： IL-13 ELISA Kit

Mouse pyruvate kinase M2 isoenzyme (M2-PK) ELISA Kit 小鼠酸激酶M2型同工酶(M2-PK)检测试剂盒

ELISA 小鼠IP-10(mouse IP-10)  进口分装

CLIAKitforIL-2RELISAKit大鼠白介素2受体

通用型艰难梭菌(Closidiumdifficile)试剂盒20次

ELISAKitPF-4/CXCL4大鼠血小板因子4

Spike中东呼吸综合征 MERS-CoV (HCoV-EMC/2012) Spike Protein fragment (aa 383-502, Fc 标签) Protein

Tetracycline/OVA 四环素偶联鸡卵白蛋白 2mgTetracycline/OVA 四环素偶联鸡卵白蛋白

FGFR2重组人 FGFR2 / CD332 蛋白 Protein

CST8 Protein Human 重组人 Cystatin-8 / CST8 蛋白 (Fc 标签)

ACP5 Protein Human 重组人 ACP5 / TRAP 蛋白

Tetracycline/OVA 四环素偶联鸡卵白蛋白 2mgTetracycline/OVA 四环素偶联鸡卵白蛋白

CST8 Protein Human 重组人 Cystatin-8 / CST8 蛋白 (Fc 标签)

Spike中东呼吸综合征 MERS-CoV (HCoV-EMC/2012) Spike Protein fragment (aa 383-502, Fc 标签) Protein

ACP5 Protein Human 重组人 ACP5 / TRAP 蛋白

FGFR2重组人 FGFR2 / CD332 蛋白 Protein

小鼠内皮型合成酶3(eNOS-3)ELISA 试剂盒 96T/48T

People of coicosterone / coicosterone (CO) ELISA Kit 人皮质酮/肾上腺酮(CO)检测试剂盒

HumanAcylationStimulatingProtein,ASPELISAKit 人酰化刺激蛋白(ASP)检测试剂盒 96T/48T 进口分装

Human8-isoprostaglandin,8-iso-PG检测试剂盒人8异前列腺素(8-iso-PG)检测试剂盒规格：96T/48T

正常大鼠(SpragueDawley)肾组织微粒体组分(5毫克/毫升)500微升

Mouseai-IgEreceptoraibodyELISAKit小鼠抗IgE受体抗体检测试剂盒规格
：96T/48T

小鼠结肠黏膜上皮细胞小鼠抗血小板抗体IgG   英文名称：   Mouse Aiplatelet aibody   规格
：      英文缩写：   APAb

小鼠载脂蛋白AI   英文名称
：   Mouse Apolipoprotein AI   规格：      英文缩写：   Apo-AI

小鼠载脂蛋白B   英文名称：   Mouse Apolipoprotein B   规格：      英文缩写：   Apo-B

小鼠载脂蛋白E   英文名称：   Mouse Apolipoprotein E   规格：      英文缩写：   ApoE

视天气状况和运输距离远近,公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。

1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中,置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输;收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养,如无法立刻进行复苏操作,冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。

T-25培养瓶充满培养基后进行常温运输;收到细胞后请镜下观察细胞生长状态,如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作,如悬浮的细胞较多,请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。

本公司的所有产品仅用于科学研究或者工业科研等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用，非食用