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① 组织块培养法

组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法
。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中，瓶壁可预先涂以胶原薄层，以利于组织块粘着于瓶壁
，使周边细胞能沿瓶壁向外生长
。

② 消化培养法

③ 悬浮细胞培养法

对于悬浮生长的细胞，如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞
、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化

，可采用低速离心分离，直接培养，或经淋巴细胞分层液分离后接种培养
。

④器官培养

器官培养是指从供体取得器官或组织块后，不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养，器官培养可保持器官组织的相对完整性
，可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响
，以及局部环境的生物调节作用。

产品名称：人脂肪间充质干细胞

英文名称：Human Adipose-derived Mesenchymal Stem Cells

组织来源：脂肪组织

产品规格：5×105cells/T25细胞培养瓶

人脂肪间充质干分离自脂肪组织；脂肪组织主要由大量群集的脂肪细胞构成，聚集成团的脂肪细胞由薄层疏松结缔组织分隔成小叶；贮存的脂肪，在需要时可迅速分解成甘油和脂肪酸
，经血液输送到各组织以供利用。它们影响胰岛素敏感性、血压水平、内皮功能
、纤溶活动及炎症反应，参与多种重要病理生理过程；脂肪组织已由过去单纯作为能量储存的器官而成为一个极其重要的内分泌系统。脂肪组织中也存在一些干细胞群，具有自我更新能力和多向分化潜能，被称为脂肪组织来源的间充质干细胞，简称脂肪间充质干细胞。与骨髓间充质干细胞相比，在来源
、细胞群特点以及分化潜能等多方面极为相似
。但是，脂肪间充质干细胞更易获得足够数量的细胞
，且获取过程中对机体损伤更小，是更为理想的自体干细胞源
。脂肪组织分离得到脂肪间充质干细胞以梭形为主要形态

，BrdU可标记其细胞核。

公司实验室分离的人脂肪间充质干采用胶原酶消化法制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶
。

质量检测

公司实验室分离的人脂肪间充质干经CD29、CD90免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV
、支原体、细菌、酵母和真菌等。

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin
、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 成纤维细胞样

传代特性 可传5代左右；3代以内状态佳

消化液 0.25%

培养条件 气相
：空气，95%；CO2，5%

取材→分离→培养和维持

1、取材

人和动物细胞的取材是原代细胞培养成功的首要条件，直接影响细胞的体外培养
。

(1) 取材的基本要求

① 取材要注意新鲜和保鲜

② 应严格无菌

③ 防止机械损伤

④ 去除无用组织和避免干燥

⑤ 应注意组织类型、分化程度、年龄等

⑥ 作好记录

2
、分离

人或动物体内(或胚胎组织)由于多种细胞结合紧密，不利于各个细胞在体外培养中生长繁殖，必须将现有的组织块充分散开，使细胞解离出来
。

(1)悬浮细胞的分离方法

组织材料若来自血液、羊水、胸水或腹水的悬液材料，的方法是采用1000r/min的低速离心10分钟
。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层，这样可根据需要收获目的细胞
。

(2)实体组织材料的分离方法

对于实体组织材料
，由于细胞间结合紧密，为了使组织中的细胞充分分散，形成细胞悬液
，可采用机械分散法(物理裂解)和消化分离法
。

① 机械分散法

特点:简便、快速,但对组织机械损伤大
，而且细胞分散效果差,适用于处理纤维成分少的软组织。

② 消化分离法

组织消化法是把组织剪切成较小团块(或糊状)

，应用酶的生化作用和非酶的化学作用进一步使细胞间的桥连结构松动
，使团块膨松，由块状变成絮状
，此时再采用机械法
，用吸管吹打分散或电磁搅拌或在摇珠瓶中振荡

，使细胞团块得以较充分的分散
，制成少量细胞群团和大量单个细胞的细胞悬液，接种培养后

，细胞容易贴壁生长
。

人粘蛋白3(MUC3)ELISA 试剂盒

Human tumor necrosis factor soluble receptor I (TNFsR- I) ELISA Kit 人肿瘤坏死因子可溶性受体Ⅰ(TNFsR-Ⅰ)检测试剂盒

HumanHistoneDeacetylase,HDELISAKit 人组织蛋白去乙酰化酶(HD)检测试剂盒 96T/48T 进口分装

Humanimmunosuppressiveacidicprotein,IAP检测试剂盒人免疫抑制酸性蛋白(IAP)检测试剂盒规格：96T/48T

组织基质金属蛋白酶(MMP-2)活性比色法定量检测试剂盒20次

Humanleukemiainhibitoryfactorreceptor，LIFRELISAKit人白血病抑制因子受体(LIFR)检测试剂盒规格

：96T/48T

TNFRSF10B重组小鼠 TRAIL R2 / CD262 / TNFRSF10B 蛋白 (His & Fc 标签) Protein

BrdU (Bromodeoxyuridine 50mgBrdU (Bromodeoxyuridine) 溴脱氧尿苷

ERBB2重组人 HER2 / ErbB2 / CD340 (676-1255) 蛋白 (His & GST 标签) Protein

ILKAP Protein Human 重组人 ILKAP 蛋白

EPHA7 Protein Rat 重组大鼠 EphA7 / EHK3 蛋白

BrdU (Bromodeoxyuridine 50mgBrdU (Bromodeoxyuridine) 溴脱氧尿苷

ILKAP Protein Human 重组人 ILKAP 蛋白

TNFRSF10B重组小鼠 TRAIL R2 / CD262 / TNFRSF10B 蛋白 (His & Fc 标签) Protein

EPHA7 Protein Rat 重组大鼠 EphA7 / EHK3 蛋白

ERBB2重组人 HER2 / ErbB2 / CD340 (676-1255) 蛋白 (His & GST 标签) Protein

豚鼠白三烯B4(LTB4)检测试剂盒 ，英文名
： LTB4 ELISA Kit

Two lymphoid tissue chemokine (SLC/CCL21) ELISA Kit 人二级淋巴组织趋化因子(SLC/CCL21)检测试剂盒

rabbitSolubleprotein-100,S-100ELISAKit 兔子S100蛋白(S-100)检测试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitforBeta-EPR(MouseBeta-Endorphieceptor)ELISAKit小鼠β内啡肽受体

细菌盐肉汤500毫升

RabbitHeatShockProtein40,HSP-40ELISAKit兔热休克蛋白40(HSP-40)检测试剂盒规格：96T/48T

人脂肪间充质干细胞人脂蛋脂酶A2(Lp-PL-A2)检测试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

人脂蛋白α(Lp-α)检测试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

人脂蛋白a（Lp-a）检测试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

人脂阿拉伯甘露聚糖(LAM)检测试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

视天气状况和运输距离远近,公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。

1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中,置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输;收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养,如无法立刻进行复苏操作,冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月
。

T-25培养瓶充满培养基后进行常温运输;收到细胞后请镜下观察细胞生长状态,如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作,如悬浮的细胞较多,请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁
。本公司的所有产品仅用于科学研究或者工业科研等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或治疗
，非药用
，非食用