產品名稱 :兔小腦顆粒細胞
產品特點 :兔小腦顆粒細胞公司正在出售的產品犬腎細胞;MDCK(NBL-2) 人胚胎眼Tenon's囊成纖維細胞;HFTF HFE2 Others Human 人 Hemojuvelin / HFE2 杆狀病毒-昆蟲細胞裂解液 TEK Others Human 杆狀病毒-昆蟲細胞裂解液
產品型號 :
更新日期 :2024-12-13
訪問次數 :37
兔小腦顆粒細胞的詳細資料 :
實驗報告 :
一
、分離與培養
:
1 、無菌條件下 ,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織 ,然後用PBS將此組織塊清洗2次 ,將組織剪成1mm3左右大小 ;
2 、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶) ,混懸10s,置37℃條件下消化10min ,之後用滴管吹打製成單細胞懸液 ,自然沉澱並收集上清 ,用含10% FBS培養基終止消化後4℃放置 ;
3 、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液 ,混懸10s ,置37℃消化10 min後 ,按上述方法收集上清並終止消化後4℃放置 ,重複此步驟2-3次 ,直至組織被消化 ;
4 、用200目不鏽鋼篩網過濾細胞消化液 ,1200r/min 離心10min ,棄去上清 ,沉澱細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸 ,接種於25cm2培養瓶 ,放置於37℃ ,5%CO2 培養箱中培養 ;
5 、差速貼壁1h後 ,吸出培養基 ,按實驗需要接種於6孔板中繼續培養 ;二 、免疫熒光鑒定 :
1 、待心房肌細胞生長至80%融合時 ,棄去培養基 ,用溫育的PBS衝洗細胞2次 ,每次10min ,然後用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min ;
2 、PBS衝洗細胞2次 ,每次10min ,然後在4℃條件下 ,用0.1%Triton X-100透膜15min ;
3 、PBS衝洗細胞2次 ,每次10min ,然後在室溫條件下 ,用4% BSA封閉細胞30min ;
4 、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗 ,然後將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜 ;
5 、PBS衝洗細胞3次 ,每次10min ,按1 :150的比例稀釋抗α-actin的二抗 , 37℃條件下放置1h ;
6
、用PBS衝洗3次
,每次10min
,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像並拍照
。
細胞簡介 :
兔小腦顆粒分離自小腦皮層組織 ;神經元是神經係統基本的結構與功能單位 ,小腦顆粒神經元是體積較小的神經元 ,直徑約10μm ,在中樞神經係統中含量非常豐富 ,近乎神經元數量的一半 。由於小腦神經元的生長 、分化和大腦皮層神經元相似 ,而且數量多 、便於取材,因此小腦顆粒神經元是研究神經元生長發育 、神經軸突再生及神經疾病發生機製和臨床神經藥理的重要手段 。小腦顆粒神經元是小腦主要的中間神經元 ,在哺乳動物的小腦內數量為豐富 。顆粒神經元的軸突與苔狀纖維和爬行纖維相聯係 ,形成小腦皮層內的神經元環路 ,在小腦的神經活動中起著非常重要的作用 。在動物傳染性海綿狀腦病中 ,病變可波及小腦顆粒神經元 ,導致小腦皮層的神經元環路受損 ,從而呈現神經性行為失調 。研究小腦顆粒神經元在動物傳染性海綿狀腦病病理學變化中的反應 、病理發生的機理特別是分子機理 ,有賴於小腦顆粒神經元細胞模型的建立 。小腦顆粒細胞的軸突是沿冠狀軸分布的平行纖維 ,正是這種排列保證了興奮的單向傳導 ,這是小腦功能理論中的關鍵假設 ,小腦顆粒細胞通過g-氨基丁酸接受戈爾吉細胞的抑製性突觸的信息傳入 。
產品名稱 | 兔小腦顆粒細胞 | 組織來源 | 腦 |
英文名稱 | Rabbit Cerebellar Granule Cells | 產品規格 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 |
方法簡介
:
實驗室分離的兔小腦顆粒采用消化法結合神經元專用培養基 、化學試劑抑製法篩選製備而來 ,細胞總量約為5×10⁵cells/瓶 。
質量檢測
實驗室分離的兔小腦顆粒經NSE免疫熒光鑒定 ,純度可達90%以上 ,且不含有HIV-1 、HBV 、HCV 、支原體 、細菌 、酵母和真菌等 。
培養信息
:
包被條件 :PLL(0.1mg/ml)
培養基 :含B-27 、Penicillin 、Streptomycin等
換液頻率 :每2-3天換液一次
生長特性 :貼壁
細胞形態 :神經元細胞樣
傳代特性 :屬於終末分化細胞 ;屬於不增殖細胞群
消化液 :0.25%
培養條件 :氣相 :空氣 ,95% ;CO2 ,5%
兔小腦顆粒體外培養周期有限 ;建議使用配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養 ,以此保證該細胞的佳培養狀態 。
注意事項
:
1. 收到細胞後首先觀察細胞瓶是否完好
,培養液是否有漏液
、渾濁等現象
,若有上述現象發生請及時和老哥俱樂部聯係
。
2. 仔細閱讀細胞說明書 ,了解細胞相關信息 ,如細胞形態 、所用培養基 、血清比例 、所需細胞因子等 ,確保細胞培養條件一致 ,若由於培養條件不一致而導致細胞出現問題 ,責任由客戶自行承擔 。
3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表麵 ,顯微鏡下觀察細胞狀態 。因運輸問題 ,部分細胞由於溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片 ,是正常現象 。觀察好細胞狀態後 ,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置於37℃培養箱放置4-6h 。
4. 貼壁細胞可以消化 ,懸浮細胞直接混勻收集細胞 ,900 rpm-1000 rpm離心3 min ,棄上清 。加5 mL PBS重懸細胞 ,再900 rpm-1000 rpm離心3 min , ,用新鮮的*培養基重懸細胞 ,並接種到新的培養瓶或培養皿中 ,置於培養箱中進行培養 。
5. 請客戶用相同條件的培養基用於細胞培養 。
6. 建議客戶收到細胞後前3天各拍幾張細胞照片 ,記錄細胞狀態 ,便於和我司技術部溝通交流。由於運輸的原因 ,個別敏感細胞會出現不穩定的情況 ,請及時和老哥俱樂部聯係,告知細胞的具體情況 ,以便老哥俱樂部的技術人員跟蹤回訪直至問題解決 。
7. 該細胞僅供科研使用 。
8. 備注 :運輸用的培養基(灌液培養基)不能再用來培養細胞 ,請換用按照說明書細胞培養條件新配製的*培養基來培養細胞 。收到細胞後次傳代建議1 :2傳代 。
9.注意 : 1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿 。不是1個T25瓶傳2個10cm皿 。
公司正在出售的產品
:
大鼠尿卟啉原脫羧酶(UROD)檢測試劑盒 ,英文名 : UROD ELISA Kit
Monkey E selectin (E-Selectin/CD62E) ELISA Kit 猴E選擇素(E-Selectin/CD62E)檢測試劑盒
RatvonWillebrandFactor,vWFELISAKit 大鼠血管性血友病因子/瑞斯托黴素輔因子(VWF)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforGM-CSFAb(Humanai-Granulocyte-MacrophageColonyStimulatingFactoraibody)ELISAKit人粒細胞巨噬細胞集落刺激因子抗體
細胞氧化酶(DAO)活性熒光定量檢測試劑盒20次
RatSuperOxidaseDimase,SODELISAKit大鼠超氧化物歧化酶(SOD)檢測試劑盒規格 :96T/48T
EPHA4重組食蟹猴 EphA4 蛋白 (Fc 標簽) Protein
MMP-1 基質金屬蛋白酶-1 0.5mgMMP-1 基質金屬蛋白酶-1
SERPINA12重組人 Vaspin / SerpinA12 蛋白 Protein
IL10 Protein Human 重組人 IL10 / Interleukin-10 蛋白
F7 Protein Mouse 重組小鼠 Coagulation Factor VII / FVII / F7 蛋白
MMP-1 基質金屬蛋白酶-1 0.5mgMMP-1 基質金屬蛋白酶-1
IL10 Protein Human 重組人 IL10 / Interleukin-10 蛋白
EPHA4重組食蟹猴 EphA4 蛋白 (Fc 標簽) Protein
F7 Protein Mouse 重組小鼠 Coagulation Factor VII / FVII / F7 蛋白
SERPINA12重組人 Vaspin / SerpinA12 蛋白 Protein
豚鼠血管緊張素Ⅱ(ANG-Ⅱ)檢測試劑盒 ,英文名 : ANG-Ⅱ ELISA Kit
Human proteolipid protein (PLP) ELISA Kit 人蛋白脂質蛋白抗體(PLP)檢測試劑盒
Monkeyacetylcholinereceptoraibody,AChRabELISAKit乙酰受體抗體(AChRab)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforBMG/Beta2-MG(HumanBeta2-microglobulin)ELISAKit人β2微球蛋白
細菌內毒素濁度法定量檢測試劑盒20次
RabbitmajorhistocompatibilitycomplexⅡ,MHCⅡ/RLAⅡELISAKit兔主要組織相容性複合體Ⅱ類(MHCⅡ/RLAⅡ)檢測試劑盒規格 :96T/48T
兔小腦顆粒細胞十六烷基基溴化胺 50g
CTAB 250g
5’-三0酸胞苷三鹽 50mg
CTP 100mg
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