① 組織塊培養法

組織塊培養是常用 、簡便易行和成功率較高的原代培養方法 。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種於培養瓶(或皿)中 ，瓶壁可預先塗以膠原薄層 ，以利於組織塊粘著於瓶壁 ，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長 。

② 消化培養法

③ 懸浮細胞培養法

對於懸浮生長的細胞 ，如白血病細胞 、淋巴細胞 、骨髓細胞 、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化 ，可采用低速離心分離 ，直接培養 ，或經淋巴細胞分層液分離後接種培養 。

④器官培養

器官培養是指從供體取得器官或組織塊後 ，不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養 ，器官培養可保持器官組織的相對完整性 ，可用於重點觀察細胞間的聯係 、排列情況和相互影響 ，以及局部環境的生物調節作用 。

產品名稱 ：兔腎小球係膜細胞

英文名稱 ：Rabbit Glomerular Mesangial Cells

組織來源 ：腎

產品規格 ：5×105cells/T25細胞培養瓶

兔腎小球係膜分離自腎小球組織 ；腎小球是腎元中的用於將血液過濾生成原尿的一團毛細血叢 ，被鮑氏囊所包裹 ，是尿液形成的重要構造 。血液經由入球小動脈進入腎小球 。腎小球內的微血管不像其他微血管 ，匯流入靜脈 ，而是流入出球小動脈 。在腎小球內 ，微血管受到高壓 ，而加速了超濾作用（hyperfiltration）的進行 。微血管中的血液經由超濾作用之後 ，形成濾液 ，滲入鮑氏囊內 。腎小球與鮑氏囊合稱為腎小體 ，腎小球的過濾速率便稱為腎小球過濾率 。腎小球係膜是位於腎小球毛細血管袢之間的一種特殊間充質 ，由係膜細胞和係膜基質組成 。腎小球係膜細胞是腎小球內非常活躍的細胞 ，具有分泌細胞基質 、產生細胞因子 、吞噬和清除大分子物質及類似平滑肌細胞收縮的功能 。腎小球係膜細胞增生和基質的過多產生是多種腎小球腎炎的主要病理表現 。腎小球係膜細胞的培養是研究係膜擴張 、瘢痕形成和腎小球硬化的理想方法 。係膜細胞的主要作用可能有 ：①收縮作用 ，入球小動脈和出球動脈的收縮作用受係膜細胞的調節 ，以影響毛細血管袢的內壓和濾過率 ；②支持作用 ，它填充於毛細血管袢之間 ，支持毛細血管的位置 ；③吞噬作用 ，能吞噬被阻留在基膜內的大分子物質和蛋白質 ；④分泌腎素 ，在腎缺血或免疫複合物沉積時 ，係膜細胞增生且分泌腎素 。

實驗室分離的兔腎小球係膜采用機械研磨法結合不同孔徑不鏽鋼網篩過濾後使用膠原酶消化製備而來，細胞總量約為5×10⁵cells/瓶 。

質量檢測

實驗室分離的兔腎小球係膜經α-SMA免疫熒光鑒定 ，純度可達90%以上 ，且不含有HIV-1 、HBV 、HCV 、支原體 、細菌 、酵母和真菌等 。

包被條件 ：PLL（0.1mg/ml）

培養基 ：含FBS 、生長添加劑 、Penicillin 、Streptomycin等

換液頻率 ：每2-3天換液一次

生長特性 ：貼壁

細胞形態 ：成纖維細胞樣

傳代特性 ：可傳1-2代

消化液 ：0.25%

培養條件 ：氣相 ：空氣 ，95% ；CO2 ，5%

兔腎小球係膜體外培養周期有限 ；建議使用配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養 ，以此保證該細胞的佳培養狀態 。

取材→分離→培養和維持

1 、取材

人和動物細胞的取材是原代細胞培養成功的首要條件 ，直接影響細胞的體外培養 。

(1) 取材的基本要求

① 取材要注意新鮮和保鮮

② 應嚴格無菌

③ 防止機械損傷

④ 去除無用組織和避免幹燥

⑤ 應注意組織類型 、分化程度 、年齡等

⑥ 作好記錄

2 、分離

人或動物體內(或胚胎組織)由於多種細胞結合緊密 ，不利於各個細胞在體外培養中生長繁殖 ，必須將現有的組織塊充分散開 ，使細胞解離出來 。

(1)懸浮細胞的分離方法

組織材料若來自血液 、羊水 、胸水或腹水的懸液材料 ，的方法是采用1000r/min的低速離心10分鍾 。經離心後由於各種細胞的比重不同可在分層液中形成不同層 ，這樣可根據需要收獲目的細胞 。

(2)實體組織材料的分離方法

對於實體組織材料 ，由於細胞間結合緊密 ，為了使組織中的細胞充分分散 ，形成細胞懸液 ，可采用機械分散法(物理裂解)和消化分離法 。

① 機械分散法

特點:簡便 、快速,但對組織機械損傷大 ，而且細胞分散效果差,適用於處理纖維成分少的軟組織 。

② 消化分離法

組織消化法是把組織剪切成較小團塊(或糊狀) ，應用酶的生化作用和非酶的化學作用進一步使細胞間的橋連結構鬆動 ，使團塊膨鬆 ，由塊狀變成絮狀 ，此時再采用機械法 ，用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠瓶中振蕩 ，使細胞團塊得以較充分的分散 ，製成少量細胞群團和大量單個細胞的細胞懸液 ，接種培養後 ，細胞容易貼壁生長 。

小鼠過敏毒素/補體片斷4a(C4a)試劑盒   96T/48T

小鼠胱天蛋白酶9(Casp-9)試劑盒   96T/48T

小鼠胱天蛋白酶8(Casp-8)試劑盒   96T/48T

小鼠胱天蛋白酶3(Casp-3)試劑盒   96T/48T

小鼠抗(AT)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat ai monocyte aibody (AMA) ELISA Kit 大鼠抗單核細胞抗體(AMA)試劑盒

HumanfibrinopeptideB,FPBELISAKit 人血纖肽/纖維蛋白肽B(FPB)試劑盒 96T/48T 進口分裝

HumanAmebiasis試劑盒人阿米巴(Amebiasis)試劑盒規格 ：96T/48T

植物單酚氧化酶(monophenolase)活性比色法定量試劑盒20次

MonkeyIerleukin2,IL-2ELISAKit猴白介素2(IL-2)試劑盒規格 ：96T/48T

ERBB2重組恒河猴 HER2 / ErbB2 蛋白 Protein

P19ARF p19ARF抑癌基因抗原 0.5mgP19ARF p19ARF抑癌基因抗原

CA8重組人 Carbonic Anhydrase VIII / CA8 蛋白 Protein

DNASE1 Protein Human 重組人 DNASE1 / Deoxyribonuclease I / DNL1 蛋白

IFNA5 Protein Mouse 重組小鼠 IFNA5 / IFNaG 蛋白

P19ARF p19ARF抑癌基因抗原 0.5mgP19ARF p19ARF抑癌基因抗原

DNASE1 Protein Human 重組人 DNASE1 / Deoxyribonuclease I / DNL1 蛋白

ERBB2重組恒河猴 HER2 / ErbB2 蛋白 Protein

IFNA5 Protein Mouse 重組小鼠 IFNA5 / IFNaG 蛋白

CA8重組人 Carbonic Anhydrase VIII / CA8 蛋白 Protein

兔腎小球係膜細胞大鼠接觸蛋白4(CN4)試劑盒  ，英文名 ： CN4 ELISA Kit

Mouse neuophil elastase (NE) ELISA Kit 小鼠中性粒細胞彈性蛋白酶(NE)試劑盒

RatplateletmembraneglycoproteinⅡbⅢa,GP-ⅡbⅢaELISAKit 大鼠血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa(GP-ⅡbⅢa/CD41+CD61)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforFishi-iodothyronine,T3ELISAKit魚類三甲狀腺原

細胞基質金屬蛋白酶(MMP-1)活性熒光定量試劑盒20次

RatovalbuminspecificIgE,OVAsIgEELISAKit大鼠卵清蛋白特異性IgE(OVAsIgE)試劑盒規格 ：96T/48T

視天氣狀況和運輸距離遠近,公司與客戶協商後選擇下述方式中的一種進行。

1)1mL凍存細胞懸液裝於1.8ml的凍存管中,置於裝滿幹冰的泡沫保溫盒中進行運輸;收到細胞後請盡快解凍複蘇細胞進行培養,如無法立刻進行複蘇操作,凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月 。

T-25培養瓶充滿培養基後進行常溫運輸;收到細胞後請鏡下觀察細胞生長狀態,如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,如懸浮的細胞較多,請將培養瓶至於培養箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁 。本公司的所有產品僅用於科學研究或者工業科研等非醫療目的 ，不可用於人類或動物的臨床診斷或治療 ，非藥用 ，非食用