產品名稱:人腦膜細胞
產品特點 :人腦膜細胞公司正在出售的產品LAN-6細胞 ,神經母細胞瘤細胞 人絨癌細胞,JEG-3細胞 人毛細胞RNAHHDPC miRNA5 μg P19(小鼠畸胎瘤細胞) 野豬 (Pig) Legumain / LGMN / AEP 人細胞裂解液 LncaP, 人前列腺癌細胞 腹水瘤
產品型號 :
更新日期 :2024-12-12
訪問次數 :23
人腦膜細胞的詳細資料 :
實驗報告 :
一
、分離與培養
:
1 、無菌條件下 ,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織 ,然後用PBS將此組織塊清洗2次 ,將組織剪成1mm3左右大小 ;
2 、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶) ,混懸10s ,置37℃條件下消化10min ,之後用滴管吹打製成單細胞懸液 ,自然沉澱並收集上清 ,用含10% FBS培養基終止消化後4℃放置 ;
3 、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液 ,混懸10s ,置37℃消化10 min後 ,按上述方法收集上清並終止消化後4℃放置 ,重複此步驟2-3次 ,直至組織被消化 ;
4 、用200目不鏽鋼篩網過濾細胞消化液 ,1200r/min 離心10min ,棄去上清 ,沉澱細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸 ,接種於25cm2培養瓶 ,放置於37℃ ,5%CO2 培養箱中培養 ;
5 、差速貼壁1h後 ,吸出培養基 ,按實驗需要接種於6孔板中繼續培養 ;二 、免疫熒光鑒定 :
1 、待心房肌細胞生長至80%融合時 ,棄去培養基 ,用溫育的PBS衝洗細胞2次 ,每次10min ,然後用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min ;
2 、PBS衝洗細胞2次 ,每次10min ,然後在4℃條件下 ,用0.1%Triton X-100透膜15min ;
3 、PBS衝洗細胞2次,每次10min ,然後在室溫條件下 ,用4% BSA封閉細胞30min ;
4 、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗 ,然後將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜 ;
5 、PBS衝洗細胞3次 ,每次10min ,按1 :150的比例稀釋抗α-actin的二抗 , 37℃條件下放置1h ;
6
、用PBS衝洗3次
,每次10min
,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像並拍照
。
細胞簡介 :
人腦膜分離自腦膜組織 ;腦膜是顱骨與腦間的隔膜 ,一共有三層 ,由外向內為硬腦膜 、蛛網膜和軟腦膜 。腦膜細胞圍繞著大腦 ,參與中樞神經係統的正常發育 ,能穩定腦軟膜表麵的細胞外基質 、組織放射狀膠質細胞網絡和小腦皮層分層結構 。
產品名稱 | 人腦膜細胞 | 組織來源 | 腦膜組織 |
英文名稱 | Human Meningeal Cells | 產品規格 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 |
方法簡介
:
公司實驗室分離的人腦膜采用消化法結合差速貼壁法製備而來 ,細胞總量約為5×10?cells/瓶 。
質量檢測
公司實驗室分離的人腦膜經Vimentin免疫熒光鑒定 ,純度可達90%以上 ,且不含有HIV-1 、HBV 、HCV 、支原體 、細菌 、酵母和真菌等 。
培養信息
:
培養基 含FBS 、生長添加劑 、Penicillin 、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳5代左右 ;3代以內狀態佳
消化液 0.25%
培養條件 氣相 :空氣 ,95% ;CO2 ,5%
注意事項
:
1. 收到細胞後首先觀察細胞瓶是否完好
,培養液是否有漏液
、渾濁等現象
,若有上述現象發生請及時和老哥俱樂部聯係
。
2. 仔細閱讀細胞說明書 ,了解細胞相關信息 ,如細胞形態 、所用培養基 、血清比例 、所需細胞因子等 ,確保細胞培養條件一致 ,若由於培養條件不一致而導致細胞出現問題 ,責任由客戶自行承擔 。
3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表麵 ,顯微鏡下觀察細胞狀態 。因運輸問題 ,部分細胞由於溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片 ,是正常現象 。觀察好細胞狀態後 ,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置於37℃培養箱放置4-6h 。
4. 貼壁細胞可以消化 ,懸浮細胞直接混勻收集細胞 ,900 rpm-1000 rpm離心3 min ,棄上清 。加5 mL PBS重懸細胞 ,再900 rpm-1000 rpm離心3 min , ,用新鮮的*培養基重懸細胞 ,並接種到新的培養瓶或培養皿中 ,置於培養箱中進行培養 。
5. 請客戶用相同條件的培養基用於細胞培養 。
6. 建議客戶收到細胞後前3天各拍幾張細胞照片 ,記錄細胞狀態 ,便於和我司技術部溝通交流 。由於運輸的原因 ,個別敏感細胞會出現不穩定的情況 ,請及時和老哥俱樂部聯係 ,告知細胞的具體情況 ,以便老哥俱樂部的技術人員跟蹤回訪直至問題解決 。
7. 該細胞僅供科研使用 。
8. 備注 :運輸用的培養基(灌液培養基)不能再用來培養細胞 ,請換用按照說明書細胞培養條件新配製的*培養基來培養細胞 。收到細胞後次傳代建議1 :2傳代 。
9.注意 : 1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿 。不是1個T25瓶傳2個10cm皿 。
公司正在出售的產品
:
小鼠 IgG(mouse IgG) 作用 : ELISA 規格 : 96T 美國 ADI
小鼠類胰島素樣生長因子 -1 (mouse IGF-1) 作用 : ELISA 規格 : 96T 美國 R&D
小鼠 IGF-II (Mouse IGF-II) ELISA Kit 作用 : ELISA 規格 : 96T 美國 R&D
小鼠白介素 -1 a (mouse IL-1 a ) 作用 : ELISA 規格 : 96T 奧地利 Bender
小鼠鈣通道阻滯劑(CCB)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human aquaporin 4 (AQP-4) ELISA Kit 人水通道蛋白4(AQP-4)試劑盒
Humanalpha-granularmembraneprotein,GMP-140ELISAKit 人血漿α顆粒膜蛋白(GMP-140)試劑盒 96T/48T 進口分裝
HumanApolipoproteinC3,ApoC3試劑盒人載脂蛋白C3(ApoC3)試劑盒規格 :96T/48T
植物氧化應激活性氧(ROS)熒光測定試劑盒(過氧亞硝基陰離子)20次
Humaoll-likereceptor9,TLR-9ELISAKit人Toll樣受體9(TLR-9/CD289)試劑盒規格 :96T/48T
CXADR重組小鼠 CXADR 蛋白 Protein
Adipo R2(adiponectin receptor 2 0.5mgAdipo R2(adiponectin receptor 2) 脂聯素受體-2(抗原)
AGER重組人 AGER / RAGE 蛋白 Protein
FCGR2B Protein Human 重組人 CD32b / FCGR2B 蛋白 (His & AVI 標簽), Biotinylated
IL13RA1 Protein Rat 重組大鼠 IL13RA1 蛋白 (Fc 標簽)
Adipo R2(adiponectin receptor 2 0.5mgAdipo R2(adiponectin receptor 2) 脂聯素受體-2(抗原)
FCGR2B Protein Human 重組人 CD32b / FCGR2B 蛋白 (His & AVI 標簽), Biotinylated
CXADR重組小鼠 CXADR 蛋白 Protein
IL13RA1 Protein Rat 重組大鼠 IL13RA1 蛋白 (Fc 標簽)
AGER重組人 AGER / RAGE 蛋白 Protein
人腦膜細胞大鼠細胞因子信號轉導抑製因子1(SOCS1)試劑盒 ,英文名 : SOCS1 ELISA Kit
Mouse glial fibrillary acidic protein (GFAP) ELISA Kit 小鼠神經膠質纖維酸性蛋白(GFAP)試劑盒
MouseCollageypeⅠ,ColⅠELISAKit 小鼠Ⅰ型膠原(ColⅠ)試劑盒 96T/48T 進口分裝
HSV-IIgM單皰疹Ⅰ型病毒IgM(捕獲法二步法)
細胞IRAK4激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次
ELISAKitIL-4大鼠白介素4
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