產品僅供研究使用 ，不適用於人類或臨床診斷
商品屬性 ：

產品英文名稱 ：Terminal Deoxynucleotidyl Transferase (TdT)

產品中文名稱 ：末端脫氧核苷酸轉移酶（TdT）

規格 ：40 μg/100 μg

貨號 ：EY-01X8582
用途 ：僅供科研研究實驗

特點&優勢:

序列:氨基酸序列來源於 ：牛TdT（P06526）（Mer1-Ala509）的氨基酸序列 。

蛋白長度 ：重組牛TdT由509個氨基酸組成 ，在還原條件下的SDS-PAGE中 ，它的條帶與理論分子:量一致 ，為58.3 kDa 。

純度:> 90 %  ，使用SDS-PAGE檢測

產品形式:蛋白複溶液 ，複溶液為無菌水溶液50 mM K2HPO4, 100 mM NaCl, 1 mM DTT, 0.1% Tween20, 1% BSA, 50% Glycerol, pH 6.5.

基因ID:9913

存儲緩衝液無菌水溶液5動겸動

背景

 ，也稱為末端轉移酶 ，是在未成熟的 ，B淋巴樣細胞前提 ，T淋巴細胞前體和急性淋巴細胞白血病/淋巴瘤細胞中表達的一種特殊的DNA聚合酶 。 通常 ，TdT催化將核苷酸添加到DNA分子的3'末端。 與大多數DNA聚合酶不同 ，它不需要模板 。 該酶的優選底物是3'突出端 ，但它也可以將核苷酸添加到平末端或凹入的3'末端 。

本產品具有下列特點:

1.操作簡便 、快捷 。可直接加入到檢測平板 。在96-孔板中檢測時,無需洗滌或收獲細胞,免去溶解步驟 。

2. 無放射性 。不需要配製液閃混合物,也不需要處理廢棄物 。

3. 與MTT相比,使用更安全 。不需要使用揮發性的有機溶劑來溶解甲臢產物 。

4. 操作靈活,與MTT不同,平板讀數後可放回溫箱繼續孵育,使顏色進一步生成 。

操作步驟 ：

(一)獲得目的基因

1 、通過PCR方法:以含目的基因的克隆質粒為模板,按基因序列設計一對引物(在上遊和下遊引物分別引入不同的酶切位點),PCR循環獲得所需基因片段 。

2 、通過RT-PCR方法:用TRIzol法從細胞或組織中提取總RNA,以mRNA為模板,逆轉錄形成cDNA第一鏈,以逆轉錄產物為模板進行PCR循環獲得產物 。

(二)構建重組表達載體

1 、載體酶切:將表達質粒用限製性內切酶(同引物的酶切位點)進行雙酶切,酶切產物行瓊脂糖電泳後,用膠回收Kit或凍融法回收載體大片段 。

2 、PCR產物雙酶切後回收,在T4DNA連接酶作用下連接入載體 。

(三)  獲得含重組表達質粒的表達菌種

1 、 將連接產物轉化大腸杆菌DH5α,根據重組載體的標誌(抗Amp或藍白斑)作篩選,挑取單斑,堿裂解法小量抽提質粒,雙酶切初步鑒定 。

2 、 測序驗證目的基因的插入方向及閱讀框架均正確,進入下步操作 。否則應篩選更多克隆,重複亞克隆或亞克隆至不同酶切位點 。

3 、 以此重組質粒DNA轉化表達宿主菌的感受態細胞 。

(四)誘導表達

1 、挑取含重組質粒的菌體單斑至2ml LB(含Amp50μg/ml)中37℃過夜培養 。

2 、按1∶50比例稀釋過夜菌,一般將1ml菌加入到含50mlLB培養基的300ml培養瓶中, 37℃震蕩培養至OD600≌0.4-1.0(*0.6,大約需3hr) 。

3 、取部分液體作為未誘導的對照組,餘下的加入IPTG誘導劑至終濃度0.4mM作為實驗組,兩組繼續37℃震蕩培養3hr 。

4 、分別取菌體1ml, 離心12000g×30s收獲沉澱,用100μl 1%SDS重懸,混勻, 70℃10min 。

5 、離心12000g×1min,取上清作為樣品,可做SDS-PAGE等分析 。

公司正在出售的產品 ：

Amylin 糖尿病相關肽(胰島澱粉樣肽 0.5mgAmylin 糖尿病相關肽(胰島澱粉樣肽)

CD22 Protein Human 重組人 Siglec-2 / CD22 蛋白

KIT重組小鼠 c-kit / CD117 蛋白 Protein

IL1RN Protein Rat 重組大鼠 IL-1RA / IL1RN 蛋白 (Fc 標簽)

IL36G重組人 IL36G / IL1F9 蛋白 (aa 18-169) Protein

小鼠氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)檢測試劑盒 96T/48T

Eighth factors in rats with associated aigen (F VIII Ag) ELISA Kit 大鼠第八因子相關抗原(FⅧAg)檢測試劑盒

Humanargininevasopressin,AVPELISAKit 人精加壓素(AVP)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitfor1,5-AG(Human1,5-anhydroglucitol)ELISAKit人1,5-脫水葡萄糖醇/1,5-脫水山梨

飲料三氯蔗糖(sucralose)含量高效液相色譜法定量檢測試劑盒20次

MouseLactateDehydrogenase,LDHELISAKit小鼠乳酸脫氫酶(LDH)檢測試劑盒規格 ：96T/48T

小鼠轉化生長因子β1(TGF-β1)檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

小鼠轉化生長因子α(TGF-α)檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

小鼠主要組織相容性複合體Ⅲ類(MHC-Ⅲ/H-2Ⅲ)檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

小鼠主要組織相容性複合體Ⅱ類(MHC-Ⅱ/H-2Ⅱ檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

大鼠第八因子相關抗原(FⅧAg)檢測試劑盒  ，英文名 ： FⅧAg ELISA Kit

Porcine hyaluronic acid (HA) ELISA Kit 豬透明質酸(HA)檢測試劑盒

馬鈴薯特定基因序列(PATA)核酸檢測試劑盒 48T

CLIAKitforLSP(Humanliverspecificlipoprotein)ELISAKit人抗肝特異性脂蛋白抗體

通用AP酶聯檢測封閉溶液100毫升

ELISAKitIgY雞卵黃免疫球蛋白

末端脫氧核苷酸轉移酶（TdT）KIT重組小鼠 c-kit / CD117 蛋白 Protein

Amylin 糖尿病相關肽(胰島澱粉樣肽 0.5mgAmylin 糖尿病相關肽(胰島澱粉樣肽)

IL36G重組人 IL36G / IL1F9 蛋白 (aa 18-169) Protein

CD22 Protein Human 重組人 Siglec-2 / CD22 蛋白

IL1RN Protein Rat 重組大鼠 IL-1RA / IL1RN 蛋白 (Fc 標簽)