細胞簡介 ：

大鼠脂肪分離自脂肪組織 ；脂肪組織主要由大量群集的脂肪細胞構成 ，聚集成團的脂肪細胞由薄層疏鬆結締組織分隔成小葉 ；貯存的脂肪 ，在需要時可迅速分解成甘油和脂肪酸 ，經血液輸送到各組織以供利用 。它們影響胰島素敏感性 、血壓水平 、內皮功能、纖溶活動及炎症反應 ，參與多種重要病理生理過程 ；脂肪組織已由過去單純作為能量儲存的器官而成為一個極其重要的內分泌係統 。脂肪細胞分為白色脂肪細胞和褐色（棕色）脂肪細胞 ，常呈白色 ，在嬰幼兒期大量增殖 ，到青春期數量達到 ，此後數量一般不再增加 。細胞內含有大量富含脂肪的小泡 ，稱為脂質泡 ，富含光麵內質網 。此外 ，還有一種褐色脂肪細胞 ，在動物體內主要存在於肩胛骨間 、頸背部 、腋窩 、縱隔及腎髒周圍 ，含有高度團縮的褐色脂肪 ，作用是將脂質分解產熱 ，調節體內脂質比例 。

方法簡介 ：

公司實驗室分離的大鼠脂肪采用消化法製備而來 ，細胞總量約為5×10?cells/瓶 。

質量檢測

公司實驗室分離的大鼠脂肪經油紅O染色檢測 ，純度可達90%以上 ，且不含有HIV-1 、HBV 、HCV 、支原體 、細菌 、酵母和真菌等 。

培養信息 ：

培養基 含FBS 、生長添加劑 、Penicillin 、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態 梭形 、多角形

傳代特性 屬於終末分化細胞 ；屬於不增殖細胞群

消化液 0.25%

培養條件 氣相 ：空氣 ，95% ；CO2 ，5%

實驗報告 ：

一 、分離與培養 ：

1 、無菌條件下 ，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然後用PBS將此組織塊清洗2次 ，將組織剪成1mm3左右大小 ；

2 、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶） ，混懸10s ，置37℃條件下消化10min ，之後用滴管吹打製成單細胞懸液 ，自然沉澱並收集上清 ，用含10% FBS培養基終止消化後4℃放置 ；

3 、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液 ，混懸10s ，置37℃消化10 min後 ，按上述方法收集上清並終止消化後4℃放置 ，重複此步驟2-3次 ，直至組織被消化 ；

4 、用200目不鏽鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min ，棄去上清 ，沉澱細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養基混懸 ，接種於25cm2培養瓶 ，放置於37℃  ，5％CO2 培養箱中培養 ；

5 、差速貼壁1h後 ，吸出培養基 ，按實驗需要接種於6孔板中繼續培養 ；二 、免疫熒光鑒定 ：

1 、待心房肌細胞生長至80%融合時 ，棄去培養基 ，用溫育的PBS衝洗細胞2次 ，每次10min ，然後用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min ；

2 、PBS衝洗細胞2次 ，每次10min ，然後在4℃條件下 ，用0.1％Triton X-100透膜15min ；

3 、PBS衝洗細胞2次 ，每次10min ，然後在室溫條件下 ，用4% BSA封閉細胞30min ；

4 、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗 ，然後將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜 ；

5 、PBS衝洗細胞3次 ，每次10min ，按1 ：150的比例稀釋抗α-actin的二抗 ， 37℃條件下放置1h ；

6 、用PBS衝洗3次 ，每次10min ，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像並拍照 。

公司正在出售的產品 ：

大鼠骨成型蛋白4(BMP-4)檢測試劑盒  ，英文名 ： BMP-4 ELISA Kit

Pig aminoterminal propeptide of type III procollagen (P III ) ELISA Kit 豬Ⅲ型前膠原氨基端肽(PⅢ)檢測試劑盒

2型脊髓灰質病毒(PV-2)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T

CLIAKitforMIS/AMH)ELISAKit大鼠繆勒管抑製物質/抗繆勒管激素

體液離子(K)濃度化學比色法定量檢測試劑盒20次

ELISAKitE犬雌激素

CNDP1重組小鼠 CNDP1 蛋白 Protein

玻連蛋白(VTN)重組蛋白 Recombinant Vitronectin (VTN)

PPCDC重組人 PPC-DC / PPCDC 蛋白 Protein

CD96 Protein Human 重組人 CD96 蛋白

RBP4 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 RBP4 蛋白

Aggrecan 軟骨蛋白聚糖/可聚蛋白多糖抗原 0.5mgAggrecan 軟骨蛋白聚糖/可聚蛋白多糖抗原

CD96 Protein Human 重組人 CD96 蛋白

REG3D重組小鼠 REG3D 蛋白 Protein

IFNA4 Protein Rat 重組大鼠 IFNA4 / IFNα4 / Interferon alpha-4 蛋白 (Fc 標簽)

C7重組人 C7 / Complement component 7 蛋白 Protein

小鼠纖溶酶/纖維蛋白溶酶(PL/Fbn)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat osteoprotegerin (OPG) ELISA Kit 大鼠骨保護素(OPG)檢測試劑盒

Humandopamine-β-hydroxylase,DBHELISAKit 人多巴胺-β羥化酶(DBH)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

ChickenHeatShockProtein20,HSP-20檢測試劑盒雞熱休克蛋白20(HSP-20)檢測試劑盒規格 ：96T/48T

載玻片細胞CASPASE-9蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20次

MouseHelicobacterpyloriIgG,Hp-IgGELISAKit小鼠幽門螺旋菌IgG(Hp-IgG)檢測試劑盒規格 ：96T/48T

大鼠脂肪細胞小鼠血管緊張素原(aGT)檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

小鼠血管緊張素Ⅱ(ANG-Ⅱ)檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

小鼠血管緊張素Ⅰ(Ang-Ⅰ)檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

小鼠血管活性腸肽(VIP)檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

注意事項 ：

1. 收到細胞後首先觀察細胞瓶是否完好 ，培養液是否有漏液 、渾濁等現象 ，若有上述現象發生請及時和老哥俱樂部聯係 。

2. 仔細閱讀細胞說明書 ，了解細胞相關信息 ，如細胞形態 、所用培養基 、血清比例 、所需細胞因子等 ，確保細胞培養條件一致 ，若由於培養條件不一致而導致細胞出現問題 ，責任由客戶自行承擔 。

3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表麵 ，顯微鏡下觀察細胞狀態 。因運輸問題 ，部分細胞由於溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片 ，是正常現象 。觀察好細胞狀態後 ，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置於37℃培養箱放置4-6h 。

4. 貼壁細胞可以消化 ，懸浮細胞直接混勻收集細胞 ，900 rpm-1000 rpm離心3 min ，棄上清 。加5 mL PBS重懸細胞 ，再900 rpm-1000 rpm離心3 min ， ，用新鮮的*培養基重懸細胞 ，並接種到新的培養瓶或培養皿中 ，置於培養箱中進行培養 。

5. 請客戶用相同條件的培養基用於細胞培養 。

6. 建議客戶收到細胞後前3天各拍幾張細胞照片 ，記錄細胞狀態 ，便於和我司技術部溝通交流。由於運輸的原因 ，個別敏感細胞會出現不穩定的情況 ，請及時和老哥俱樂部聯係 ，告知細胞的具體情況 ，以便老哥俱樂部的技術人員跟蹤回訪直至問題解決 。

7. 該細胞僅供科研使用 。

8. 備注 ：運輸用的培養基(灌液培養基)不能再用來培養細胞 ，請換用按照說明書細胞培養條件新配製的*培養基來培養細胞 。收到細胞後次傳代建議1 ：2傳代  。

9.注意 ： 1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿 。不是1個T25瓶傳2個10cm皿 。