老哥俱乐部

① 组织块培养法

组织块培养是常用
、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中，瓶壁可预先涂以胶原薄层
，以利于组织块粘着于瓶壁，使周边细胞能沿瓶壁向外生长
。

② 消化培养法

③ 悬浮细胞培养法

对于悬浮生长的细胞，如白血病细胞
、淋巴细胞、骨髓细胞
、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化，可采用低速离心分离，直接培养
，或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。

④器官培养

器官培养是指从供体取得器官或组织块后，不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养，器官培养可保持器官组织的相对完整性
，可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响

，以及局部环境的生物调节作用。

产品名称
：兔主动脉内皮细胞

英文名称
：Rabbit Aortic Endothelial Cells

组织来源：主动脉组织

产品规格：5×105cells/T25细胞培养瓶

兔主动脉内皮分离自主动脉组织；主动脉是体循环的动脉主干。其运行路径为：升主动脉起于左心室，至右侧第2胸肋关节高度移行为主动脉弓，弓行向左后至第4胸椎体下缘移行为降主动脉；在第12胸椎体高度穿膈的主动脉裂孔移行为腹主动脉

，以上为胸主动脉，至第4腰椎体下缘分为左、右髂总动脉；髂总动脉在骶髂关节高度分为髂内

、外动脉。主动脉内皮细胞是覆盖在主动脉内面的单层细胞，可分泌一系列血管活性物质而保持血管稳态，当其受到炎症或其它因素刺激后稳态被破坏而导致一些心血管疾病的发生
。因此
，主动脉内皮细胞已成为研究心血管疾病发病机制及治疗药物缺少的工具。内皮细胞或血管内皮是一薄层的专门上皮细胞，由一层扁平细胞所组成
。它形成血管的内壁，是血管管腔内血液及其他血管壁（单层鳞状上皮）的接口。内皮细胞是沿着整个循环系统，由心脏直至小的微血管

。

公司实验室分离的兔主动脉内皮采用-胶原酶联合消化法结合差速贴壁法
、并通过内皮细胞专用培养基培养筛选制备而来
，细胞总量约为5×10?cells/瓶
。

质量检测

公司实验室分离的兔主动脉内皮经CD31免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上
，且不含有HIV-1、HBV
、HCV、支原体、细菌
、酵母和真菌等。

包被条件 PLL（0.1mg/ml），明胶（0.1%）

培养基 含FBS

、生长添加剂、Penicillin
、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 内皮细胞样

传代特性 可传2-3代

消化液 0.25%

培养条件 气相
：空气
，95%
；CO2，5%

取材→分离→培养和维持

1、取材

人和动物细胞的取材是原代细胞培养成功的首要条件，直接影响细胞的体外培养。

(1) 取材的基本要求

① 取材要注意新鲜和保鲜

② 应严格无菌

③ 防止机械损伤

④ 去除无用组织和避免干燥

⑤ 应注意组织类型、分化程度
、年龄等

⑥ 作好记录

2、分离

人或动物体内(或胚胎组织)由于多种细胞结合紧密，不利于各个细胞在体外培养中生长繁殖，必须将现有的组织块充分散开，使细胞解离出来。

(1)悬浮细胞的分离方法

组织材料若来自血液

、羊水、胸水或腹水的悬液材料，的方法是采用1000r/min的低速离心10分钟。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层，这样可根据需要收获目的细胞。

(2)实体组织材料的分离方法

对于实体组织材料
，由于细胞间结合紧密
，为了使组织中的细胞充分分散

，形成细胞悬液

，可采用机械分散法(物理裂解)和消化分离法

。

① 机械分散法

特点:简便
、快速,但对组织机械损伤大，而且细胞分散效果差,适用于处理纤维成分少的软组织。

② 消化分离法

组织消化法是把组织剪切成较小团块(或糊状)，应用酶的生化作用和非酶的化学作用进一步使细胞间的桥连结构松动，使团块膨松，由块状变成絮状，此时再采用机械法，用吸管吹打分散或电磁搅拌或在摇珠瓶中振荡
，使细胞团块得以较充分的分散，制成少量细胞群团和大量单个细胞的细胞悬液
，接种培养后
，细胞容易贴壁生长。

1:250   250g

ypsin1:250,PorcinePancreas   25g

抑制剂   10g

ypsinInhibitor,Soybean   1g

鸭坏死因子α(TNF-α)试剂盒 96T/48T

Human ai keratin aibody (ASA) ELISA Kit 人抗皮肤抗体(ASA)试剂盒

Humaninducibleniicoxidesyhase,iNOSELISAKIT 人诱导型合成酶(iNOS)试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitforACTN-3(HumanAlpha-Actinin3)ELISAKit人α-辅肌动蛋白3

血液组织纤维型蛋白溶酶原激活剂(tPA)活性比色法定量试剂盒20次

MouseProcalcitonin,PCTELISAKit小鼠降钙素原(PCT)试剂盒规格
：96T/48T

IFNA14重组食蟹猴 / 恒河猴 IFNA14 / Interferon alpha-14 蛋白 Protein

IFN- Gamma(Interferon Gamma 0.5mgIFN- Gamma(Interferon Gamma)Ag-mouse、rat 干扰素-γ多肽抗原(大、小鼠)

ECE2重组人 ECE-2 蛋白 Protein

CALU Protein Human 重组人 CALU / Calumenin 蛋白

ADAM9 Protein Mouse 重组小鼠 ADAM9 蛋白

IFN- Gamma(Interferon Gamma 0.5mgIFN- Gamma(Interferon Gamma)Ag-mouse
、rat 干扰素-γ多肽抗原(大

、小鼠)

CALU Protein Human 重组人 CALU / Calumenin 蛋白

IFNA14重组食蟹猴 / 恒河猴 IFNA14 / Interferon alpha-14 蛋白 Protein

ADAM9 Protein Mouse 重组小鼠 ADAM9 蛋白

ECE2重组人 ECE-2 蛋白 Protein

兔主动脉内皮细胞大鼠饥饿激素(GHRL)试剂盒 
，英文名
： GHRL ELISA Kit

Rabbit beta amyloid (A beta 1-40 1-40) ELISA Kit 兔β淀粉样蛋白1-40(Aβ1-40)试剂盒

牛免疫缺陷病毒(BIV)核酸试剂盒(-PCR法) 48T

CLIAKitforMouserudimealbovineserumalbumincheck-upELISAKit小鼠的牛血清白蛋白残留检测

体液甘油三酯(iglyceride)含量酶连续循环反应比色法定量试剂盒20次

ELISAKit5-HT人5羟色胺

视天气状况和运输距离远近,公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行
。

1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中,置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输;收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养,如无法立刻进行复苏操作,冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月
。

T-25培养瓶充满培养基后进行常温运输;收到细胞后请镜下观察细胞生长状态,如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作,如悬浮的细胞较多,请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。

本公司的所有产品仅用于科学研究或者工业科研等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用，非食用