產品名稱 :兔氣管平滑肌細胞
產品特點 :兔氣管平滑肌細胞公司正在出售的產品大鼠癌細胞;SHZ-88 肝癌細胞 ,BEL-7405細胞 MEF細胞 ,早代小鼠胚胎成纖維細胞 HO-8910PM(人高轉移癌細胞) MDA-MB-231, 人癌細胞 骨髓瘤,P3-X63-Ag8細胞 SW 1271 [SW-1271; SW1271](人肺腺癌細胞)
產品型號 :
更新日期 :2024-12-13
訪問次數 :22
兔氣管平滑肌細胞的詳細資料 :
實驗報告 :
一
、分離與培養
:
1 、無菌條件下 ,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織 ,然後用PBS將此組織塊清洗2次 ,將組織剪成1mm3左右大小 ;
2 、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶) ,混懸10s ,置37℃條件下消化10min,之後用滴管吹打製成單細胞懸液 ,自然沉澱並收集上清 ,用含10% FBS培養基終止消化後4℃放置 ;
3 、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液 ,混懸10s ,置37℃消化10 min後 ,按上述方法收集上清並終止消化後4℃放置 ,重複此步驟2-3次 ,直至組織被消化 ;
4 、用200目不鏽鋼篩網過濾細胞消化液 ,1200r/min 離心10min ,棄去上清 ,沉澱細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸 ,接種於25cm2培養瓶 ,放置於37℃ ,5%CO2 培養箱中培養 ;
5 、差速貼壁1h後 ,吸出培養基 ,按實驗需要接種於6孔板中繼續培養 ;二 、免疫熒光鑒定 :
1 、待心房肌細胞生長至80%融合時 ,棄去培養基 ,用溫育的PBS衝洗細胞2次 ,每次10min ,然後用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min ;
2 、PBS衝洗細胞2次 ,每次10min ,然後在4℃條件下 ,用0.1%Triton X-100透膜15min ;
3 、PBS衝洗細胞2次 ,每次10min ,然後在室溫條件下 ,用4% BSA封閉細胞30min ;
4 、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗 ,然後將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜 ;
5 、PBS衝洗細胞3次,每次10min ,按1 :150的比例稀釋抗α-actin的二抗 , 37℃條件下放置1h ;
6
、用PBS衝洗3次
,每次10min
,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像並拍照
。
細胞簡介 :
兔氣管平滑肌分離自氣管組織 ;氣管(Trachea) ,呼吸器官的一部分 ;為後壁略平的圓筒型管狀 。上端平第六頸椎下緣 ,與環狀軟骨相連 ;向下至第四 、五胸椎體(相當胸骨角平麵)交界處 ,分左 、右主支氣管 ,分叉處稱為氣管杈 。氣管主要由14-16個半環狀軟骨構成 ,有彈性 ,軟骨為“C"字形的軟骨環 ,缺口向後 ,各軟骨環以韌帶連接起來 ,環後方缺口處由平滑肌和致密結締組織連接 ,保持了持續張開狀態 。管腔襯以粘膜 ,表麵覆蓋纖毛上皮 ,粘膜分泌的粘液可粘附吸入空氣中的灰塵顆粒 ,纖毛不斷向咽部擺動將粘液與灰塵排出 ,以淨化吸入的氣體 。氣管平滑肌是氣管的重要結構組成之一 ,在機體的正常生理過程中發揮著重要作用 ;能夠保持氣道張力 ,維持氣道管狀形態 ,從而有利於氣體流通 ,保持肺部通氣 。氣管平滑肌細胞原代分離培養3天後 ,可見細胞貼壁伸展 ,細胞形態大小不一 ,呈梭形 、不規則形 、三角形或扇形 ,核卵圓形 、居中 ;2周後細胞匯合 ,多數細胞伸展呈長梭形 ,胞漿豐富 ,有分枝狀突起 ,細胞平行排列成單層或部分區域多層重疊生長,高低起伏 ;細胞密度低時 ,常交織成網狀 ;密度高時 ,則排列為旋渦狀或柵欄狀 。傳代後細胞生長較快 ,4-6天即可匯合 ,並保持上述形態學特征和生長特點 。氣管平滑肌細胞的異常是呼吸道疾病的重要病理特征之一 ,其增生 、肥大是氣道重塑的關鍵 。
產品名稱 | 兔氣管平滑肌細胞 | 組織來源 | 氣管 |
英文名稱 | Rabbit Tracheal Smooth Muscle Cells | 產品規格 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 |
方法簡介
:
公司實驗室分離的兔氣管平滑肌采用-膠原酶聯合消化法結合組織貼塊法製備而來 ,細胞總量約為5×10?cells/瓶 。
質量檢測
公司實驗室分離的兔氣管平滑肌經α-SMA免疫熒光鑒定 ,純度可達90%以上 ,且不含有HIV-1 、HBV 、HCV 、支原體 、細菌 、酵母和真菌等 。
培養信息
:
培養基 含FBS 、生長添加劑 、Penicillin 、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳5代左右 ;3代以內狀態佳
消化液 0.25%
培養條件 氣相 :空氣 ,95% ;CO2 ,5%
注意事項
:
1. 收到細胞後首先觀察細胞瓶是否完好
,培養液是否有漏液
、渾濁等現象
,若有上述現象發生請及時和老哥俱樂部聯係
。
2. 仔細閱讀細胞說明書 ,了解細胞相關信息 ,如細胞形態 、所用培養基 、血清比例 、所需細胞因子等 ,確保細胞培養條件一致 ,若由於培養條件不一致而導致細胞出現問題 ,責任由客戶自行承擔 。
3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表麵 ,顯微鏡下觀察細胞狀態 。因運輸問題 ,部分細胞由於溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片 ,是正常現象 。觀察好細胞狀態後 ,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置於37℃培養箱放置4-6h 。
4. 貼壁細胞可以消化 ,懸浮細胞直接混勻收集細胞 ,900 rpm-1000 rpm離心3 min ,棄上清 。加5 mL PBS重懸細胞 ,再900 rpm-1000 rpm離心3 min , ,用新鮮的*培養基重懸細胞 ,並接種到新的培養瓶或培養皿中 ,置於培養箱中進行培養 。
5. 請客戶用相同條件的培養基用於細胞培養 。
6. 建議客戶收到細胞後前3天各拍幾張細胞照片 ,記錄細胞狀態 ,便於和我司技術部溝通交流 。由於運輸的原因 ,個別敏感細胞會出現不穩定的情況 ,請及時和老哥俱樂部聯係 ,告知細胞的具體情況 ,以便老哥俱樂部的技術人員跟蹤回訪直至問題解決 。
7. 該細胞僅供科研使用 。
8. 備注 :運輸用的培養基(灌液培養基)不能再用來培養細胞 ,請換用按照說明書細胞培養條件新配製的*培養基來培養細胞 。收到細胞後次傳代建議1 :2傳代 。
9.注意 : 1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿 。不是1個T25瓶傳2個10cm皿 。
公司正在出售的產品
:
生長分化因子-3 英文名稱 : growth differeiation factor 3 規格 : 英文縮寫 : GDF-3
膠質纖維酸性蛋白 英文名稱 : glial fibrillary acidic protein 規格 : 英文縮寫 : GFAP
生長激素釋放多肽Ghrelin 英文名稱: peptide hormone Ghrelin 規格 : 英文縮寫 : Ghrelin
胰高血糖素 英文名稱 : Glucagon 規格 : 英文縮寫 : GC
豚鼠晚期糖基化終末產物(AGEs)ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat signal ansduction molecule 7 (Smad7) ELISA Kit 大鼠信號轉導分子7(Smad7)試劑盒
HumancytosolicphospholipaseA2,cPLA2ELISAKit 人胞漿型0脂酶A2(cPLA2)試劑盒 96T/48T 進口分裝
Humancrystalproteinsβ,Cryβ試劑盒人晶體蛋白β(Cryβ)試劑盒規格 :96T/48T
組織EBV(EPSTEIN-BARR)病毒定性試劑盒20次
HumanProstaglandinDSyhase,PGDSELISAKit人前列腺素D合成酶(PGDS)試劑盒規格 :96T/48T
HA重組甲型流感 H1N1 (A/New York/1/1918) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 Protein
PACAP(6-38 Peptide 0.5mgPACAP(6-38 Peptide) 腺苷酸環化酶激活肽6-38
LILRB3重組人 LILRB3 / LIR3 / ILT5 / CD85a 蛋白 Protein
IL12A & IL27B Protein Human 重組人 IL12A & IL27B Heterodimer 蛋白
ACE2 Protein Human 重組人 ACE2 / Angiotensin-Converting Enzyme 2 蛋白 (Fc 標簽)
PACAP(6-38 Peptide 0.5mgPACAP(6-38 Peptide) 腺苷酸環化酶激活肽6-38
IL12A & IL27B Protein Human 重組人 IL12A & IL27B Heterodimer 蛋白
HA重組甲型流感 H1N1 (A/New York/1/1918) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 Protein
ACE2 Protein Human 重組人 ACE2 / Angiotensin-Converting Enzyme 2 蛋白 (Fc 標簽)
LILRB3重組人 LILRB3 / LIR3 / ILT5 / CD85a 蛋白 Protein
兔氣管平滑肌細胞大鼠抗存活素抗體(Ai-Surv)試劑盒 ,英文名: Ai-Surv ELISA Kit
Monkey adrenomedullin (ADM) ELISA Kit腎上腺髓質素(ADM)試劑盒
RatCompleme4,C4ELISAKit 大鼠補體蛋白4(C4)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforFree-T3(HumanFreei-iodothyronineIndes)ELISAKit人遊離三甲狀腺原
細胞活化10(FACTORXa)活性熒光定量試劑盒20次
Ratpigmeepithelium-derivedfactor,PEDFELISAKit大鼠色素上皮衍生因子(PEDF)試劑盒規格 :96T/48T
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