老哥俱乐部

细胞简介：

大鼠脊髓神经少突胶质分离自脊髓组织；脊髓是细细的管束状的神经结构，位于脊柱的椎管内且被脊椎保护

；是源自脑的中枢神经系统延伸部分。中枢神经系统的细胞依靠复杂的联系来处理传递信息
。脊髓的主要功能是传送脑与外周之间的神经信息。人和脊椎动物中枢神经系统的一部分，在椎管里面，上端连接延髓，两旁发出成对的神经

，分布到四肢、体壁和内脏。脊髓的内部有一个H形（蝴蝶型）灰质区
，主要由神经细胞构成
；在灰质区周围为白质区，主要由有髓神经纤维组成；脊髓是许多简单反射的中枢。脊髓两旁发出许多成对的神经（称为脊神经）分布到全身皮肤、肌肉和内脏器官
。脊髓是周围神经与脑之间的通路
，也是许多简单反射活动的低级中枢。按脊神经的出入可把脊髓也分为相应的31节
，31对脊神经就是由不同的脊椎发出的。神经胶质细胞，简称胶质细胞，是神经组织中除神经元以外的另一大类细胞
，也有突起，但无树突和轴突之分
，广泛分布于中枢和周围神经系统。在哺乳类动物中
，神经胶质细胞与神经元的细胞数量比例约为10：1。在中枢神经系统（CNS）中的神经胶质细胞主要有星形胶质细胞
、少突胶质细胞（与前者合称为大胶质细胞）和小胶质细胞等。传统认为胶质细胞属于结缔组织，其作用仅是连接和支持各种神经成分，其实神经胶质还起着分配营养物质、参与修复和吞噬的作用，在形态、化学特征和胚胎起源上都不同于普通结缔组织


。

方法简介
：

公司实验室分离的大鼠脊髓神经少突胶质采用胶原酶-联合消化法
、神经元专用培养基培养筛选结合化学试剂抑制法制备而来
，细胞总量约为5×105cells/瓶。

质量检测

公司实验室分离的大鼠脊髓神经少突胶质经GC（Galactocerebroside）免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1
、HBV、HCV、支原体
、细菌
、酵母和真菌等。

培养信息：

包被条件 PLL（0.1mg/ml）

培养基 含B-27 Supplement

、PDGF-AA、bFGF、Penicillin

、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 梭形
、多角形

传代特性 不增殖；不传代

消化液 0.25%

培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%

实验报告：

一
、分离与培养
：

1、无菌条件下

，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，将组织剪成1mm3左右大小；

2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min

，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置
；

3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液
，混悬10s

，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织被消化；

4
、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min
，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬

，接种于25cm2培养瓶
，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；

5、差速贴壁1h后
，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；二、免疫荧光鉴定：

1、待心房肌细胞生长至80%融合时
，弃去培养基
，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min；

2
、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3
、PBS冲洗细胞2次，每次10min
，然后在室温条件下
，用4% BSA封闭细胞30min；

4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；

5
、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；

6、用PBS冲洗3次

，每次10min
，在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照
。

公司正在出售的产品：

大鼠凋亡诱导因子(AIF)检测试剂盒 ，英文名： AIF ELISA Kit

Porcine orexin / orexin B (OX-B) ELISA Kit 猪食欲素/阿立新B(OX-B)检测试剂盒

大豆特定基因序列(Lectin)核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法) 48T

CLIAKitforLTB(HumanlymphotoxinBeta)ELISAKit人淋巴毒素β

体液组织蛋白酶L(CATHEPSINL)活性荧光定量检测试剂盒20次

ELISAKitHSP-20鸡热休克蛋白20

GFRA1重组狗 GFRA1 / GFR alpha-1 蛋白 Protein

NR2C/NMDAR2C(N-Methyl-d-Asprtate receptor 2C 0.5mgNR2C/NMDAR2C(N-Methyl-d-Asprtate receptor 2C) 谷受体2C(多肽)

CA3重组人 Carbonic Anhydrase III / CA3 蛋白 Protein

CCL27 Protein Human 重组人 CCL27 / CTACK 蛋白

GLIPR1 Protein Mouse 重组小鼠 GLIPR1 / RTVP1 蛋白

NR2C/NMDAR2C(N-Methyl-d-Asprtate receptor 2C 0.5mgNR2C/NMDAR2C(N-Methyl-d-Asprtate receptor 2C) 谷受体2C(多肽)

CCL27 Protein Human 重组人 CCL27 / CTACK 蛋白

GFRA1重组狗 GFRA1 / GFR alpha-1 蛋白 Protein

GLIPR1 Protein Mouse 重组小鼠 GLIPR1 / RTVP1 蛋白

CA3重组人 Carbonic Anhydrase III / CA3 蛋白 Protein

小鼠游离睾酮(F-TESTO)ELISA 试剂盒 96T/48T

Human Coxsackie virus IgM (Cox V-IgM) ELISA Kit 人柯萨奇病毒IgM(Cox V-IgM)检测试剂盒

HumanHirudinELISAKit 人水蛭素(Hirudin)检测试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitfor8-epi-PGF2Alpha(Rabbit8-epi-prostaglandinF2alpha)ELISAKit兔8-异构前列腺素

银染法细胞端粒酶活性AP电泳分析试剂盒10次

MouseMethemoglobin,MHBELISAKit小鼠高铁血红蛋白(MHB)检测试剂盒规格：96T/48T

大鼠脊髓神经少突胶质细胞血管内皮生长因子受体 1(VEGF-R3)   作用
：   ELISA   规格：   96T   美国 R&D

sVE-Cadherin   作用
：   ELISA   规格：   96T   奥地利 Bender

小鼠 ACTH(mouse ACTH)   作用：   ELISA   规格：   96T   美国 Phoenix

mouse Activin A   作用：   ELISA   规格：   96T

注意事项：

1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液
、浑浊等现象，若有上述现象发生请及时和老哥俱乐部联系
。

2. 仔细阅读细胞说明书
，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等，确保细胞培养条件一致，若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题
，责任由客户自行承担。

3. 用75%酒精擦拭细胞瓶表面
，显微镜下观察细胞状态。因运输问题，部分细胞由于温度变化及剧烈碰亡破碎形成碎片，是正常现象。观察好细胞状态后，75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置4-6h。

4. 贴壁细胞可以消化，悬浮细胞直接混匀收集细胞，900 rpm-1000 rpm离心3 min
，弃上清。加5 mL PBS重悬细胞，再900 rpm-1000 rpm离心3 min
，，用新鲜的*培养基重悬细胞，并接种到新的培养瓶或培养皿中，置于培养箱中进行培养
。

5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。

6. 建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片
，记录细胞状态，便于和我司技术部沟通交流。由于运输的原因，个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和老哥俱乐部联系，告知细胞的具体情况，以便老哥俱乐部的技术人员跟踪回访直至问题解决
。

7. 该细胞仅供科研使用。

8. 备注：运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞
，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的*培养基来培养细胞。收到细胞后次传代建议1
：2传代 。

9.注意： 1:2传代就是1个T25瓶传2个T25瓶或者2个6cm皿。不是1个T25瓶传2个10cm皿
。