產品名稱 :兔外周血樹突狀細胞 (未成熟DC細胞)
產品特點 :兔外周血樹突狀細胞 (未成熟DC細胞)公司正在出售的產品家兔骨髓間充質幹細胞;2012083MSC EB病毒轉化的人B淋巴細胞(彝族);HYL APOL1 Others Human 人 APOL1 / apolipoprotein L1 杆狀病毒-昆蟲細胞裂解液 RGMA Others Human 人 RGMA 人細胞裂解液
產品型號 :
更新日期 :2024-12-13
訪問次數 :32
兔外周血樹突狀細胞 (未成熟DC細胞)的詳細資料 :
細胞簡介 :
兔外周血DC分離自外周血 ,由外周血單核細胞誘導而成的 ;外周血是除骨髓之外的血液 ,臨床上常用一些方法把骨髓中的造血幹細胞釋放到血液中 ,再在從血液中提取分離得到造血幹細胞 ,老哥俱樂部把這樣得到的幹細胞稱為外周血幹細胞 ,在二十一世紀初人類開始的生命方舟計劃中提出外周血這一新概念 。樹突狀細胞分為成熟樹突狀細胞和未成熟樹突狀細胞 ,典型的未成熟樹突狀細胞呈半貼壁生長 ,在GM-CSF 、IL4的作用下形成葡萄串樣集落 ,細胞大而形態不規則 ,表麵皺褶多 ,亦可見少量短刺狀突 ,胞內細胞器豐富並可見吞噬泡 ,具有較強的遷移能力 ,伴隨有部分未誘導成的單核細胞 ,貼壁形態多樣 。而成熟的樹突狀細胞由未成熟DC進一步經TNFα 、LPS等誘導而成 ,多數呈懸浮生長 , 細胞呈圓形 ,細胞體積進一步增大,表麵大量粗細不等的樹枝樣突起(高倍鏡或者電鏡下可觀察到 ) ,伴隨少量貼壁未成熟細胞或者單核細胞 。未成熟DC細胞長時間培養也可能導致自發分化成熟 。DC細胞尚無特異性細胞表麵分子標誌 ,主要通過形態學 、組合性細胞表麵標誌 、在混合淋巴細胞反應中能激活初始T細胞等特征進行鑒定 。其中成熟樹突狀細胞表麵高表達主要組織相容性複合物(MHC)以及CD80 、CD86等共刺激分子 ,進而激活T淋巴細胞 ,誘導免疫應答 ,處於啟動 、調控 、並維持免疫應答的中心環節 ;未成熟樹突狀細胞具有很強的抗原攝取加工能力 ,但由於缺乏多種共刺激分子不能使初始T細胞活化 、增殖產生免疫應答 ,不能激活T細胞的信號 ,可導致T細胞無能 ,從而誘導免疫低反應或抗原免疫特異性耐受 。未成熟樹突狀細胞表麵CD80 、CD86 、MHC-Ⅱ類分子等共刺激分子表達較低 ,一般在30%以下 。
產品名稱 | 兔外周血樹突狀細胞 (未成熟DC細胞) | 組織來源 | 外周血 |
英文名稱 | Rabbit Peripheral Blood Immature Dendritic Cells | 產品規格 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 |
方法簡介
:
實驗室分離的兔外周血未成熟DC采用密度梯度離心法分離外周血單個核細胞 、培養過程添加細胞因子誘導而來 ,細胞總量約為5×10⁵cells/瓶 。
質量檢測
實驗室分離的兔外周血樹突狀(未成熟DC細胞)經CD86免疫熒光鑒定 、細胞形態等綜合鑒定 ,純度可達80%以上 ,且不含有HIV-1 、HBV 、HCV 、支原體 、細菌 、酵母和真菌等 。
培養信息
:
培養基 :含FBS 、生長添加劑 、Penicillin 、Streptomycin等
換液頻率 :每2-3天換液一次
生長特性 :半貼壁半懸浮
細胞形態 :圓形 、梭形 、多角形 ,形態多樣
傳代特性 :屬於高度分化細胞;屬於不增殖細胞群
消化液 :0.25%
培養條件 :氣相 :空氣 ,95% ;CO2 ,5%
兔外周血樹突狀細胞 (未成熟DC細胞)體外培養周期有限 ;建議使用配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養 ,以此保證該細胞的佳培養狀態 。
實驗報告 :
一
、分離與培養
:
1 、無菌條件下 ,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織 ,然後用PBS將此組織塊清洗2次 ,將組織剪成1mm3左右大小 ;
2 、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶) ,混懸10s ,置37℃條件下消化10min ,之後用滴管吹打製成單細胞懸液 ,自然沉澱並收集上清 ,用含10% FBS培養基終止消化後4℃放置 ;
3 、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液 ,混懸10s ,置37℃消化10 min後 ,按上述方法收集上清並終止消化後4℃放置 ,重複此步驟2-3次 ,直至組織被消化 ;
4 、用200目不鏽鋼篩網過濾細胞消化液 ,1200r/min 離心10min ,棄去上清 ,沉澱細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸 ,接種於25cm2培養瓶 ,放置於37℃ ,5%CO2 培養箱中培養 ;
5 、差速貼壁1h後 ,吸出培養基 ,按實驗需要接種於6孔板中繼續培養 ;二 、免疫熒光鑒定 :
1 、待心房肌細胞生長至80%融合時 ,棄去培養基 ,用溫育的PBS衝洗細胞2次 ,每次10min ,然後用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min ;
2 、PBS衝洗細胞2次 ,每次10min ,然後在4℃條件下 ,用0.1%Triton X-100透膜15min ;
3 、PBS衝洗細胞2次 ,每次10min ,然後在室溫條件下 ,用4% BSA封閉細胞30min ;
4 、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗 ,然後將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜 ;
5 、PBS衝洗細胞3次,每次10min ,按1 :150的比例稀釋抗α-actin的二抗 , 37℃條件下放置1h ;
6
、用PBS衝洗3次
,每次10min
,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像並拍照
。
公司正在出售的產品
:
大鼠跨膜蛋白27(TMEM27)檢測試劑盒 ,英文名 : TMEM27 ELISA Kit
Monkey macrophage inflammatory protein 1 alpha (MIP-1 alpha /CCL3) ELISA Kit巨噬細胞性蛋白1α(MIP-1α/CCL3)檢測試劑盒
Ratdopamine,DAELISAKit 大鼠多巴胺(DA)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforFT4遊離T4
細胞花生四烯酸(arachidonicacid)酶反應比色法定量檢測試劑盒20次
Ratplatelet-derivedgrowthfactor-BB,PDGF-BBELISAKit大鼠血小板衍生生長因子BB(PDGF-BB)檢測試劑盒規格 :96T/48T
CEACAM1重組小鼠 CEACAM1 / CD66a 蛋白 Protein
B7-H1/PDL1/CD274(programmed death ligand 1 0.5mgB7-H1/PDL1/CD274(programmed death ligand 1) 程序性死亡配體1(多肽)
CSF1R重組人 CSF1R / MCSF Receptor / CD115 蛋白 (aa 543-922, His & GST 標簽) Protein
IGFBP6 Protein Human 重組人 IGFBP6 / IBP-6 蛋白
F3 Protein Rat 重組大鼠 Coagulation Factor III / Tissue Factor / CD142 蛋白
B7-H1/PDL1/CD274(programmed death ligand 1 0.5mgB7-H1/PDL1/CD274(programmed death ligand 1) 程序性死亡配體1(多肽)
IGFBP6 Protein Human 重組人 IGFBP6 / IBP-6 蛋白
CEACAM1重組小鼠 CEACAM1 / CD66a 蛋白 Protein
F3 Protein Rat 重組大鼠 Coagulation Factor III / Tissue Factor / CD142 蛋白
CSF1R重組人 CSF1R / MCSF Receptor / CD115 蛋白 (aa 543-922, His & GST 標簽) Protein
豚鼠轉化生長因子β1(TGF-β1)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human aconitase 2 (ACO-2) ELISA Kit 人烏頭酸酶2(ACO-2)檢測試劑盒
HumanNoradrenalineBitaas,NE-BELISAKit 人重去甲(NE-B)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝
HumancrosslinkedN-telopeptideoftypeⅠcollagen,X檢測試劑盒人Ⅰ型膠原N末端肽(X)檢測試劑盒規格 :96T/48T
組織DNA損傷彗星熒光檢測試劑盒20次
HumanProstaglandinF2α ,PGF2αELISAKit人前列腺素F2α(PGF2α)檢測試劑盒規格 :96T/48T
兔外周血樹突狀細胞 (未成熟DC細胞)四甲基化銨 100g
TMA 500g
四甲基胺 5g
TMB 1g
注意事項
:
1. 收到細胞後首先觀察細胞瓶是否完好
,培養液是否有漏液
、渾濁等現象
,若有上述現象發生請及時和老哥俱樂部聯係
。
2. 仔細閱讀細胞說明書 ,了解細胞相關信息 ,如細胞形態 、所用培養基 、血清比例 、所需細胞因子等 ,確保細胞培養條件一致 ,若由於培養條件不一致而導致細胞出現問題 ,責任由客戶自行承擔 。
3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表麵 ,顯微鏡下觀察細胞狀態 。因運輸問題 ,部分細胞由於溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片 ,是正常現象 。觀察好細胞狀態後 ,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置於37℃培養箱放置4-6h 。
4. 貼壁細胞可以消化 ,懸浮細胞直接混勻收集細胞 ,900 rpm-1000 rpm離心3 min ,棄上清 。加5 mL PBS重懸細胞 ,再900 rpm-1000 rpm離心3 min , ,用新鮮的*培養基重懸細胞 ,並接種到新的培養瓶或培養皿中 ,置於培養箱中進行培養 。
5. 請客戶用相同條件的培養基用於細胞培養 。
6. 建議客戶收到細胞後前3天各拍幾張細胞照片 ,記錄細胞狀態 ,便於和我司技術部溝通交流 。由於運輸的原因 ,個別敏感細胞會出現不穩定的情況 ,請及時和老哥俱樂部聯係 ,告知細胞的具體情況 ,以便老哥俱樂部的技術人員跟蹤回訪直至問題解決 。
7. 該細胞僅供科研使用 。
8. 備注 :運輸用的培養基(灌液培養基)不能再用來培養細胞 ,請換用按照說明書細胞培養條件新配製的*培養基來培養細胞 。收到細胞後次傳代建議1 :2傳代 。
9.注意 : 1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿 。不是1個T25瓶傳2個10cm皿 。
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