老哥俱乐部

细胞简介：

兔胎盘间充质干分离自胎盘组织
；胎盘（placenta）是哺乳动物妊娠期间由胚胎的胚膜和母体子宫内膜联合长成的母子间交换物质的过渡性器官，由羊膜
、叶状绒毛膜和底蜕膜构成。胎儿在子宫中发育

，依靠胎盘从母体取得营养，而双方保持相当的独立性。胎盘还产生多种维持妊娠的激素
，是一个重要的内分泌器官

。有些爬行类和鱼类也以胎生方式繁殖后代，胚胎生长出一些辅助结构如卵黄囊、鳃丝等与母体组织紧密结合

，以达到母子间物质的交换
，这样的结构称假胎盘
。胎盘间充质干细胞（mesenchymal stem cell，MSC）是一种多能干细胞
，是具有自我复制能力的多潜能细胞

。在一定条件下，它可以分化成多种功能细胞像APSC多能细胞。在胚胎发育中来源于中胚层

。在机体正常的组织损伤修复过程中
，MSC是一种重要的参与组织再生的细胞库。在组织损伤引起的特殊信号作用下，MSC迁移到受损部位，在局部聚集增殖，依据不同的损伤信号沿着不同途径分化。MSC易于分离扩增
，体外倍增能力旺盛，能保持其多向分化能力。因此，MSC是一种实用的组织修复种子细胞。相较于其他干细胞，胎盘间充质干细胞具有来源方便

，细胞数量充足

，易于分离、培养、扩增和纯化，传代扩增多代后仍具有干细胞特性
。胎盘是干细胞的佳来源。

方法简介：

实验室分离的兔胎盘间充质干采用-胶原酶联合消化法制备而来，细胞总量约为5×10⁵cells/瓶
。

质量检测

实验室分离的兔胎盘间充质干经CD90免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1
、HBV、HCV、支原体
、细菌
、酵母和真菌等。

培养信息
：

培养基：含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率：每2-3天换液一次

生长特性：贴壁

细胞形态：成纤维细胞样

传代特性：可传5代左右
；3代以内状态佳

消化液
：0.25%

培养条件：气相：空气，95%；CO2，5%

兔胎盘间充质干体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养
，以此保证该细胞的佳培养状态
。

实验报告
：

一
、分离与培养

：

1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织
，然后用PBS将此组织块清洗2次，将组织剪成1mm3左右大小；

2
、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型胶原酶）

，混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液

，自然沉淀并收集上清
，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置
；

3
、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次

，直至组织被消化；

4

、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养


；

5、差速贴壁1h后，吸出培养基
，按实验需要接种于6孔板中继续培养；二
、免疫荧光鉴定：

1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基
，用温育的PBS冲洗细胞2次
，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min；

2、PBS冲洗细胞2次，每次10min
，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3
、PBS冲洗细胞2次

，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min
；

4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜
；

5、PBS冲洗细胞3次
，每次10min
，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h
；

6
、用PBS冲洗3次
，每次10min，在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。

公司正在出售的产品

：

小鼠绒毛膜(CG)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠二(MDA)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠超氧化物歧化酶(SOD)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠C肽(C-Peptide)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠生长激素释放肽ghrelin(GHRP-Ghrelin)ELISA 试剂盒 96T/48T

Human immunoglobulin E (IgE) ELISA Kit E(IgE)试剂盒

HumanAquaporin3,AQP-3ELISAKit 人水通道蛋白3(AQP-3)试剂盒 96T/48T 进口分装

Equineamyloidbetapeptide1-40,Aβ1-40试剂盒马β淀粉样蛋白1-40(Aβ1-40)试剂盒规格：96T/48T

真菌/酵母NAD依赖性甘油-3-0酸脱氢酶(NAD-Glyceraldehyde-3-PhosphateDehydrogenase;NAD-GAPDH)活性光谱法定量试剂盒20次

MouseCrosslaps,CrELISAKit小鼠骨胶原交联(Cr)试剂盒规格

：96T/48T

Spike重组SARS Spike 蛋白 (Receptor Binding Domain, Fc 标签) Protein

TBX2/T-box2(T-box Protein 2 0.5mgTBX2/T-box2(T-box Protein 2) 新型抑癌基因(多肽)

IL10RB重组人 IL10Rb 蛋白 Protein

CNPY3 Protein Human 重组人 CNPY3 / PRAT4A / ERDA5 蛋白 (Fc 标签)

NTRK3 Protein Human 重组人 TrkC / NTRK3 蛋白 (His & Fc 标签)

TBX2/T-box2(T-box Protein 2 0.5mgTBX2/T-box2(T-box Protein 2) 新型抑癌基因(多肽)

CNPY3 Protein Human 重组人 CNPY3 / PRAT4A / ERDA5 蛋白 (Fc 标签)

Spike重组SARS Spike 蛋白 (Receptor Binding Domain, Fc 标签) Protein

NTRK3 Protein Human 重组人 TrkC / NTRK3 蛋白 (His & Fc 标签)

IL10RB重组人 IL10Rb 蛋白 Protein

兔胎盘间充质干细胞大鼠间羟(MN)试剂盒 ，英文名
： MN ELISA Kit

Mouse tumor necrosis factor beta (TNF- beta) ELISA Kit 小鼠肿瘤坏死因子β(TNF-β)试剂盒

RatADisiegrinAndMetalloprotease8,ADAM8ELISAKit 大鼠解整合素样金属蛋白酶8(ADAM8)试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitforFETU-A(HumanFetuinA)ELISAKit人胎球蛋白A

细胞基质金属蛋白酶(MMP-2)琥珀酰明胶法比色定量试剂盒20次

RatOncostatin-M,OSMELISAKit大鼠抑瘤素M(OSM)试剂盒规格：96T/48T

注意事项：

1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液
、浑浊等现象，若有上述现象发生请及时和老哥俱乐部联系
。

2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态
、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等，确保细胞培养条件一致，若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题，责任由客户自行承担。

3. 用75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态
。因运输问题，部分细胞由于温度变化及剧烈碰亡破碎形成碎片，是正常现象。观察好细胞状态后
，75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置4-6h。

4. 贴壁细胞可以消化，悬浮细胞直接混匀收集细胞，900 rpm-1000 rpm离心3 min，弃上清。加5 mL PBS重悬细胞，再900 rpm-1000 rpm离心3 min，，用新鲜的*培养基重悬细胞，并接种到新的培养瓶或培养皿中
，置于培养箱中进行培养。

5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。

6. 建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和我司技术部沟通交流
。由于运输的原因
，个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和老哥俱乐部联系，告知细胞的具体情况

，以便老哥俱乐部的技术人员跟踪回访直至问题解决
。

7. 该细胞仅供科研使用

。

8. 备注：运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞
，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的*培养基来培养细胞。收到细胞后次传代建议1：2传代
。

9.注意： 1:2传代就是1个T25瓶传2个T25瓶或者2个6cm皿
。不是1个T25瓶传2个10cm皿
。