細胞簡介 ：

兔皮脂腺分離自皮脂腺組織 ；皮脂腺是由腺泡與短的導管構成的全漿分泌腺 ，皮脂腺導管開口於毛囊 。除手外的其餘部位皮膚中均有皮脂腺 ，前額 、鼻 、背上部的皮脂腺多 ，稱為皮脂溢出部位 。其餘的部位比較少 ，掌 、足趾及足背沒有皮脂腺 。皮脂腺大多位於毛囊及立毛肌之間 ，由一個或幾個囊狀的腺泡與一個共同的短導管構成 。分泌部呈囊泡狀 ，由多層腺細胞構成 。腺泡周邊緊貼基膜的細胞較小 ，呈扁平或立方形 ，稱為基細胞 。新生的腺細胞不斷向中心移動 ，體積增加 ，胞質內的小脂滴越來越多 ，腺泡中心的細胞更大 ，細胞核固縮 、細胞器消失 ，胞質內充滿脂滴 。後腺細胞解體並與脂滴同時排出 ，即為皮脂 。皮脂腺的分泌因人種 、年齡 、性別及氣候等因素而不同 。10歲以前分泌力弱 ，16～35歲分泌旺盛 ，老年期減弱 ；夏天分泌旺盛 ，秋冬季分泌較少 ；過食油膩 、辛辣刺激的食物以及按摩也可增加分泌 。皮脂腺分泌旺盛 ，可導致皮膚油膩 、皮膚粗糙 、毛孔粗大 ，容易發生粉刺及脂溢性皮炎 。皮脂腺 ，分泌皮脂過少 ，可導致皮膚幹燥 、脫屑、皮膚老化等 ，所以控製皮脂腺的分泌很關鍵 。皮脂腺的活動也與多種皮膚疾病相關 ，例如: 皮脂腺數量或其活動的減少可能會導致皮膚幹燥綜合征 ，特應性皮炎是皮膚屏障功能障礙的炎症性疾病 ，研究發現其發病與皮脂腺功能減弱有關  ，毛周角化病的皮損中則沒有皮脂腺 。而皮脂分泌過多和尋常痤瘡相關 。同時現有研究分析結構化數據特征 ， 嚐試探索皮脂腺與皮脂腺腫瘤發生的聯係 。

方法簡介 ：

實驗室分離的兔皮脂腺采用聯合機械分離製備而來 ，細胞總量約為5×10⁵cells/瓶 。

質量檢測

實驗室分離的兔皮脂腺經CK4免疫熒光鑒定 ，純度可達90%以上 ，且不含有HIV-1 、HBV 、HCV 、支原體 、細菌 、酵母和真菌等 。

培養信息 ：

包被條件 ：鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培養基 ：基礎培養基 ，含FBS 、EGF 、Hydrocortisone 、腎上腺素 、甲狀腺素 、Insulin 、Transferrin 、Selenium Solution 、Penicillin 、Streptomycin等

換液頻率 ：每2-3天換液一次

生長特性：貼壁

細胞形態 ：上皮細胞樣

傳代特性 ：可傳2-3代

消化液 ：0.25%

培養條件 ：氣相 ：空氣 ，95% ；CO2，5%

兔皮脂腺體外培養周期有限 ；建議使用配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養 ，以此保證該細胞的佳培養狀態 。

實驗報告 ：

一 、分離與培養 ：

1 、無菌條件下 ，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織 ，然後用PBS將此組織塊清洗2次 ，將組織剪成1mm3左右大小 ；

2 、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶） ，混懸10s ，置37℃條件下消化10min ，之後用滴管吹打製成單細胞懸液 ，自然沉澱並收集上清 ，用含10% FBS培養基終止消化後4℃放置 ；

3 、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液 ，混懸10s ，置37℃消化10 min後 ，按上述方法收集上清並終止消化後4℃放置 ，重複此步驟2-3次 ，直至組織被消化 ；

4 、用200目不鏽鋼篩網過濾細胞消化液 ，1200r/min 離心10min ，棄去上清 ，沉澱細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養基混懸 ，接種於25cm2培養瓶 ，放置於37℃  ，5％CO2 培養箱中培養 ；

5 、差速貼壁1h後 ，吸出培養基 ，按實驗需要接種於6孔板中繼續培養 ；二 、免疫熒光鑒定 ：

1 、待心房肌細胞生長至80%融合時 ，棄去培養基 ，用溫育的PBS衝洗細胞2次 ，每次10min ，然後用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min ；

2 、PBS衝洗細胞2次 ，每次10min ，然後在4℃條件下 ，用0.1％Triton X-100透膜15min ；

3 、PBS衝洗細胞2次 ，每次10min ，然後在室溫條件下 ，用4% BSA封閉細胞30min ；

4 、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗 ，然後將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜 ；

5 、PBS衝洗細胞3次 ，每次10min ，按1 ：150的比例稀釋抗α-actin的二抗 ， 37℃條件下放置1h ；

6 、用PBS衝洗3次 ，每次10min ，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像並拍照 。

公司正在出售的產品 ：

小鼠β澱粉樣蛋白1-42(Aβ1-42)ELISA 試劑盒

Human vitamin D (VD) ELISA Kit 人(VD)檢測試劑盒

Humanai-spermaibody,AsAbELISAKit 人抗抗體(AsAb)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

HumanChlamydiaachomatis,CT檢測試劑盒人沙眼衣原體(CT)檢測試劑盒規格 ：96T/48T

轉基因玉米T25品係試劑盒20次

Humansecretoryleukocyteproteaseinhibitor,SLPIELISAKit人分泌性白細胞蛋白酶抑製因子(SLPI)檢測試劑盒規格 ：96T/48T

WIF1重組小鼠 WIF1 / WIF-1 蛋白 Protein

催乳素(PRL)重組蛋白 Recombinant Prolactin (PRL)

BTK重組人 Bruton Tyrosine Kinase / BTK Kinase 蛋白 Protein

IL2 Protein Human 重組人 Interleukin-2 / IL-2 蛋白

NT5E Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 CD73 / NT5E 蛋白

ACTH (Adrenorticotrophin hormons 0.5mgACTH (Adrenorticotrophin hormons)(18-39) 促腎上腺皮質激素(18-39)(抗原)

IL2 Protein Human 重組人 Interleukin-2 / IL-2 蛋白

BID重組小鼠 BID 蛋白 (His & GST 標簽) Protein

IL2RG Protein Rat 重組大鼠 IL2RG / CD132 蛋白

CABP5重組人 CABP3 / CABP5 蛋白 Protein

豚鼠黃體激素(LH)檢測試劑盒  ，英文名 ： LH ELISA Kit

Human apoptosis inducing factor (AIF) ELISA Kit 人凋亡誘導因子(AIF)檢測試劑盒

MonkeyIerleukin6,IL-6ELISAKit 猴白介素6(IL-6)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforbFGF-6ELISAKit大鼠堿性成纖維細胞生長因子6

細菌乳糖酵解酚紅瓊脂平板50個

RabbitIerleukin2,IL-2ELISAKit兔子白介素2(IL-2)檢測試劑盒規格 ：96T/48T

兔皮脂腺細胞人組酸豐富糖蛋白(HRG)酶聯免疫吸附測定試劑盒   Human HRG (Histidine Rich Glycoprotein) ELISA Kit

人乙酰肝素蛋白多糖(HSPG)酶聯免疫吸附測定試劑盒   Human HSPG (Heparan Sulfate Proteoglycan) ELISA Kit

人膜聯蛋白A5(ANXA5)酶聯免疫吸附測定試劑盒   Human ANXA5 (Annexin A5) ELISA Kit

人HA絲酸肽酶1(HA1)酶聯免疫吸附測定試劑盒   Human HA1 (HA Serine Peptidase 1) ELISA Kit

注意事項 ：

1. 收到細胞後首先觀察細胞瓶是否完好 ，培養液是否有漏液 、渾濁等現象 ，若有上述現象發生請及時和老哥俱樂部聯係 。

2. 仔細閱讀細胞說明書 ，了解細胞相關信息 ，如細胞形態 、所用培養基 、血清比例 、所需細胞因子等 ，確保細胞培養條件一致 ，若由於培養條件不一致而導致細胞出現問題 ，責任由客戶自行承擔 。

3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表麵 ，顯微鏡下觀察細胞狀態 。因運輸問題 ，部分細胞由於溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片 ，是正常現象 。觀察好細胞狀態後 ，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置於37℃培養箱放置4-6h 。

4. 貼壁細胞可以消化 ，懸浮細胞直接混勻收集細胞 ，900 rpm-1000 rpm離心3 min ，棄上清 。加5 mL PBS重懸細胞 ，再900 rpm-1000 rpm離心3 min ， ，用新鮮的*培養基重懸細胞 ，並接種到新的培養瓶或培養皿中 ，置於培養箱中進行培養 。

5. 請客戶用相同條件的培養基用於細胞培養 。

6. 建議客戶收到細胞後前3天各拍幾張細胞照片 ，記錄細胞狀態 ，便於和我司技術部溝通交流 。由於運輸的原因 ，個別敏感細胞會出現不穩定的情況 ，請及時和老哥俱樂部聯係 ，告知細胞的具體情況 ，以便老哥俱樂部的技術人員跟蹤回訪直至問題解決 。

7. 該細胞僅供科研使用 。

8. 備注 ：運輸用的培養基(灌液培養基)不能再用來培養細胞 ，請換用按照說明書細胞培養條件新配製的*培養基來培養細胞 。收到細胞後次傳代建議1 ：2傳代  。

9.注意 ： 1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿 。不是1個T25瓶傳2個10cm皿 。