細胞簡介 ：

兔嗅上皮分離自嗅上皮組織 ；嗅上皮細胞是鼻腔的嗅區黏膜的一種特殊的感覺性上皮細胞 ，嗅上皮細胞為棱形雙極細胞 ，每個細胞表麵為細長的嗅毛 ，突出於嗅區黏膜上皮細胞表麵 ，而細胞的另一端為中央突 ，常匯成多數細微的嗅絲 ，組成嗅神經通向顱內 。這些細胞的特殊結構 ，是嗅覺功能的重要組成部分 。

方法簡介 ：

實驗室分離的兔嗅上皮采用膠原酶-聯合消化法結合神經元專用培養基培養、化學試劑抑製法篩選製備而來 ，細胞總量約為5×10⁵cells/瓶 。

質量檢測

實驗室分離的兔嗅上皮經β-Tubulin免疫熒光鑒定 ，純度可達90%以上，且不含有HIV-1 、HBV 、HCV 、支原體 、細菌 、酵母和真菌等 。

培養信息 ：

包被條件：鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培養基 ：含FBS 、生長添加劑 、Penicillin 、Streptomycin等

換液頻率 ：每2-3天換液一次

生長特性 ：貼壁

細胞形態 ：上皮細胞樣

傳代特性 ：屬於高度分化細胞 ；屬於不增殖細胞群

消化液 ：0.25%

培養條件 ：氣相 ：空氣 ，95% ；CO2 ，5%

兔嗅上皮體外培養周期有限 ；建議使用配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養 ，以此保證該細胞的佳培養狀態 。

實驗報告 ：

一 、分離與培養 ：

1 、無菌條件下 ，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織 ，然後用PBS將此組織塊清洗2次 ，將組織剪成1mm3左右大小 ；

2 、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶） ，混懸10s ，置37℃條件下消化10min ，之後用滴管吹打製成單細胞懸液 ，自然沉澱並收集上清 ，用含10% FBS培養基終止消化後4℃放置 ；

3 、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液 ，混懸10s，置37℃消化10 min後 ，按上述方法收集上清並終止消化後4℃放置 ，重複此步驟2-3次 ，直至組織被消化 ；

4 、用200目不鏽鋼篩網過濾細胞消化液 ，1200r/min 離心10min ，棄去上清 ，沉澱細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養基混懸 ，接種於25cm2培養瓶 ，放置於37℃  ，5％CO2 培養箱中培養 ；

5 、差速貼壁1h後 ，吸出培養基 ，按實驗需要接種於6孔板中繼續培養 ；二 、免疫熒光鑒定 ：

1 、待心房肌細胞生長至80%融合時 ，棄去培養基 ，用溫育的PBS衝洗細胞2次 ，每次10min ，然後用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min ；

2 、PBS衝洗細胞2次 ，每次10min ，然後在4℃條件下 ，用0.1％Triton X-100透膜15min ；

3 、PBS衝洗細胞2次 ，每次10min ，然後在室溫條件下 ，用4% BSA封閉細胞30min ；

4 、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗 ，然後將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜 ；

5 、PBS衝洗細胞3次 ，每次10min ，按1 ：150的比例稀釋抗α-actin的二抗 ， 37℃條件下放置1h ；

6 、用PBS衝洗3次 ，每次10min ，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像並拍照 。

公司正在出售的產品 ：

大鼠β內啡肽受體(β-EPR)檢測試劑盒  ，英文名 ： β-EPR ELISA Kit

Mice female three alcohol (E3) ELISA Kit 小鼠雌三醇(E3)檢測試劑盒

ELISA 小鼠神經營養素3(mouse -3)  進口分裝

CLIAKitforIL-12/P70ELISAKit大鼠白介素12

通用型馬鈴薯卷葉病毒(PotatoLeafrollVirus;PLRV)試劑20次

ELISAKitANG大鼠血管生長素

Western二抗稀釋液 100ml

TSGF(Tumor Specific Growth Fanctor 0.5mgTSGF(Tumor Specific Growth Fanctor) 惡性特異性生長因子抗原

CDH2重組人 N-Cadherin / CD325 / CDH2D 蛋白 Protein

IL17A & IL17F Protein Human 重組人 IL17A & IL17F Heterodimer 蛋白

IL1R1 Protein Human 重組人 IL1R1 / CD121a 蛋白 (Fc 標簽)

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豚鼠神經蛋白聚糖(NCAN)檢測試劑盒  ，英文名 ： NCAN ELISA Kit

Human low molecular weight heparin (LMWH) ELISA Kit 人低分子肝素(LMWH)檢測試劑盒

Rhesusmajorhistocompatibilitycomplex,MHC/RhLAELISAKit 恒河猴主要組織相容性複合體(MHC/RhLA)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforBK(HumanBradykinin)ELISAKit人血管舒緩

細菌尼羅紅染色試劑盒100次

Rabbitlymphocytefunctionassociatedaigen3,LFA-3ELISAKit兔淋巴細胞功能相關抗原3(LFA-3/CD58)檢測試劑盒規格 ：96T/48T

兔嗅上皮細胞山羊免疫球蛋白G   英文名稱 ：   Immunoglobulin G   規格：      英文縮寫 ：   IgG

綿羊促卵泡生成激素   英文名稱 ：   Follicle Stimulating Hormone   規格 ：      英文縮寫 ：   FSH

綿羊免疫球蛋白A   英文名稱 ：   Immunoglobulin A   規格 ：      英文縮寫 ：   IgA

綿羊免疫球蛋白G   英文名稱 ：   Immunoglobulin G   規格 ：      英文縮寫 ：   IgG

注意事項 ：

1. 收到細胞後首先觀察細胞瓶是否完好 ，培養液是否有漏液 、渾濁等現象 ，若有上述現象發生請及時和老哥俱樂部聯係 。

2. 仔細閱讀細胞說明書 ，了解細胞相關信息 ，如細胞形態 、所用培養基 、血清比例 、所需細胞因子等 ，確保細胞培養條件一致 ，若由於培養條件不一致而導致細胞出現問題 ，責任由客戶自行承擔 。

3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表麵 ，顯微鏡下觀察細胞狀態 。因運輸問題 ，部分細胞由於溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片 ，是正常現象 。觀察好細胞狀態後，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置於37℃培養箱放置4-6h 。

4. 貼壁細胞可以消化 ，懸浮細胞直接混勻收集細胞 ，900 rpm-1000 rpm離心3 min ，棄上清 。加5 mL PBS重懸細胞 ，再900 rpm-1000 rpm離心3 min ， ，用新鮮的*培養基重懸細胞 ，並接種到新的培養瓶或培養皿中 ，置於培養箱中進行培養 。

5. 請客戶用相同條件的培養基用於細胞培養 。

6. 建議客戶收到細胞後前3天各拍幾張細胞照片 ，記錄細胞狀態 ，便於和我司技術部溝通交流 。由於運輸的原因 ，個別敏感細胞會出現不穩定的情況 ，請及時和老哥俱樂部聯係 ，告知細胞的具體情況 ，以便老哥俱樂部的技術人員跟蹤回訪直至問題解決 。

7. 該細胞僅供科研使用 。

8. 備注 ：運輸用的培養基(灌液培養基)不能再用來培養細胞 ，請換用按照說明書細胞培養條件新配製的*培養基來培養細胞 。收到細胞後次傳代建議1 ：2傳代  。

9.注意 ： 1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿 。不是1個T25瓶傳2個10cm皿 。