細胞簡介 ：

人結腸癌組織源分離自患有結腸癌病人的結腸癌組織 ；結腸癌是常見的發生於結腸部位的消化道惡性腫瘤 ，好發於直腸與乙狀結腸交界處 ，以40～50歲年齡組發病率高，男女之比為2～3 ：1 。發病率占胃腸道腫瘤的第3位 。結腸癌主要為腺癌 、黏液腺癌 、未分化癌 。大體形態呈息肉狀 、潰瘍型等 。結腸癌可沿腸壁環行發展 ，沿腸管縱徑上下蔓延或向腸壁深層浸潤 ，除經淋巴管 、血流轉移和局部侵犯外 ，還可向腹腔內種植或沿縫線 、切口麵擴散轉移 。慢性結腸炎患者 、結腸息肉患者 、男性肥胖者等為易感人群 。人結腸癌組織源不僅廣泛應用於分子 、細胞生物學和生物醫學基礎研究 ，如蛋白質組學 、基因組學 、細胞株（係）研究 、DNA ，RNA和遺傳學研究等 ，還可應用於當今熱門的生物醫藥產業如藥物篩選 、藥物代謝和毒理研究 、癌症藥物的研究等 。人結腸癌組織源在生物醫藥領域有不可替代性作用 。

方法簡介：

公司實驗室分離的癌組織源采用膠原酶消化 、經Percoll離心純化製備而來 ，細胞總量約為5×10?cells/瓶 。

質量檢測

公司實驗室分離的人結腸癌組織源經檢測 ，純度可達90%以上 ，且不含有HIV-1 、HBV 、HCV 、支原體 、細菌 、酵母和真菌等 。

培養信息 ：

培養基 含FBS 、生長添加劑 、Penicillin 、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態 梭形 、多角形

傳代特性 可傳5代左右 ；3代以內狀態佳

消化液 0.25%

培養條件 氣相 ：空氣 ，95% ；CO2 ，5%

實驗報告 ：

一 、分離與培養 ：

1 、無菌條件下 ，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織 ，然後用PBS將此組織塊清洗2次 ，將組織剪成1mm3左右大小 ；

2 、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶） ，混懸10s ，置37℃條件下消化10min ，之後用滴管吹打製成單細胞懸液 ，自然沉澱並收集上清 ，用含10% FBS培養基終止消化後4℃放置 ；

3 、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液 ，混懸10s ，置37℃消化10 min後 ，按上述方法收集上清並終止消化後4℃放置 ，重複此步驟2-3次 ，直至組織被消化 ；

4 、用200目不鏽鋼篩網過濾細胞消化液 ，1200r/min 離心10min ，棄去上清 ，沉澱細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養基混懸 ，接種於25cm2培養瓶 ，放置於37℃  ，5％CO2 培養箱中培養 ；

5 、差速貼壁1h後 ，吸出培養基 ，按實驗需要接種於6孔板中繼續培養 ；二 、免疫熒光鑒定 ：

1 、待心房肌細胞生長至80%融合時 ，棄去培養基，用溫育的PBS衝洗細胞2次 ，每次10min ，然後用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min ；

2 、PBS衝洗細胞2次 ，每次10min ，然後在4℃條件下 ，用0.1％Triton X-100透膜15min ；

3 、PBS衝洗細胞2次 ，每次10min ，然後在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min ；

4 、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗 ，然後將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜 ；

5 、PBS衝洗細胞3次 ，每次10min ，按1 ：150的比例稀釋抗α-actin的二抗 ， 37℃條件下放置1h ；

6 、用PBS衝洗3次 ，每次10min ，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像並拍照 。

公司正在出售的產品 ：

豬肌球蛋白輕鏈0酸酶(MLCP)ELISA 試劑盒

Neuroophic factor glial cell line derived (GDNF) ELISA Kit 人膠質細胞係來源的神經營養因子(GDNF)檢測試劑盒

Porcineacetylcholine,ACHELISAKit 豬乙酰(ACh)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforAlphaNAG(MouseAlphaN-acetylglucosaminidase)ELISAKit小鼠αN已酰氨基葡糖苷酶

血液離子(K)濃度化學比色法定量檢測試劑盒20次

PlaIndole-3-aceticacid,IAAELISAKit植物吲哚乙酸(IAA)檢測試劑盒規格 ：96T/48T

HA重組甲型流感 H1N1 (A/Ohio/07/2009) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 Protein

PEPT1 (Peptide-transporters 1 0.5mgPEPT1 (Peptide-transporters 1) 腸道肽轉運蛋白(小肽轉運蛋白)多肽

DCN重組人 Decorin / DCN / SLRR1B 蛋白 Protein

CGB5 Protein Human 重組人 CGB5 蛋白

CD34 Protein Human 重組人 CD34 蛋白

PEPT1 (Peptide-transporters 1 0.5mgPEPT1 (Peptide-transporters 1) 腸道肽轉運蛋白(小肽轉運蛋白)多肽

CGB5 Protein Human 重組人 CGB5 蛋白

HA重組甲型流感 H1N1 (A/Ohio/07/2009) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 Protein

CD34 Protein Human 重組人 CD34 蛋白

DCN重組人 Decorin / DCN / SLRR1B 蛋白 Protein

小鼠糖原0酸化酶同工酶MM(GP-MM)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human melatonin sulfate (MS) ELISA Kit 人褪黑色素(MS)檢測試劑盒

HumanLipoarabinomannan,LAMELISAKit 人脂阿拉伯甘露聚糖(LAM)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

Chickeni-iodothyronine,T3檢測試劑盒雞三甲狀腺原(T3)檢測試劑盒規格 ：96T/48T

載玻片細胞TNFALPHA蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20次

MouseEsiol,E3ELISAKit小鼠雌三醇(E3)檢測試劑盒規格 ：96T/48T

人結腸癌組織源細胞小鼠糖原0酸化酶同工酶II(GP-II)檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

小鼠糖原0酸化酶同工酶BB(GP-BB)檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

小鼠糖原合成酶激酶(GSK)檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

小鼠糖皮質類固醇受體(GR)檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

注意事項 ：

1. 收到細胞後首先觀察細胞瓶是否完好 ，培養液是否有漏液 、渾濁等現象 ，若有上述現象發生請及時和老哥俱樂部聯係 。

2. 仔細閱讀細胞說明書 ，了解細胞相關信息 ，如細胞形態 、所用培養基 、血清比例 、所需細胞因子等 ，確保細胞培養條件一致 ，若由於培養條件不一致而導致細胞出現問題 ，責任由客戶自行承擔 。

3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表麵 ，顯微鏡下觀察細胞狀態 。因運輸問題 ，部分細胞由於溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片，是正常現象 。觀察好細胞狀態後 ，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置於37℃培養箱放置4-6h 。

4. 貼壁細胞可以消化 ，懸浮細胞直接混勻收集細胞 ，900 rpm-1000 rpm離心3 min ，棄上清 。加5 mL PBS重懸細胞 ，再900 rpm-1000 rpm離心3 min ， ，用新鮮的*培養基重懸細胞 ，並接種到新的培養瓶或培養皿中 ，置於培養箱中進行培養 。

5. 請客戶用相同條件的培養基用於細胞培養 。

6. 建議客戶收到細胞後前3天各拍幾張細胞照片 ，記錄細胞狀態 ，便於和我司技術部溝通交流 。由於運輸的原因 ，個別敏感細胞會出現不穩定的情況 ，請及時和老哥俱樂部聯係 ，告知細胞的具體情況 ，以便老哥俱樂部的技術人員跟蹤回訪直至問題解決 。

7. 該細胞僅供科研使用 。

8. 備注 ：運輸用的培養基(灌液培養基)不能再用來培養細胞 ，請換用按照說明書細胞培養條件新配製的*培養基來培養細胞 。收到細胞後次傳代建議1 ：2傳代  。

9.注意 ： 1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿 。不是1個T25瓶傳2個10cm皿 。