老哥俱乐部

细胞简介：

兔嗅上皮分离自嗅上皮组织；嗅上皮细胞是鼻腔的嗅区黏膜的一种特殊的感觉性上皮细胞，嗅上皮细胞为棱形双极细胞，每个细胞表面为细长的嗅毛
，突出于嗅区黏膜上皮细胞表面，而细胞的另一端为中央突
，常汇成多数细微的嗅丝

，组成嗅神经通向颅内。这些细胞的特殊结构，是嗅觉功能的重要组成部分。

方法简介：

实验室分离的兔嗅上皮采用胶原酶-联合消化法结合神经元专用培养基培养、化学试剂抑制法筛选制备而来，细胞总量约为5×10⁵cells/瓶
。

质量检测

实验室分离的兔嗅上皮经β-Tubulin免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上

，且不含有HIV-1、HBV、HCV
、支原体
、细菌、酵母和真菌等。

培养信息：

包被条件：鼠尾胶原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培养基：含FBS、生长添加剂
、Penicillin、Streptomycin等

换液频率：每2-3天换液一次

生长特性
：贴壁

细胞形态

：上皮细胞样

传代特性：属于高度分化细胞

；属于不增殖细胞群

消化液
：0.25%

培养条件：气相
：空气

，95%；CO2
，5%

兔嗅上皮体外培养周期有限
；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的佳培养状态
。

实验报告
：

一、分离与培养：

1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，将组织剪成1mm3左右大小
；

2
、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型胶原酶）
，混悬10s
，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；

3
、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后
，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次

，直至组织被消化；

4
、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min
，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬
，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃
，5％CO2 培养箱中培养；

5
、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；二、免疫荧光鉴定
：

1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基
，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min
；

2
、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min
；

3、PBS冲洗细胞2次，每次10min
，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；

4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗
，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜
；

5
、PBS冲洗细胞3次
，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗
， 37℃条件下放置1h
；

6
、用PBS冲洗3次，每次10min
，在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照
。

公司正在出售的产品：

大鼠β内啡肽受体(β-EPR)检测试剂盒 ，英文名： β-EPR ELISA Kit

Mice female three alcohol (E3) ELISA Kit 小鼠雌三醇(E3)检测试剂盒

ELISA 小鼠神经营养素3(mouse -3)  进口分装

CLIAKitforIL-12/P70ELISAKit大鼠白介素12

通用型马铃薯卷叶病毒(PotatoLeafrollVirus;PLRV)试剂20次

ELISAKitANG大鼠血管生长素

Western二抗稀释液 100ml

TSGF(Tumor Specific Growth Fanctor 0.5mgTSGF(Tumor Specific Growth Fanctor) 恶性特异性生长因子抗原

CDH2重组人 N-Cadherin / CD325 / CDH2D 蛋白 Protein

IL17A & IL17F Protein Human 重组人 IL17A & IL17F Heterodimer 蛋白

IL1R1 Protein Human 重组人 IL1R1 / CD121a 蛋白 (Fc 标签)

TSGF(Tumor Specific Growth Fanctor 0.5mgTSGF(Tumor Specific Growth Fanctor) 恶性特异性生长因子抗原

IL17A & IL17F Protein Human 重组人 IL17A & IL17F Heterodimer 蛋白

Western二抗稀释液 100ml

IL1R1 Protein Human 重组人 IL1R1 / CD121a 蛋白 (Fc 标签)

CDH2重组人 N-Cadherin / CD325 / CDH2D 蛋白 Protein

豚鼠神经蛋白聚糖(NCAN)检测试剂盒 ，英文名： NCAN ELISA Kit

Human low molecular weight heparin (LMWH) ELISA Kit 人低分子肝素(LMWH)检测试剂盒

Rhesusmajorhistocompatibilitycomplex,MHC/RhLAELISAKit 恒河猴主要组织相容性复合体(MHC/RhLA)检测试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitforBK(HumanBradykinin)ELISAKit人血管舒缓

细菌尼罗红染色试剂盒100次

Rabbitlymphocytefunctionassociatedaigen3,LFA-3ELISAKit兔淋巴细胞功能相关抗原3(LFA-3/CD58)检测试剂盒规格：96T/48T

兔嗅上皮细胞山羊免疫球蛋白G   英文名称
：   Immunoglobulin G   规格：      英文缩写：   IgG

绵羊促卵泡生成激素   英文名称：   Follicle Stimulating Hormone   规格：      英文缩写
：   FSH

绵羊免疫球蛋白A   英文名称：   Immunoglobulin A   规格：      英文缩写：   IgA

绵羊免疫球蛋白G   英文名称：   Immunoglobulin G   规格


：      英文缩写
：   IgG

注意事项：

1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液
、浑浊等现象，若有上述现象发生请及时和老哥俱乐部联系
。

2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基
、血清比例、所需细胞因子等
，确保细胞培养条件一致，若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题，责任由客户自行承担
。

3. 用75%酒精擦拭细胞瓶表面
，显微镜下观察细胞状态。因运输问题，部分细胞由于温度变化及剧烈碰亡破碎形成碎片，是正常现象。观察好细胞状态后，75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置4-6h。

4. 贴壁细胞可以消化，悬浮细胞直接混匀收集细胞
，900 rpm-1000 rpm离心3 min，弃上清。加5 mL PBS重悬细胞，再900 rpm-1000 rpm离心3 min，，用新鲜的*培养基重悬细胞
，并接种到新的培养瓶或培养皿中，置于培养箱中进行培养
。

5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。

6. 建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和我司技术部沟通交流。由于运输的原因，个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和老哥俱乐部联系，告知细胞的具体情况，以便老哥俱乐部的技术人员跟踪回访直至问题解决。

7. 该细胞仅供科研使用。

8. 备注

：运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的*培养基来培养细胞。收到细胞后次传代建议1
：2传代 。

9.注意： 1:2传代就是1个T25瓶传2个T25瓶或者2个6cm皿
。不是1个T25瓶传2个10cm皿。