產品名稱 :兔肺大靜脈平滑肌細胞
產品特點 :兔肺大靜脈平滑肌細胞公司正在出售的產品S-180(小鼠肉瘤細胞) 中國倉鼠卵巢細胞(亞係克隆);CHO-HCV-NS2 細胞 ,HeLa 229細胞 EAC-E2G8細胞 ,鼠腹水瘤 人肺動脈內皮細胞RNAHPASMC miRNA5 μg A9細胞 ,小鼠皮下結締組織細胞 HCC1428(人癌細胞)
產品型號 :
更新日期 :2024-12-12
訪問次數 :29
兔肺大靜脈平滑肌細胞的詳細資料 :
實驗報告 :
一
、分離與培養
:
1 、無菌條件下 ,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織 ,然後用PBS將此組織塊清洗2次 ,將組織剪成1mm3左右大小 ;
2 、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶) ,混懸10s ,置37℃條件下消化10min ,之後用滴管吹打製成單細胞懸液 ,自然沉澱並收集上清 ,用含10% FBS培養基終止消化後4℃放置 ;
3 、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液 ,混懸10s ,置37℃消化10 min後 ,按上述方法收集上清並終止消化後4℃放置 ,重複此步驟2-3次 ,直至組織被消化 ;
4 、用200目不鏽鋼篩網過濾細胞消化液 ,1200r/min 離心10min ,棄去上清 ,沉澱細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸 ,接種於25cm2培養瓶 ,放置於37℃ ,5%CO2 培養箱中培養 ;
5 、差速貼壁1h後 ,吸出培養基 ,按實驗需要接種於6孔板中繼續培養 ;二 、免疫熒光鑒定:
1 、待心房肌細胞生長至80%融合時 ,棄去培養基 ,用溫育的PBS衝洗細胞2次 ,每次10min ,然後用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min ;
2 、PBS衝洗細胞2次 ,每次10min ,然後在4℃條件下 ,用0.1%Triton X-100透膜15min ;
3 、PBS衝洗細胞2次 ,每次10min ,然後在室溫條件下 ,用4% BSA封閉細胞30min ;
4 、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗 ,然後將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜 ;
5 、PBS衝洗細胞3次 ,每次10min ,按1 :150的比例稀釋抗α-actin的二抗 , 37℃條件下放置1h ;
6
、用PBS衝洗3次
,每次10min
,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像並拍照
。
細胞簡介 :
兔肺大靜脈平滑肌分離自肺大靜脈組織 ;肺大靜脈在用肺呼吸的脊椎動物中 ,把動脈血由肺送回心髒的靜脈 ,是一個靜脈裏流動脈血的血管 。左右1對 ,共4條 ,兩條連接右肺 ,兩條連接左肺 。肺靜脈異位引流是指肺靜脈未能直接與左心房連接 ,而與右心房或體靜脈係統連接的先天性心血管異位 。肺靜脈淤血性肺動脈高壓 ,是由於肺靜脈內血液淤滯而引起的肺動脈高壓 。正常情況下 ,肺循環具有血壓低 、阻力小和順應性大的特點 ,肺動脈壓力高低取決於單位時間內肺動脈血流量和肺血管的阻力 ,要維持肺循環的低壓 、低阻的狀態 ,必須保證整個肺循環係統的暢通無阻 ,血液順利地由肺動脈經毛細血管進入肺靜脈 ,再入左心室 ,經過左心室收縮進入體循環 ,才能避免肺動脈內壓力升高 。肺大靜脈平滑肌細胞原代分離培養3天後 ,可見細胞貼壁伸展 ,細胞形態大小不一 ,呈梭形 、不規則形 、三角形或扇形 ,核卵圓形 、居中 ;2周後細胞匯合 ,多數細胞伸展呈長梭形 ,胞漿豐富 ,有分枝狀突起 ,細胞平行排列成單層或部分區域多層重疊生長 ,高低起伏 ;細胞密度低時 ,常交織成網狀 ;密度高時 ,則排列為旋渦狀或柵欄狀 。傳代後細胞生長較快 ,4-6天即可匯合 ,並保持上述形態學特征和生長特點 。該細胞參與血管壁炎症反應 ,保持靜脈管腔的通暢 ,還是多數動脈疾病的靶細胞 。
產品名稱 | 兔肺大靜脈平滑肌細胞 | 組織來源 | 肺靜脈 |
英文名稱 | Rabbit Pulmonary Great Vein Smooth Muscle Cells | 產品規格 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 |
方法簡介
:
實驗室分離的兔肺大靜脈平滑肌采用-膠原酶聯合消化法結合差速貼壁法製備而來 ,細胞總量約為5×10⁵cells/瓶 。
質量檢測
實驗室分離的兔肺大靜脈平滑肌經α-SMA免疫熒光鑒定 ,純度可達90%以上 ,且不含有HIV-1 、HBV 、HCV 、支原體 、細菌 、酵母和真菌等 。
培養信息
:
培養基 :含FBS、生長添加劑 、Penicillin 、Streptomycin等
換液頻率 :每2-3天換液一次
生長特性 :貼壁
細胞形態 :成纖維細胞樣
傳代特性 :可傳5代左右 ;3代以內狀態佳
消化液 :0.25%
培養條件 :氣相 :空氣 ,95% ;CO2 ,5%
兔肺大靜脈平滑肌體外培養周期有限 ;建議使用配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養 ,以此保證該細胞的佳培養狀態 。
注意事項
:
1. 收到細胞後首先觀察細胞瓶是否完好
,培養液是否有漏液
、渾濁等現象
,若有上述現象發生請及時和老哥俱樂部聯係
。
2. 仔細閱讀細胞說明書 ,了解細胞相關信息 ,如細胞形態 、所用培養基 、血清比例 、所需細胞因子等 ,確保細胞培養條件一致 ,若由於培養條件不一致而導致細胞出現問題 ,責任由客戶自行承擔 。
3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表麵 ,顯微鏡下觀察細胞狀態 。因運輸問題 ,部分細胞由於溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片 ,是正常現象 。觀察好細胞狀態後 ,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置於37℃培養箱放置4-6h 。
4. 貼壁細胞可以消化 ,懸浮細胞直接混勻收集細胞 ,900 rpm-1000 rpm離心3 min ,棄上清 。加5 mL PBS重懸細胞 ,再900 rpm-1000 rpm離心3 min , ,用新鮮的*培養基重懸細胞 ,並接種到新的培養瓶或培養皿中 ,置於培養箱中進行培養 。
5. 請客戶用相同條件的培養基用於細胞培養 。
6. 建議客戶收到細胞後前3天各拍幾張細胞照片 ,記錄細胞狀態 ,便於和我司技術部溝通交流 。由於運輸的原因 ,個別敏感細胞會出現不穩定的情況 ,請及時和老哥俱樂部聯係 ,告知細胞的具體情況 ,以便老哥俱樂部的技術人員跟蹤回訪直至問題解決 。
7. 該細胞僅供科研使用 。
8. 備注 :運輸用的培養基(灌液培養基)不能再用來培養細胞 ,請換用按照說明書細胞培養條件新配製的*培養基來培養細胞 。收到細胞後次傳代建議1:2傳代 。
9.注意 : 1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿 。不是1個T25瓶傳2個10cm皿 。
公司正在出售的產品:
大鼠胰島素樣蛋白3(INSL3)檢測試劑盒 ,英文名 : INSL3 ELISA Kit
Mouse urokinase type plasminogen activator (uPA) ELISA Kit 小鼠型纖溶酶原激活物(uPA)檢測試劑盒
Mouseansforminggrowthfactorα,TGF-αELISAKit 小鼠轉化生長因子α(TGF-α)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforHumanCoisolELISAKit人
細胞BMK激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次
ELISAKitBMP-7大鼠骨成型蛋白7
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70kDa熱休克蛋白1樣蛋白(HSPA1L)重組蛋白 Recombinant Heat Shock 70kDa Protein 1 Like Protein (HSPA1L)
MKI67重組人 MKI67 蛋白 (GST 標簽) Protein
CLIC4 Protein Human 重組人 CLIC4 蛋白
ACE2 Protein Rat 重組大鼠 ACE2 / Angiotensin-Converting Enzyme 2 蛋白
防禦素β113(DEFβ113)重組蛋白 Recombinant Defensin Beta 113 (DEFb113)
CLIC4 Protein Human 重組人 CLIC4 蛋白
SEMA5A重組小鼠 Semaphorin 5A / SEMA5A 蛋白 Protein
FCGRT & B2M Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 FCGRT & B2M Heterodimer 蛋白
TSPAN8重組人 TSPAN8 / Tetraspanin 8 / TM4SF3 蛋白 (Fc 標簽) Protein
小鼠鼠痘病毒(MPV)檢測試劑盒 96T/48T
Human gliadin IgA (Gliadin-IgA) ELISA Kit 人麥角蛋白IgA(Gliadin-IgA)檢測試劑盒
HumangelsonELISAKit 人凝膠原蛋白(gelson)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝
Duckviruseeritis,DEV檢測試劑盒鴨病毒性腸病毒(DEV)檢測試劑盒規格 :96T/48T
增強型DAB顯色溶液A液 :10毫升B液 :90毫升C液 :1毫升
MousecyclophilinA,CyPAELISAKit小鼠嗜環蛋白/親環素A(CyPA)檢測試劑盒規格 :96T/48T
兔肺大靜脈平滑肌細胞小鼠神經降壓肽()檢測試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠神經B(NKB)檢測試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠神經A(NKA)檢測試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠上皮中性粒細胞活化肽78(ENA-78/CXCL5)檢測試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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