產品名稱 :人肝實質細胞
產品特點 :人肝實質細胞公司正在出售的產品HuH-7細胞 ,人肝癌細胞 小鼠淋巴樣瘤細胞,P388D1細胞 小型豬腎細胞;MPK AHSG Others Mouse 小鼠 Fetuin-A / AHSG 人細胞裂解液 NCI-N87 [N87]人胃癌細胞 食管癌細胞 ,Ec109細胞 MG-63
產品型號 :
更新日期 :2024-12-11
訪問次數 :28
人肝實質細胞的詳細資料 :
實驗報告 :
一、分離與培養
:
1 、無菌條件下 ,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然後用PBS將此組織塊清洗2次 ,將組織剪成1mm3左右大小 ;
2 、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶) ,混懸10s ,置37℃條件下消化10min ,之後用滴管吹打製成單細胞懸液 ,自然沉澱並收集上清 ,用含10% FBS培養基終止消化後4℃放置 ;
3 、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液 ,混懸10s ,置37℃消化10 min後 ,按上述方法收集上清並終止消化後4℃放置,重複此步驟2-3次 ,直至組織被消化 ;
4 、用200目不鏽鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min ,棄去上清 ,沉澱細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸 ,接種於25cm2培養瓶 ,放置於37℃ ,5%CO2 培養箱中培養 ;
5 、差速貼壁1h後 ,吸出培養基 ,按實驗需要接種於6孔板中繼續培養 ;二 、免疫熒光鑒定 :
1 、待心房肌細胞生長至80%融合時 ,棄去培養基 ,用溫育的PBS衝洗細胞2次 ,每次10min ,然後用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min ;
2 、PBS衝洗細胞2次 ,每次10min ,然後在4℃條件下 ,用0.1%Triton X-100透膜15min ;
3 、PBS衝洗細胞2次,每次10min ,然後在室溫條件下 ,用4% BSA封閉細胞30min ;
4 、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗 ,然後將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜 ;
5 、PBS衝洗細胞3次 ,每次10min ,按1 :150的比例稀釋抗α-actin的二抗 , 37℃條件下放置1h ;
6
、用PBS衝洗3次
,每次10min
,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像並拍照
。
細胞簡介 :
人肝實質分離自肝髒組織 ;肝髒是身體內以代謝功能為主的一個器官 ,並在身體裏麵起著去氧化 、儲存肝糖 、分泌性蛋白質的合成等作用 ;肝髒也製造消化係統中之膽汁 。肝髒是機體內髒裏大的器官 ,位於機體中的腹部位置 ,在右側橫隔膜之下 ,位於膽囊之前端且於右邊腎髒的前方 ,胃的上方 。肝髒是機體消化係統中大的消化腺 ,為一紅棕色的V字形器官 。肝髒是尿素合成的主要器官 ,又是新陳代謝的重要器官 。肝髒在機體位置和形態結構:肝髒位於右上腹 ,隱藏在右側膈下和肋骨深麵 ,大部分肝為肋弓所複蓋 ,僅在腹上區 、右肋弓間露出並直接接觸腹前壁,肝上麵則與膈及腹前壁相接 。肝實質細胞是指具有肝功能的單位 ,是肝髒的基本組成單位之一 。肝實質細胞與主要病生理變化 :急性肝炎 、肝硬化 、肝膿腫 。肝實質細胞屬於中高度分化細胞 ,生長營養需求高 ,在體外存活時間短 ;細胞呈圓形或多角形 ,核大而圓 ,居中 ,常染色質豐富 ,部分有雙核或多倍體核 。肝髒作為體內重要的器官 ,在整個物質代謝過程中具有廣泛而多樣的作用 。
產品名稱 | 人肝實質細胞 | 組織來源 | 肝髒組織 |
英文名稱 | 詳見說明書 | 產品規格 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 |
方法簡介
:
公司實驗室分離的人肝實質采用混合酶灌流消化 、反複低速離心製備而來 ,細胞總量約為5×10?cells/瓶 。
質量檢測
公司實驗室分離的人肝實質經Cytokeratin-18免疫熒光鑒定 ,純度可達90%以上 ,且不含有HIV-1 、HBV 、HCV 、支原體 、細菌 、酵母和真菌等 。
培養信息
:
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培養基 含FBS 、生長添加劑、Penicillin 、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態 上皮細胞樣
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%
培養條件 氣相 :空氣 ,95% ;CO2 ,5%
注意事項
:
1. 收到細胞後首先觀察細胞瓶是否完好
,培養液是否有漏液
、渾濁等現象
,若有上述現象發生請及時和老哥俱樂部聯係
。
2. 仔細閱讀細胞說明書 ,了解細胞相關信息 ,如細胞形態 、所用培養基 、血清比例 、所需細胞因子等 ,確保細胞培養條件一致 ,若由於培養條件不一致而導致細胞出現問題 ,責任由客戶自行承擔 。
3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表麵 ,顯微鏡下觀察細胞狀態 。因運輸問題 ,部分細胞由於溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片 ,是正常現象 。觀察好細胞狀態後 ,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置於37℃培養箱放置4-6h 。
4. 貼壁細胞可以消化 ,懸浮細胞直接混勻收集細胞 ,900 rpm-1000 rpm離心3 min ,棄上清 。加5 mL PBS重懸細胞 ,再900 rpm-1000 rpm離心3 min , ,用新鮮的*培養基重懸細胞 ,並接種到新的培養瓶或培養皿中,置於培養箱中進行培養 。
5. 請客戶用相同條件的培養基用於細胞培養 。
6. 建議客戶收到細胞後前3天各拍幾張細胞照片 ,記錄細胞狀態 ,便於和我司技術部溝通交流 。由於運輸的原因 ,個別敏感細胞會出現不穩定的情況 ,請及時和老哥俱樂部聯係 ,告知細胞的具體情況 ,以便老哥俱樂部的技術人員跟蹤回訪直至問題解決 。
7. 該細胞僅供科研使用 。
8. 備注 :運輸用的培養基(灌液培養基)不能再用來培養細胞 ,請換用按照說明書細胞培養條件新配製的*培養基來培養細胞 。收到細胞後次傳代建議1 :2傳代 。
9.注意 : 1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿 。不是1個T25瓶傳2個10cm皿 。
公司正在出售的產品
:
兔子免疫球蛋白G試劑盒 兔子免疫球蛋白G試劑盒 規格型號 :96T/48T 兔子免疫球蛋白G試劑盒 ,規格型號 :96T/48T ,來源 :試劑盒(進口分裝) ,產品別名 :兔子免疫球蛋白G試劑盒 、兔子免疫球蛋白G 試劑盒 保存條件 :2-8℃ 保質期 :6個月 。
兔子免疫球蛋白E試劑盒 兔子免疫球蛋白E試劑盒 規格型號 :96T/48T 兔子免疫球蛋白E試劑盒 ,規格型號 :96T/48T ,來源 :試劑盒(進口分裝) ,產品別名 :兔子免疫球蛋白E試劑盒 、兔子免疫球蛋白E 試劑盒 保存條件 :2-8℃ 保質期 :6個月 。
兔子免疫球蛋白A試劑盒 兔子免疫球蛋白A試劑盒 規格型號 :96T/48T 兔子免疫球蛋白A試劑盒 ,規格型號 :96T/48T ,來源 :試劑盒(進口分裝) ,產品別名 :兔子免疫球蛋白A試劑盒 、兔子免疫球蛋白A 試劑盒 保存條件 :2-8℃ 保質期 :6個月 。
兔子可溶性CD40配體試劑盒 兔子可溶性CD40配體試劑盒 規格型號 :96T/48T 兔子可溶性CD40配體試劑盒 ,規格型號 :96T/48T ,來源 :試劑盒(進口分裝) ,產品別名 :兔子可溶性CD40配體試劑盒 、兔子可溶性CD40配體試劑盒 保存條件 :2-8℃ 保質期 :6個月 。
小鼠白介素35(IL-35)試劑盒 96T/48T
Rat heat shock factor 1 (HSF1) ELISA Kit 大鼠熱休克因子1(HSF1)試劑盒
Humayrosinekinase2,Tyk-2ELISAKit 人酪激酶2(Tyk-2)試劑盒 96T/48T 進口分裝
HumanCalretinin,CR試劑盒人鈣結合蛋白(CR)試劑盒規格 :96T/48T
重組逆轉錄病毒穩態表達細胞克隆凍存試劑盒50次
Humansolubleierleukin-1receptorⅠ ,IL-1sRⅠELISAKit人白介素1可溶性受體Ⅰ(IL-1sRⅠ)試劑盒規格 :96T/48T
SDF2重組人 SDF2 蛋白 Protein
血小板生成素(TPO)重組蛋白 Recombinant Thrombopoietin (TPO)
HA重組甲型流感 H1N1 (A/California/07/2009) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 Protein
GFPT1 Protein Human 重組人 GFPT1 / GFAT 蛋白
B18R Protein Vaccinia Virus 重組牛痘病毒 B18R / B19R 蛋白
血小板生成素(TPO)重組蛋白 Recombinant Thrombopoietin (TPO)
GFPT1 Protein Human 重組人 GFPT1 / GFAT 蛋白
SDF2重組人 SDF2 蛋白 Protein
B18R Protein Vaccinia Virus 重組牛痘病毒 B18R / B19R 蛋白
HA重組甲型流感 H1N1 (A/California/07/2009) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 Protein
人肝實質細胞大鼠血小板激活因子(PAF)試劑盒 ,英文名 : PAF ELISA Kit
Mouse calf iestinal alkaline phosphatase (CIAP) ELISA Kit 小鼠牛小腸堿性0酸酶(CIAP)試劑盒
MouseVascularEndothelialcellGrowthFactorD,VEGF-DELISAkit 小鼠血管內皮細胞生長因子D(VEGF-D)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforHumancoagulationfactorII,FIIELISAKit人Ⅱ
細胞CDK6/CYCD1激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次
ELISAKitCAM大鼠鈣調素
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