產品僅供研究使用 ，不適用於人類或臨床診斷
商品屬性 ：

產品英文名稱 ：Human FGF21 protein

產品中文名稱 ：重組人成纖維細胞生長因子21（FGF21）

規格 ：5 μg/50 μg/500 μg

貨號 ：EY-01X8664
用途 ：僅供科研研究實驗

特點&優勢:

標簽:無標簽

表達宿主:大腸杆菌

種屬:人

序列:氨基酸序列來源於 ： 人源 FGF21(Q9NSA1)(His29-Ser209) 表達的蛋白片段 。

蛋白長度 ：重組人成纖維細胞生長因子21由181個氨基酸組成 ，在還原條件下的SDS-PAGE中 ，它的條帶與理論分子量一致 ，為19.4 kDa 。

純度:≥ 98 %  ，使用SDS-PAGE檢測

采用 LAL 法檢測 ，每 1 μg 蛋白質中的 EU 含量小於 1.0 。

產品形式:凍幹粉 ，凍幹緩衝液為無菌的 150mM NaCl 20mM Tris , pH 8.0動겸動

背景

成纖維細胞生長因子 21 (FGF21) 是屬於 FGF 家族的生長因子 。 這個家族的蛋白質具有廣泛的促有絲分裂和細胞存活活性: ，並參與各種生物過程 ，包括胚胎發育 、細胞生長 、形態發生 、組織修複 、腫瘤生長和侵襲 。 FGF 通過4個FGF受體家族成員發揮作用 。FGF 分子與 FGF 受體相互作用再通過肝素結合域與肝素結合 。 內分泌 FGF 缺乏肝素結合域 ，因此可以釋放到循環 。FGF21 通過 FGF21 受體之一起作用需要與共受體β-klotho相互作用 。

本產品具有下列特點:

 1.操作簡便 、快捷 。可直接加入到檢測平板 。在96-孔板中檢測時,無需洗滌或收獲細胞,免去溶解步驟 。

2. 無放射性 。不需要配製液閃混合物,也不需要處理廢棄物 。

3. 與MTT相比,使用更安全 。不需要使用揮發性的有機溶劑來溶解甲臢產物 。

4. 操作靈活,與MTT不同,平板讀數後可放回溫箱繼續孵育,使顏色進一步生成 。
公司正在出售的產品 ：

Bcl2樣蛋白11(BCL2L11)重組蛋白 Recombinant Bcl2 Like Protein 11 (BCL2L11)

CCL8 Protein Human 重組人 CCL8 / MCP-2 蛋白 (SUMO 標簽)

HPGD重組小鼠 HPGD / 15-PGDH 蛋白 Protein

IL6ST Protein Rat 重組大鼠 gp130 / IL6ST / CD130 蛋白

TMED1重組人 TMED1 蛋白 (Fc 標簽) Protein

小鼠乙型肝e抗體(HBeAb)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human soluble cluster of differeiation 38 (sCD38) ELISA Kit 人可溶性白細胞分化抗原38(sCD38)檢測試劑盒

HumanHelicobacterpyloriIgM,Hp-IgMELISAKit 人幽門螺旋杆菌IgM(Hp-IgM)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitfor5-(Human5-Nucleotidase)ELISAKit人5核苷酸酶

飲料阿斯巴塘(aspaame)含量薄層色譜法定性檢測試劑盒20次

MouseMacrophageInflammatoryProtein3α,MIP-3αELISAKit小鼠巨噬細胞性蛋白3α(MIP-3α/CCL20)檢測試劑盒規格 ：96T/48T

溴化乙錠   1g

EthidiumBromide(EB)   1ml(10mg/ml)

乙二醇   500ml

Ethyleneglycol

大鼠肺表麵活性物質相關蛋白D(SP-D)檢測試劑盒  ，英文名 ： SP-D ELISA Kit

Porcine keratinocyte growth factor (KGF) ELISA Kit 豬角化細胞生長因子(KGF)檢測試劑盒

轉基因植物cry1A基因核酸檢測試劑盒 48T

CLIAKitforMA/Melan-A(HumanMelanomaMarkerA)ELISAKit人黑色素瘤標記物

體液氧化應激活性氧(ROS)高質熒光測定試劑盒50次

ELISAKitPP裸鼠蛋酸酶

重組人成纖維細胞生長因子21（FGF21）CHODL重組小鼠 CHODL / Chondrolectin 蛋白 Protein

Smad同源物7(Smad7)重組蛋白 Recombinant Mothers Against Decapentaplegic Homolog 7 (Smad7)

CNPY2重組人 CNPY2 蛋白 Protein

CCL8 Protein Human 重組人 CCL8 / MCP-2 蛋白 (SUMO 標簽)

NOV Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 / 恒河猴 CCN3 / NOV 蛋白

操作步驟 ：

(一)獲得目的基因

1 、通過PCR方法:以含目的基因的克隆質粒為模板,按基因序列設計一對引物(在上遊和下遊引物分別引入不同的酶切位點),PCR循環獲得所需基因片段 。

2 、通過RT-PCR方法:用TRIzol法從細胞或組織中提取總RNA,以mRNA為模板,逆轉錄形成cDNA第一鏈,以逆轉錄產物為模板進行PCR循環獲得產物 。

(二)構建重組表達載體

1 、載體酶切:將表達質粒用限製性內切酶(同引物的酶切位點)進行雙酶切,酶切產物行瓊脂糖電泳後,用膠回收Kit或凍融法回收載體大片段 。

2 、PCR產物雙酶切後回收,在T4DNA連接酶作用下連接入載體 。

(三)  獲得含重組表達質粒的表達菌種

1 、 將連接產物轉化大腸杆菌DH5α,根據重組載體的標誌(抗Amp或藍白斑)作篩選,挑取單斑,堿裂解法小量抽提質粒,雙酶切初步鑒定 。

2 、 測序驗證目的基因的插入方向及閱讀框架均正確,進入下步操作 。否則應篩選更多克隆,重複亞克隆或亞克隆至不同酶切位點 。

3 、 以此重組質粒DNA轉化表達宿主菌的感受態細胞 。

(四)誘導表達

1 、挑取含重組質粒的菌體單斑至2ml LB(含Amp50μg/ml)中37℃過夜培養 。

2 、按1∶50比例稀釋過夜菌,一般將1ml菌加入到含50mlLB培養基的300ml培養瓶中, 37℃震蕩培養至OD600≌0.4-1.0(*0.6,大約需3hr) 。

3、取部分液體作為未誘導的對照組,餘下的加入IPTG誘導劑至終濃度0.4mM作為實驗組,兩組繼續37℃震蕩培養3hr 。

4、分別取菌體1ml, 離心12000g×30s收獲沉澱,用100μl 1%SDS重懸,混勻, 70℃10min 。

5 、離心12000g×1min,取上清作為樣品,可做SDS-PAGE等分析 。