細胞簡介 ：

兔腎上腺皮質分離自腎上腺組織 ；腎上腺是機體相當重要的內分泌器官 ，由於位於兩側腎髒的上方，故名腎上腺 。腎上腺左右各一 ，位於腎的上方 ，共同為腎筋膜和脂肪組織所包裹 。左腎上腺呈半月形 ，右腎上腺為三角形 。從側麵觀察 ，腺體分腎上腺皮質和腎上腺髓質兩部分 ，周圍部分是皮質 ，內部是髓質 。腎上腺內部是髓質部分 ，分泌腎上腺素和 。這些激素在應激狀態釋放增多 ，能夠幫助升高血壓 ，加快心率 ，升高血糖 ，動員全身的儲備物質 ，為機體與外界環境的抗爭作好充分準備 。腎上腺外部是皮質部分 ，分泌醛固酮 、和少量的雌雄激素 。醛固酮能夠促進小便中尿鉀的排出和尿鈉的重吸收 ，正常數量的醛固酮 ，對維持機體正常血壓有重要作用 。但是如果過多分泌 ，會導致高血壓和低血鉀 。是機體必需的激素之一 。當機體處於應激狀態時 ，比如感冒 ，發燒 ，遇到突發事件的時候 ，腎上腺皮質分泌大量的 ，這些能夠動員機體的存儲能源 ，為應對內部或者外部重要事件提供充分的物質準備 。當缺乏時 ，機體在遇到重大事件的時候 ，往往缺乏足夠應對能力 ，容易被病毒或外界壓力所擊倒 。腎上腺產生的雄激素 ，對雄性來講 ，並非 ，但是對雌性而言 ，是雄激素的一個重要來源 。

方法簡介 ：

實驗室分離的兔腎上腺皮質采用膠原酶消化法製備而來 ，細胞總量約為5×10⁵cells/瓶 。

質量檢測

實驗室分離的兔腎上腺皮質經3β-HSD免疫熒光鑒定 ，純度可達90%以上 ，且不含有HIV-1 、HBV 、HCV 、支原體 、細菌 、酵母和真菌等 。

培養信息 ：

包被條件 ：鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培養基 ：含FBS、生長添加劑、Penicillin 、Streptomycin等

換液頻率 ：每2-3天換液一次

生長特性 ：貼壁

細胞形態 ：梭形 、多角形

傳代特性 ：可傳1-3代左右 ；2代以內狀態佳

消化液 ：0.25%

培養條件 ：氣相 ：空氣 ，95% ；CO2 ，5%

兔腎上腺皮質體外培養周期有限 ；建議使用配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養 ，以此保證該細胞的佳培養狀態 。

實驗報告 ：

一 、分離與培養 ：

1 、無菌條件下 ，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織 ，然後用PBS將此組織塊清洗2次 ，將組織剪成1mm3左右大小 ；

2 、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶） ，混懸10s ，置37℃條件下消化10min ，之後用滴管吹打製成單細胞懸液 ，自然沉澱並收集上清 ，用含10% FBS培養基終止消化後4℃放置 ；

3 、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液 ，混懸10s ，置37℃消化10 min後 ，按上述方法收集上清並終止消化後4℃放置 ，重複此步驟2-3次 ，直至組織被消化 ；

4 、用200目不鏽鋼篩網過濾細胞消化液 ，1200r/min 離心10min ，棄去上清 ，沉澱細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養基混懸 ，接種於25cm2培養瓶 ，放置於37℃  ，5％CO2 培養箱中培養 ；

5 、差速貼壁1h後 ，吸出培養基 ，按實驗需要接種於6孔板中繼續培養 ；二 、免疫熒光鑒定 ：

1 、待心房肌細胞生長至80%融合時 ，棄去培養基 ，用溫育的PBS衝洗細胞2次 ，每次10min ，然後用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min ；

2 、PBS衝洗細胞2次 ，每次10min ，然後在4℃條件下 ，用0.1％Triton X-100透膜15min ；

3 、PBS衝洗細胞2次 ，每次10min ，然後在室溫條件下 ，用4% BSA封閉細胞30min ；

4 、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗 ，然後將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜 ；

5 、PBS衝洗細胞3次 ，每次10min ，按1 ：150的比例稀釋抗α-actin的二抗 ， 37℃條件下放置1h ；

6 、用PBS衝洗3次 ，每次10min ，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像並拍照 。

公司正在出售的產品 ：

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兔子結合蛋白4試劑盒   兔子結合蛋白4試劑盒   規格型號 ：96T/48T   兔子結合蛋白4試劑盒 ，規格型號 ：96T/48T ，來源 ：試劑盒（進口分裝） ，產品別名 ：兔子結合蛋白4試劑盒 、兔子結合蛋白4eisa試劑盒   保存條件 ：2-8℃   保質期 ：6個月 。

兔子透明質酸試劑盒   兔子透明質酸試劑盒   規格型號 ：96T/48T   兔子透明質酸試劑盒 ，規格型號 ：96T/48T ，來源 ：試劑盒（進口分裝） ，產品別名 ：兔子透明質酸試劑盒 、兔子透明質酸eisa試劑盒   保存條件 ：2-8℃   保質期 ：6個月 。

人血管緊張素原試劑盒   人血管緊張素原試劑盒   規格型號 ：96T/48T   人血管緊張素原試劑盒 ，規格型號 ：96T/48T ，來源 ：試劑盒（進口分裝） ，產品別名 ：人血管緊張素原試劑盒 、人血管緊張素原eisa試劑盒   保存條件 ：2-8℃   保質期 ：6個月 。

小鼠半胱酸蛋白酶抑製劑/胱抑素C(Cys-C)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat aldosterone (ALD) ELISA Kit 大鼠固酮(ALD)試劑盒

Humanexacellularsignal-regulatedkinase,ERKELISAKit 人細胞外信號調節激酶(ERK)試劑盒 96T/48T 進口分裝

HumanBrucellaAibodyIgG,BrucellaAbIgG試劑盒人菌抗體IgG(BrucellaAbIgG)試劑盒規格 ：96T/48T

植物組織葉綠體DNA萃取試劑盒10/20次

Humansolublevascularendothelialgrowthfactorreceptor-2,VEGFR-2/sFLK-1ELISAKit人可溶性血管內皮生長因子受體2(VEGFR-2/sFLK-1)試劑盒規格 ：96T/48T

IL10重組貓 IL10 / Interleukin-10 蛋白 Protein

NFKBp65(p65 NF-kappa B;p65NFKB 0.5mgNFKBp65(p65 NF-kappa B;p65NFKB) 細胞核因子或稱k基因結合核因子(多肽抗原)

TWF1重組人 TWF1 / PTK9 / Twinfilin-1 蛋白 Protein

GALE Protein Human 重組人 GALE / UDP galactose-4-epimerase 蛋白

S100A8 Protein Mouse 重組小鼠 S100A8 / CAGA 蛋白

NFKBp65(p65 NF-kappa B;p65NFKB 0.5mgNFKBp65(p65 NF-kappa B;p65NFKB) 細胞核因子或稱k基因結合核因子(多肽抗原)

GALE Protein Human 重組人 GALE / UDP galactose-4-epimerase 蛋白

IL10重組貓 IL10 / Interleukin-10 蛋白 Protein

S100A8 Protein Mouse 重組小鼠 S100A8 / CAGA 蛋白

TWF1重組人 TWF1 / PTK9 / Twinfilin-1 蛋白 Protein

兔腎上腺皮質細胞大鼠巨嗜細胞趨化蛋白1(MCP-1/CCL2)試劑盒  ，英文名 ： MCP-1/CCL2 ELISA Kit

Mouse ciliary neuroophic factor (CF) ELISA Kit 小鼠睫狀神經營養因子(CF)試劑盒

MousephosphoProteinKinaseC,P-PKCELISAKit 小鼠0酸化蛋白激酶C(P-PKC)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforHumanPancreaticPolypeptide,PPELISAKit人胰多肽

同位素標記放射活性離心柱試劑盒20次

ELISAKitpERK大鼠0酸化細胞外信號調節激酶

注意事項 ：

1. 收到細胞後首先觀察細胞瓶是否完好 ，培養液是否有漏液 、渾濁等現象 ，若有上述現象發生請及時和老哥俱樂部聯係 。

2. 仔細閱讀細胞說明書 ，了解細胞相關信息 ，如細胞形態 、所用培養基 、血清比例 、所需細胞因子等 ，確保細胞培養條件一致 ，若由於培養條件不一致而導致細胞出現問題 ，責任由客戶自行承擔 。

3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表麵 ，顯微鏡下觀察細胞狀態 。因運輸問題 ，部分細胞由於溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片 ，是正常現象 。觀察好細胞狀態後 ，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置於37℃培養箱放置4-6h 。

4. 貼壁細胞可以消化 ，懸浮細胞直接混勻收集細胞 ，900 rpm-1000 rpm離心3 min ，棄上清 。加5 mL PBS重懸細胞 ，再900 rpm-1000 rpm離心3 min ， ，用新鮮的*培養基重懸細胞，並接種到新的培養瓶或培養皿中 ，置於培養箱中進行培養 。

5. 請客戶用相同條件的培養基用於細胞培養 。

6. 建議客戶收到細胞後前3天各拍幾張細胞照片 ，記錄細胞狀態 ，便於和我司技術部溝通交流 。由於運輸的原因 ，個別敏感細胞會出現不穩定的情況 ，請及時和老哥俱樂部聯係 ，告知細胞的具體情況 ，以便老哥俱樂部的技術人員跟蹤回訪直至問題解決 。

7. 該細胞僅供科研使用 。

8. 備注 ：運輸用的培養基(灌液培養基)不能再用來培養細胞 ，請換用按照說明書細胞培養條件新配製的*培養基來培養細胞 。收到細胞後次傳代建議1 ：2傳代  。

9.注意 ： 1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿 。不是1個T25瓶傳2個10cm皿 。