老哥俱乐部

产品仅供研究使用，不适用于人类或临床诊断
商品属性：

产品英文名称：SuperKine•  Enhanced Antifade Mounting Medium with DAPI

产品中文名称：SuperKine•  增强型抗荧光淬灭剂含DAPI

规格：10 mL/50 mL

货号：EY-01X8577
用途：仅供科研研究实验

特点&优势:

•  抗荧光淬灭效果强：封片后避光保存2周以上
，仍可维持原有发光强度；

•  兼容性好：精心优化的配方可兼容多种荧光染料 
；

•  操作便捷
：即用型，无需配置。

保存建议:-20℃，避光保存12个月。

运输条件:蓝冰运输

背景

因光照
、pH值及温度等环境影响或者荧光分子和其它分子相互作用等因素，造成荧光分子的不可逆破坏。使用荧光显微镜和激光共聚焦显微镜观察时
，可见信号减弱
。SuperKine• 增强型抗荧光淬灭剂（含DAPI）用于对荧光组织和细胞样品的封片。

本产品具有下列特点:

 1.操作简便、快捷。可直接加入到检测平板。在96-孔板中检测时,无需洗涤或收获细胞,免去溶解步骤。

2. 无放射性。不需要配制液闪混合物,也不需要处理废弃物。

3. 与MTT相比,使用更安全

。不需要使用挥发性的有机溶剂来溶解甲臜产物
。

4. 操作灵活,与MTT不同,平板读数后可放回温箱继续孵育,使颜色进一步生成。
公司正在出售的产品：

Alpha-HCG(Human chorionic gonadotropin Alpha 0.5mgAlpha-HCG(Human chorionic gonadotropin Alpha ) 人α亚基人绒毛膜多肽抗原

BID Protein Human 重组人 BID 蛋白

VCAM1重组小鼠 VCAM1 / L1CAM / CD106 蛋白 (His 标签) Protein

JAM2 Protein Rat 重组大鼠 JAM-2 / JAM-B 蛋白

NRG1重组人 NRG1-beta 1 蛋白 (ECD, Fc 标签) Protein

猪心肌肌钙蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)ELISA 试剂盒

Human maix metalloproteinase 11 (MMP11) ELISA Kit 人基质金属蛋白酶11(MMP11)检测试剂盒

RabbitOncostatin-M,OSMELISAKit 兔抑瘤素M(OSM)检测试剂盒 进口分装

CLIAKitforAi-GAD谷脱羧酶抗体(间接法二步法)

血液N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)活性比色法定量检测试剂盒20次

PorcineHeatShockProtein90,HSP-90ELISAKit猪热休克蛋白90(HSP-90)检测试剂盒

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猪血清(NO)检测试剂盒     试剂盒   组装/原装

猪血清淀粉样蛋白A（SAA）检测试剂盒     试剂盒   组装/原装

猪血管性血友病因子/瑞斯托辅因子(VWF)检测试剂盒     试剂盒   组装/原装

大鼠阿立新A(Orexin A)检测试剂盒

，英文名

： Orexin A ELISA Kit

Rabbit macrophage inflammatory protein 5 (MIP-5) ELISA Kit 兔子巨噬细胞性蛋白5(MIP-5)检测试剂盒

ELISA 小鼠粘蛋白(mouse MUC5AC)  进口分装

CLIAKitforIL-1sRII(Humansolubleierleukin-1receptorII)ELISAkit人白介素1可溶性受体Ⅱ

通用型空肠弯曲菌(Campylobacterjejuni)试剂盒20次

ELISAKitTXB2大鼠血栓素B2

SuperKine•  增强型抗荧光淬灭剂含DAPIVCAM1重组小鼠 VCAM1 / L1CAM / CD106 蛋白 (His 标签) Protein

Alpha-HCG(Human chorionic gonadotropin Alpha 0.5mgAlpha-HCG(Human chorionic gonadotropin Alpha ) 人α亚基人绒毛膜多肽抗原

NRG1重组人 NRG1-beta 1 蛋白 (ECD, Fc 标签) Protein

BID Protein Human 重组人 BID 蛋白

JAM2 Protein Rat 重组大鼠 JAM-2 / JAM-B 蛋白

操作步骤：

(一)获得目的基因

1
、通过PCR方法:以含目的基因的克隆质粒为模板,按基因序列设计一对引物(在上游和下游引物分别引入不同的酶切位点),PCR循环获得所需基因片段
。

2、通过RT-PCR方法:用TRIzol法从细胞或组织中提取总RNA,以mRNA为模板,逆转录形成cDNA第一链,以逆转录产物为模板进行PCR循环获得产物。

(二)构建重组表达载体

1、载体酶切:将表达质粒用限制性内切酶(同引物的酶切位点)进行双酶切,酶切产物行琼脂糖电泳后,用胶回收Kit或冻融法回收载体大片段。

2、PCR产物双酶切后回收,在T4DNA连接酶作用下连接入载体。

(三)  获得含重组表达质粒的表达菌种

1、 将连接产物转化大肠杆菌DH5α,根据重组载体的标志(抗Amp或蓝白斑)作筛选,挑取单斑,碱裂解法小量抽提质粒,双酶切初步鉴定。

2、 测序验证目的基因的插入方向及阅读框架均正确,进入下步操作
。否则应筛选更多克隆,重复亚克隆或亚克隆至不同酶切位点
。

3、 以此重组质粒DNA转化表达宿主菌的感受态细胞。

(四)诱导表达

1、挑取含重组质粒的菌体单斑至2ml LB(含Amp50μg/ml)中37℃过夜培养。

2、按1∶50比例稀释过夜菌,一般将1ml菌加入到含50mlLB培养基的300ml培养瓶中, 37℃震荡培养至OD600≌0.4-1.0(*0.6,大约需3hr)。

3、取部分液体作为未诱导的对照组,余下的加入IPTG诱导剂至终浓度0.4mM作为实验组,两组继续37℃震荡培养3hr
。

4、分别取菌体1ml, 离心12000g×30s收获沉淀,用100μl 1%SDS重悬,混匀, 70℃10min
。

5、离心12000g×1min,取上清作为样品,可做SDS-PAGE等分析。