老哥俱乐部

细胞简介：

大鼠尾动脉内皮分离自尾动脉组织；尾动脉是鼠尾的主要血管，尾部主要大血管分布表浅
，尾侧静脉适于注射给药，尾正中动脉适于动脉采血、练习显微外科血管吻合技术等
，实际应用相当普遍。许多动物模型也使用鼠尾。鼠尾部血管丰富，供血来源于荐中动脉和臀上动脉两个动脉，形成尾椎节段性分布和纵向贯通分布相结合的特点，尾部浅层 3 套纵向动静脉系统，鼠尾背侧为不规则动静脉链状结构，深层血管与浅层血管双层笼状以每节脊椎为单位沟通
，且呈动静脉血管径不匹配的特点。通过研究发现鼠尾存在两套血源: 荐中动脉和臀上动脉
。其在尾部依尾横动脉形成沟通。尾横动脉呈尾椎节段性分布，直接沟通尾正中动脉
、尾深动脉和皮支。在尾部被横断后，可以保持损伤节段以上尾椎的动静脉回流通路; 鼠尾存在动静脉口径明显不规范的现象: 尾外侧静脉明显大于伴随的动脉，而正中动脉明显大于伴随的静脉，形成供血主要来自腹面的尾正中动，回血主要依靠两侧的尾侧静脉
，符合腹面动脉保护的安全性，同时利于血管散热，尾横动脉提供了不同血源体系的沟通渠道。参考文献[王蕾
，叶明霞.大鼠尾部血管的解剖结构与鼠尾的生理功能探讨]
。

方法简介：

实验室分离的大鼠尾动脉内皮采用-胶原酶联合消化法结合差速贴壁法
、并通过内皮细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。

质量检测

实验室分离的大鼠尾动脉内皮经CD31免疫荧光鉴定
，纯度可达90%以上

，且不含有HIV-1、HBV
、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

培养信息：

包被条件：PLL（0.1mg/ml）
，明胶（0.1%）

培养基
：基础培养基，含FBS、EGF、bFGF、IGF
、VEGF

、Heparin、Hydrocortisone、Penicillin、Streptomycin等

换液频率：每2-3天换液一次

生长特性：贴壁

细胞形态：内皮细胞样

传代特性
：可传1-2代

消化液
：0.25%

培养条件
：气相：空气，95%
；CO2
，5%

大鼠尾动脉内皮体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的佳培养状态。

实验报告：

一、分离与培养
：

1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，将组织剪成1mm3左右大小
；

2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液
，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置
；

3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织被消化；

4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬
，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；

5、差速贴壁1h后，吸出培养基
，按实验需要接种于6孔板中继续培养
；二

、免疫荧光鉴定：

1、待心房肌细胞生长至80%融合时
，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次
，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min
；

2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下
，用0.1％Triton X-100透膜15min

；

3
、PBS冲洗细胞2次，每次10min

，然后在室温条件下
，用4% BSA封闭细胞30min；

4
、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；

5
、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；

6、用PBS冲洗3次
，每次10min，在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照
。

公司正在出售的产品：

大鼠单核细胞趋化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)检测试剂盒 ，英文名： MCP-1/CCL2/MCAF ELISA Kit

Porcine apolipoprotein A1 (apo-A1) ELISA Kit 猪载脂蛋白A1(apo-A1)检测试剂盒

ELISA 小鼠凋亡诱导因子(mouse AIF)  进口分装

CLIAKitforLPAb-IgG(HumanLegionellaaibodyIgG)ELISAKit人军团菌抗体IgG

通用型DAB显色溶液A液：10毫升B液：90毫升

ELISAKitIL-17鸡白介素17

TNFSF11重组小鼠 RANKL / OPGL / TNFSF11 / CD254 蛋白 (Fc 标签) Protein

表皮生长因子(EGF)重组蛋白 Recombinant Epidermal Growth Factor (EGF)

ARL2BP重组人 ARL2BP / BART1 蛋白 Protein

CD40LG Protein Human 重组人 CD40L / CD154 / TNFSF5 蛋白 (Fc 标签)

IFNA8 Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 Interferon alpha-B / IFNA8 蛋白

表皮生长因子(EGF)重组蛋白 Recombinant Epidermal Growth Factor (EGF)

CD40LG Protein Human 重组人 CD40L / CD154 / TNFSF5 蛋白 (Fc 标签)

TNFSF11重组小鼠 RANKL / OPGL / TNFSF11 / CD254 蛋白 (Fc 标签) Protein

IFNA8 Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 Interferon alpha-B / IFNA8 蛋白

ARL2BP重组人 ARL2BP / BART1 蛋白 Protein

小鼠血管生成素2(ANG-2)ELISA 试剂盒 96T/48T

Human leukocyte aigen E (HLA-E) ELISA Kit 人类白细胞抗原E(HLA-E)检测试剂盒

Humanpara-aminobenzoicacid,PABAELISAKit 人对(PABA)检测试剂盒 96T/48T 进口分装

ACTH检测试剂盒鱼促肾上腺皮质激素规格：96T/48T

油脂DNA萃取试剂盒10次

MouseIerferonβ,IFN-β/IFNBELISAKit小鼠β干扰素(IFN-β/IFNB)检测试剂盒规格：96T/48T

大鼠尾动脉内皮细胞小鼠胰岛素检测试剂盒   小鼠胰岛素试剂盒   规格型号：96T/48T   小鼠胰岛素试剂盒，规格型号：96T/48T
，来源：检测试剂盒（进口分装），产品别名：小鼠胰岛素试剂盒、小鼠胰岛素检测试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。

小鼠检测试剂盒   小鼠试剂盒   规格型号

：96T/48T   小鼠试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：检测试剂盒（进口分装），产品别名
：小鼠试剂盒、小鼠检测试剂盒   保存条件
：2-8℃   保质期：6个月。

小鼠氧化低密度脂蛋白抗体检测试剂盒   小鼠氧化低密度脂蛋白抗体试剂盒   规格型号：96T/48T   小鼠氧化低密度脂蛋白抗体试剂盒
，规格型号：96T/48T，来源
：检测试剂盒（进口分装），产品别名：小鼠氧化低密度脂蛋白抗体试剂盒、小鼠氧化低密度脂蛋白抗体检测试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期
：6个月。

小鼠血小板因子检测试剂盒   小鼠血小板因子试剂盒   规格型号：96T/48T   小鼠血小板因子试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：检测试剂盒（进口分装）
，产品别名
：小鼠血小板因子试剂盒

、小鼠血小板因子检测试剂盒   保存条件
：2-8℃   保质期：6个月
。

注意事项：

1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现象发生请及时和老哥俱乐部联系。

2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态
、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等，确保细胞培养条件一致，若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题，责任由客户自行承担。

3. 用75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题
，部分细胞由于温度变化及剧烈碰亡破碎形成碎片，是正常现象。观察好细胞状态后，75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置4-6h。

4. 贴壁细胞可以消化

，悬浮细胞直接混匀收集细胞，900 rpm-1000 rpm离心3 min，弃上清
。加5 mL PBS重悬细胞，再900 rpm-1000 rpm离心3 min，，用新鲜的*培养基重悬细胞，并接种到新的培养瓶或培养皿中，置于培养箱中进行培养。

5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养
。

6. 建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和我司技术部沟通交流。由于运输的原因
，个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和老哥俱乐部联系
，告知细胞的具体情况，以便老哥俱乐部的技术人员跟踪回访直至问题解决。

7. 该细胞仅供科研使用。

8. 备注：运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的*培养基来培养细胞

。收到细胞后次传代建议1：2传代 。

9.注意
： 1:2传代就是1个T25瓶传2个T25瓶或者2个6cm皿。不是1个T25瓶传2个10cm皿
。