老哥俱乐部

① 组织块培养法

组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中，瓶壁可预先涂以胶原薄层，以利于组织块粘着于瓶壁，使周边细胞能沿瓶壁向外生长。

② 消化培养法

③ 悬浮细胞培养法

对于悬浮生长的细胞，如白血病细胞、淋巴细胞
、骨髓细胞
、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化，可采用低速离心分离，直接培养，或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。

④器官培养

器官培养是指从供体取得器官或组织块后，不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养，器官培养可保持器官组织的相对完整性，可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响
，以及局部环境的生物调节作用。

产品名称
：小鼠肺大动脉平滑肌细胞

英文名称：Mouse Pulmonary Great Artery Smooth Muscle Cells

组织来源：肺动脉组织

产品规格：5×105cells/T25细胞培养瓶

小鼠肺大动脉平滑肌分离自肺大动脉组织
；肺大动脉亦称肺动脉干
。在呼吸空气的脊椎动物中
，把静脉血由心脏导向肺脏的动脉。肺大动脉起于右心室，在主动脉之前向左上后方斜行，在主动脉弓下方分为左、右肺动脉，经肺门入肺。肺动脉干位于心包内，为一粗短的动脉干
。起自右心室，在升主动脉前方向左后上方斜行，至主动脉弓下方分为左
、右肺动脉。左肺动脉较短
，在左主支气管前方横行
，分二支进入左肺上、下叶
。右肺动脉较长而粗，经升主动脉和上腔静脉后方向右横行，至右肺门处分为三支进入右肺上、中、下叶。肺大动脉平滑肌细胞是肺血管的重要结构细胞之一，在调控肺血管的收缩和舒张功能中有重要作用。肺大动脉平滑肌细胞原代分离培养3天后，可见细胞贴壁伸展
，细胞形态大小不一，呈梭形、不规则形、三角形或扇形
，核卵圆形
、居中
；2周后细胞汇合，多数细胞伸展呈长梭形

，胞浆丰富，有分枝状突起，细胞平行排列成单层或部分区域多层重叠生长，高低起伏；细胞密度低时
，常交织成网状；密度高时，则排列为旋涡状或栅栏状。传代后细胞生长较快，4-6天即可汇合，并保持上述形态学特征和生长特点。肺大动脉平滑肌细胞的异常是肺动脉高压发生发展的重要病理学特征，其凋亡和增殖失衡是肺血管重塑的关键

。研究表明
，急性和慢性缺氧均可导致肺动脉高压，即缺氧性肺动脉高压，推断缺氧可能是通过促进肺大动脉平滑肌细胞的增殖而参与缺氧性肺动脉高压的发生发展。肺大动脉平滑肌细胞主要功能：①细胞表面表达介质（ICAM-1和VCAM-1）参与血管壁炎症反应；②是多数重要动脉疾病的靶细胞
。肺大动脉平滑肌细胞与主要病生理变化：①平滑肌增生易致肺动脉高压；②先天性肺动脉狭窄；③肺动脉栓塞
。

公司实验室分离的小鼠肺大动脉平滑肌采用-胶原酶联合消化法结合差速贴壁法制备而来
，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

质量检测

公司实验室分离的小鼠肺大动脉平滑肌经α-SMA免疫荧光鉴定
，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV
、支原体

、细菌

、酵母和真菌等。

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 成纤维细胞样

传代特性 可传3代左右

消化液 0.25%

培养条件 气相：空气，95%；CO2
，5%

取材→分离→培养和维持

1、取材

人和动物细胞的取材是原代细胞培养成功的首要条件，直接影响细胞的体外培养

。

(1) 取材的基本要求

① 取材要注意新鲜和保鲜

② 应严格无菌

③ 防止机械损伤

④ 去除无用组织和避免干燥

⑤ 应注意组织类型、分化程度、年龄等

⑥ 作好记录

2、分离

人或动物体内(或胚胎组织)由于多种细胞结合紧密，不利于各个细胞在体外培养中生长繁殖，必须将现有的组织块充分散开，使细胞解离出来
。

(1)悬浮细胞的分离方法

组织材料若来自血液
、羊水、胸水或腹水的悬液材料，的方法是采用1000r/min的低速离心10分钟。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层，这样可根据需要收获目的细胞
。

(2)实体组织材料的分离方法

对于实体组织材料，由于细胞间结合紧密
，为了使组织中的细胞充分分散
，形成细胞悬液，可采用机械分散法(物理裂解)和消化分离法
。

① 机械分散法

特点:简便
、快速,但对组织机械损伤大，而且细胞分散效果差,适用于处理纤维成分少的软组织。

② 消化分离法

组织消化法是把组织剪切成较小团块(或糊状)，应用酶的生化作用和非酶的化学作用进一步使细胞间的桥连结构松动
，使团块膨松，由块状变成絮状，此时再采用机械法，用吸管吹打分散或电磁搅拌或在摇珠瓶中振荡
，使细胞团块得以较充分的分散，制成少量细胞群团和大量单个细胞的细胞悬液
，接种培养后
，细胞容易贴壁生长
。

猪白介素8(IL-8/CXCL8)ELISAKit   ELISA. 

猪白介素6(IL-6)ELISAKit   ELISA. 

猪白介素4(IL-4)ELISAKit   ELISA. 

猪白介素3(IL-3)ELISAKit   ELISA.

猪肝细胞生长因子(HGF)ELISA 试剂盒

Human Ureaplasma urealyticum aibody (UU-Ab) ELISA Kit 人解脲脲原体抗体(UU-Ab)试剂盒

PorcineEndothelialniicoxidesyhase3,eNOS-3ELISAKit 猪内皮型合成酶3(eNOS-3)试剂盒 进口分装

CLIAKitforAlpha-bungarotoxin,Alpha-BGTELISAKitα-银环蛇毒素

血液赖(lysine)含量化学比色法定量试剂盒20次

NudeMouseProteinPhosphatase,PPELISAKit裸鼠蛋酸酶(PP)试剂盒

CNTF重组大鼠 CNTF / Ciliary Neurotrophic Factor 蛋白 Protein

HEV 戊型肝病毒(抗原 0.5mgHEV 戊型肝病毒(抗原)

KRAS重组人 K-Ras / K-Ras 蛋白 (His 标签) Protein

AMY2A Protein Human 重组人 AMY2A / Alpha-amylase 蛋白 (His 标签)

PRKCD Protein Mouse 重组小鼠 PKC delta / PRKCD 蛋白 (His & GST 标签)

HEV 戊型肝病毒(抗原 0.5mgHEV 戊型肝病毒(抗原)

AMY2A Protein Human 重组人 AMY2A / Alpha-amylase 蛋白 (His 标签)

CNTF重组大鼠 CNTF / Ciliary Neurotrophic Factor 蛋白 Protein

PRKCD Protein Mouse 重组小鼠 PKC delta / PRKCD 蛋白 (His & GST 标签)

KRAS重组人 K-Ras / K-Ras 蛋白 (His 标签) Protein

小鼠肺大动脉平滑肌细胞大鼠含血管性血友病因子A域蛋白1(vWA1)试剂盒
，英文名： vWA1 ELISA Kit

Rat 6 keto prostaglandin (6-K-PG) ELISA Kit 大鼠6酮前列腺素(6-K-PG)试剂盒

RatsolubleToll-likereceptor2,sTLR-2ELISAKit 大鼠可溶性Toll样受体2(sTLR2)试剂盒 进口分装

CLIAKitforeNOS(MouseEndothelialniicoxidesyhase)ELISAKit小鼠内皮型合成酶

细胞0脂皮尔斯(Pearse)染色试剂盒50次

Ratleukemiainhibitoryfactor,LIFELISAKit大鼠白血病抑制因子(LIF)试剂盒

视天气状况和运输距离远近,公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行
。

1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中,置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输;收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养,如无法立刻进行复苏操作,冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。

T-25培养瓶充满培养基后进行常温运输;收到细胞后请镜下观察细胞生长状态,如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作,如悬浮的细胞较多,请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁

。

本公司的所有产品仅用于科学研究或者工业科研等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用，非食用