細胞簡介 ：

人肺小動脈平滑肌分離自肺小動脈組織 ；小動脈（smallartery） ，管徑在0.3～1mm之間 ，小動脈包括粗細不等的幾級分支 ，也屬肌性動脈。較大的小動脈 ，內膜有明顯的內彈性膜 ，中膜有幾層平滑肌 ，外膜厚度與中膜相近 ，一般沒有外彈性膜 。小動脈是決定周圍循環阻力大小的主要因素 ，也是調節微循環灌注量的“總開關" 。典型的小動脈 ，其管壁的厚度與管徑相比約為1∶2 。中膜的肌層相對比其他動脈為厚 ，當平滑肌在神經支配下強力收縮時 ，其管腔可以閉塞 ，而使血液不能流入它所分布的毛細血管內 ，從而增加了周圍血液循環的阻力 。如果有許多小動脈同時收縮 ，可使血壓顯著上升 。反之 ，當小動脈的平滑肌舒張時 ，則可使大量的血液流入毛細血管 ，外周阻力明顯下降 ，血壓降低 。終末小動脈（terminal arteri-ole）的口徑為20～30μm ；後小動脈（metar-teriole） ，又稱毛細血管前小動脈（precapil-lary arteriole）的口徑為12～15μm 。管壁內均有較稀疏的平滑肌 ，在毛細血管前小動脈分支的起始部分 ，管壁平滑肌成分增厚，叫做毛細血管前括約肌（precapillary sphinc-ter） ，其收縮或舒張 ，可調節真毛細血管的血流量 ，是調節微循環灌注量的“分開關" 。

方法簡介 ：

公司實驗室分離的人肺小動脈平滑肌采用-膠原酶聯合消化法製備而來製備而來 ，細胞總量約為5×10?cells/瓶 。

質量檢測

公司實驗室分離的人肺小動脈平滑肌經α-SMA免疫熒光鑒定 ，純度可達90%以上 ，且不含有HIV-1 、HBV 、HCV 、支原體 、細菌 、酵母和真菌等。

培養信息 ：

培養基 含FBS 、生長添加劑 、Penicillin 、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次 ；

生長特性 貼壁

細胞形態 成纖維細胞樣

傳代特性 可傳3-5代左右

消化液 0.25%

培養條件 氣相 ：空氣 ，95% ；CO2 ，5%

實驗報告 ：

一 、分離與培養 ：

1 、無菌條件下 ，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織 ，然後用PBS將此組織塊清洗2次 ，將組織剪成1mm3左右大小 ；

2 、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶） ，混懸10s ，置37℃條件下消化10min ，之後用滴管吹打製成單細胞懸液 ，自然沉澱並收集上清 ，用含10% FBS培養基終止消化後4℃放置 ；

3 、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s ，置37℃消化10 min後 ，按上述方法收集上清並終止消化後4℃放置 ，重複此步驟2-3次 ，直至組織被消化 ；

4 、用200目不鏽鋼篩網過濾細胞消化液 ，1200r/min 離心10min ，棄去上清 ，沉澱細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養基混懸 ，接種於25cm2培養瓶 ，放置於37℃  ，5％CO2 培養箱中培養 ；

5 、差速貼壁1h後 ，吸出培養基 ，按實驗需要接種於6孔板中繼續培養 ；二 、免疫熒光鑒定 ：

1 、待心房肌細胞生長至80%融合時 ，棄去培養基 ，用溫育的PBS衝洗細胞2次 ，每次10min ，然後用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min ；

2 、PBS衝洗細胞2次 ，每次10min ，然後在4℃條件下 ，用0.1％Triton X-100透膜15min ；

3 、PBS衝洗細胞2次 ，每次10min ，然後在室溫條件下 ，用4% BSA封閉細胞30min ；

4 、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗 ，然後將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜 ；

5 、PBS衝洗細胞3次 ，每次10min ，按1 ：150的比例稀釋抗α-actin的二抗 ， 37℃條件下放置1h ；

6 、用PBS衝洗3次 ，每次10min ，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像並拍照 。

公司正在出售的產品 ：

大鼠巨嗜細胞趨化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)檢測試劑盒  ，英文名 ： MCP-1/CCL2/MCAF ELISA Kit

Mouse haptoglobin / haptoglobin (Hpt/HP) ELISA Kit 小鼠結合珠蛋白/觸珠蛋白(Hpt/HP)檢測試劑盒

Mousephospho-exacellularsignal-regulatedkinase,pERKELISAKit 小鼠0酸化細胞外信號調節激酶(pERK)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforHumanparamyxovirusparotitisIgGELISAKit人腮腺病毒IgG

同位素標記放射活性TCA檢測試劑盒20次

ELISAKitAMPK大鼠0酸化腺苷酸活化蛋白激酶

HA重組甲型流感 H9N2 (A/HongKong/1073/99) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 Protein

PAR-2 OP(Protease-activated receptors-2 Activating Orange-peptide 0.5mgPAR-2 OP(Protease-activated receptors-2 Activating Orange-peptide) 蛋白酶激活受體-2桔抗肽

VEGFA重組人 VEGF 183 / VEGF-A 蛋白 Protein

FASLG Protein Human 重組人 Fas Ligand / FASLG / CD95L 蛋白

CD80 Protein Human 重組人 CD80 / B7-1 蛋白

PAR-2 OP(Protease-activated receptors-2 Activating Orange-peptide 0.5mgPAR-2 OP(Protease-activated receptors-2 Activating Orange-peptide) 蛋白酶激活受體-2桔抗肽

FASLG Protein Human 重組人 Fas Ligand / FASLG / CD95L 蛋白

HA重組甲型流感 H9N2 (A/HongKong/1073/99) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 Protein

CD80 Protein Human 重組人 CD80 / B7-1 蛋白

VEGFA重組人 VEGF 183 / VEGF-A 蛋白 Protein

小鼠穀酸脫羧酶自身抗體(GAD-Ab)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human retinoblastoma tumor suppressor protein (pRB) ELISA Kit 人視網膜母細胞瘤抑製蛋白(pRB)檢測試劑盒

HumanleukoieneD4,LT-D4ELISAKit 人白三烯D4(LTD4)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

Humanai-septolysinO,ASO檢測試劑盒人抗鏈球菌溶血素O/抗O(ASO)檢測試劑盒規格 ：96T/48T

植物纖維素酶(cellulase)活性比色法定量檢測試劑盒20次

HumanoponinⅠ ，Tn-ⅠELISAKit人肌鈣蛋白Ⅰ(Tn-Ⅰ)檢測試劑盒規格 ：96T/48T

人肺小動脈平滑肌細胞小鼠C-肽   英文名稱 ：   C-peptide   規格 ：      英文縮寫 ：   C-peptide

小鼠心肌肌鈣蛋白   英文名稱 ：   cardiac oponin 1   規格 ：      英文縮寫 ：   cTn1

小鼠粒細胞集落刺激因子   英文名稱 ：   granulocyte colony-stimulating factor   規格 ：      英文縮寫 ：   G-CSF

小鼠粒細胞-巨噬細胞集落刺激因子   英文名稱 ：   granulocyte-macrophage colony-stimulating factor   規格 ：      英文縮寫 ：   GM-CSF

注意事項 ：

1. 收到細胞後首先觀察細胞瓶是否完好 ，培養液是否有漏液 、渾濁等現象 ，若有上述現象發生請及時和老哥俱樂部聯係 。

2. 仔細閱讀細胞說明書 ，了解細胞相關信息 ，如細胞形態 、所用培養基 、血清比例 、所需細胞因子等 ，確保細胞培養條件一致 ，若由於培養條件不一致而導致細胞出現問題 ，責任由客戶自行承擔 。

3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表麵 ，顯微鏡下觀察細胞狀態 。因運輸問題 ，部分細胞由於溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片 ，是正常現象 。觀察好細胞狀態後 ，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置於37℃培養箱放置4-6h 。

4. 貼壁細胞可以消化 ，懸浮細胞直接混勻收集細胞 ，900 rpm-1000 rpm離心3 min ，棄上清 。加5 mL PBS重懸細胞 ，再900 rpm-1000 rpm離心3 min ， ，用新鮮的*培養基重懸細胞 ，並接種到新的培養瓶或培養皿中 ，置於培養箱中進行培養 。

5. 請客戶用相同條件的培養基用於細胞培養 。

6. 建議客戶收到細胞後前3天各拍幾張細胞照片 ，記錄細胞狀態 ，便於和我司技術部溝通交流 。由於運輸的原因 ，個別敏感細胞會出現不穩定的情況 ，請及時和老哥俱樂部聯係 ，告知細胞的具體情況 ，以便老哥俱樂部的技術人員跟蹤回訪直至問題解決 。

7. 該細胞僅供科研使用 。

8. 備注 ：運輸用的培養基(灌液培養基)不能再用來培養細胞 ，請換用按照說明書細胞培養條件新配製的*培養基來培養細胞 。收到細胞後次傳代建議1 ：2傳代 。

9.注意 ： 1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿 。不是1個T25瓶傳2個10cm皿 。