① 組織塊培養法

組織塊培養是常用 、簡便易行和成功率較高的原代培養方法 。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種於培養瓶(或皿)中 ，瓶壁可預先塗以膠原薄層 ，以利於組織塊粘著於瓶壁 ，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長 。

② 消化培養法

③ 懸浮細胞培養法

對於懸浮生長的細胞 ，如白血病細胞 、淋巴細胞 、骨髓細胞 、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化 ，可采用低速離心分離 ，直接培養 ，或經淋巴細胞分層液分離後接種培養 。

④器官培養

器官培養是指從供體取得器官或組織塊後 ，不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養 ，器官培養可保持器官組織的相對完整性 ，可用於重點觀察細胞間的聯係 、排列情況和相互影響 ，以及局部環境的生物調節作用 。

產品名稱 ：兔破骨細胞

英文名稱 ：Rabbit Osteoclast Cells

組織來源 ：骨髓

產品規格 ：5×105cells/T25細胞培養瓶

兔破骨分離自骨組織和骨髓；破骨細胞是骨組織中的多核巨細胞 ，位於骨組織表麵的淺凹處 。目前一般認為破骨細胞是分離自骨骼外的造血係統 ，其前體可能屬於造血幹細胞的前單核細胞 。破骨細胞的主要功能是維持骨吸收和骨形成的相對平衡 ，若失去這種平衡則發生病理性變化 。因此多數學者從破骨細胞著手研究破骨細胞的結構 、功能探討骨吸收 ，形成相互平衡的機製。但破骨細胞是一種終末分化細胞 ，屬於不增殖細胞群 ，不能增殖和傳代 ，隻能進行原代培養且存活時間較短 。

實驗室分離的兔破骨采用機械分離法/密度梯度離心法和骨髓單核細胞誘導法製備而來 ，細胞總量約為5×10⁵cells/瓶 。

質量檢測

實驗室分離的兔破骨經TRAP染色檢測 ，純度可達30%以上 ，且不含有HIV-1 、HBV 、HCV 、支原體 、細菌 、酵母和真菌等 。

培養基 ：含FBS 、生長添加劑 、Penicillin 、Streptomycin等

換液頻率 ：每2-3天換液一次

生長特性 ：貼壁

細胞形態 ：多核 、巨細胞

傳代特性 ：屬於終末分化細胞 ；屬於不增殖細胞群

消化液 ：0.25%

培養條件 ：氣相 ：空氣 ，95%；CO2 ，5%

兔破骨體外培養周期有限 ；建議使用配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養 ，以此保證該細胞的佳培養狀態 。

取材→分離→培養和維持

1 、取材

人和動物細胞的取材是原代細胞培養成功的首要條件 ，直接影響細胞的體外培養 。

(1) 取材的基本要求

① 取材要注意新鮮和保鮮

② 應嚴格無菌

③ 防止機械損傷

④ 去除無用組織和避免幹燥

⑤ 應注意組織類型 、分化程度 、年齡等

⑥ 作好記錄

2 、分離

人或動物體內(或胚胎組織)由於多種細胞結合緊密 ，不利於各個細胞在體外培養中生長繁殖 ，必須將現有的組織塊充分散開 ，使細胞解離出來 。

(1)懸浮細胞的分離方法

組織材料若來自血液 、羊水 、胸水或腹水的懸液材料 ，的方法是采用1000r/min的低速離心10分鍾 。經離心後由於各種細胞的比重不同可在分層液中形成不同層 ，這樣可根據需要收獲目的細胞 。

(2)實體組織材料的分離方法

對於實體組織材料 ，由於細胞間結合緊密 ，為了使組織中的細胞充分分散 ，形成細胞懸液 ，可采用機械分散法(物理裂解)和消化分離法 。

① 機械分散法

特點:簡便 、快速,但對組織機械損傷大 ，而且細胞分散效果差,適用於處理纖維成分少的軟組織 。

② 消化分離法

組織消化法是把組織剪切成較小團塊(或糊狀) ，應用酶的生化作用和非酶的化學作用進一步使細胞間的橋連結構鬆動 ，使團塊膨鬆 ，由塊狀變成絮狀 ，此時再采用機械法 ，用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠瓶中振蕩 ，使細胞團塊得以較充分的分散 ，製成少量細胞群團和大量單個細胞的細胞懸液 ，接種培養後 ，細胞容易貼壁生長 。

小鼠孤兒受體配體   英文名稱 ：   Mouse Aemin   規格 ：      英文縮寫：   A

小鼠α葡萄糖苷酶   英文名稱 ：   Mouse α Glucosidase   規格 ：      英文縮寫 ：   AG

小鼠雄激素   英文名稱 ：   Mouse Androgen   規格 ：      英文縮寫 ：   ADG

酰基氧化酶   英文名稱 ：   Mouse Acyl-CoA oxidase   規格 ：      英文縮寫 ：   ACO

小鼠抗甲狀腺過氧化物酶抗體(TPO-Ab)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human heat shock protein 90 (HSP-90) ELISA Kit 人熱休克蛋白90(HSP-90)試劑盒

HumanCaveolin-1,Cav-1ELISAKIT 人窖蛋白Caveolin1(Cav-1)試劑盒 96T/48T 進口分裝

humanangiotensinⅡreceptoypeⅠa,AgⅠa試劑盒人血管緊張素Ⅱ受體Ⅰa型(AgⅠa)試劑盒規格 ：96T/48T

植物高內質網分離試劑盒10次

Humanβ-subunitsofhemoglobin,HB-βELISAKit人血紅蛋白β亞基(HB-β)試劑盒規格 ：96T/48T

EPHA4重組大鼠 EphA4 蛋白 Protein

GLUT12 葡萄糖轉運蛋白12 0.5mgGLUT12 葡萄糖轉運蛋白12

STXBP3重組人 STXBP3 / UNC-18C 蛋白 (His & GST 標簽) Protein

DYDC2 Protein Human 重組人 DYDC2 / DPY30 domain containing 2 蛋白 (GST 標簽)

SRC Protein Mouse 重組小鼠 SRC Kinase / Proto-oncogene c-Src 蛋白 (His & GST 標簽)

GLUT12 葡萄糖轉運蛋白12 0.5mgGLUT12 葡萄糖轉運蛋白12

DYDC2 Protein Human 重組人 DYDC2 / DPY30 domain containing 2 蛋白 (GST 標簽)

EPHA4重組大鼠 EphA4 蛋白 Protein

SRC Protein Mouse 重組小鼠 SRC Kinase / Proto-oncogene c-Src 蛋白 (His & GST 標簽)

STXBP3重組人 STXBP3 / UNC-18C 蛋白 (His & GST 標簽) Protein

兔破骨細胞大鼠抗胰島細胞抗體(ICA)試劑盒  ，英文名 ： ICA ELISA Kit

Mouse mucin / mucin 5AC (MUC5AC) ELISA Kit 小鼠粘蛋白/粘液素5AC(MUC5AC)試劑盒

RatiactParathormone,i-PTHELISAKit 大鼠全段甲狀旁腺素(i-PTH)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforFS(MouseFollistatin)ELISAKit小鼠卵泡抑素

細胞環氧化酶(CYCLOOXYGENASE-2)活性熒光定量試劑盒20次

Ratplasminogenactivatorinhibitor,PAIELISAKit大鼠纖溶酶原激活物抑製因子(PAI)試劑盒規格 ：96T/48T

視天氣狀況和運輸距離遠近,公司與客戶協商後選擇下述方式中的一種進行。

1)1mL凍存細胞懸液裝於1.8ml的凍存管中,置於裝滿幹冰的泡沫保溫盒中進行運輸;收到細胞後請盡快解凍複蘇細胞進行培養,如無法立刻進行複蘇操作,凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月 。

T-25培養瓶充滿培養基後進行常溫運輸;收到細胞後請鏡下觀察細胞生長狀態,如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,如懸浮的細胞較多,請將培養瓶至於培養箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁 。本公司的所有產品僅用於科學研究或者工業科研等非醫療目的 ，不可用於人類或動物的臨床診斷或治療 ，非藥用 ，非食用