老哥俱乐部

产品仅供研究使用
，不适用于人类或临床诊断
商品属性：

产品英文名称
：AbFluor•  555-Phalloidin

产品中文名称

：AbFluor•  555-鬼笔环肽

规格
：500 T

货号

：EY-01X8574
用途：仅供科研研究实验

特点&优势:

•  优化的实验方案，特别适用于甲醛固定与透化处理的组织切片、细胞培养物或无细胞实验中的F-actins标记
，鉴定以及定量需求
。

•  的AbFluor•  555-鬼笔环肽 (橙色荧光) (Ex/Em = 555/565 nm)

，特异性地结合F-actins，且兼具比其它荧光素-鬼笔环肽偶联物更强的光稳定性。

产品形式冻干粉产品

使用中注意事项鬼笔环肽为有毒物质
，请小心处理。

保存建议:-20℃，避光保存12个月。

运输条件:蓝冰运输

背景

鬼笔环肽（phalloidin）
，是从一种剧毒磨菇(Amanita phalloides)中分离出来的一种多肽物质，属于毒伞肽类毒素
，是一种强烈毒素
。它是一种特异性结合F-肌动蛋白的双环肽，因此，使用荧光染料偶联的鬼笔环肽可以非常方便地研究F-actins的分布。在鬼笔环肽内部，半和之间存在不寻常的硫醚桥，可形成内环结构。当pH升高时
，硫醚被裂解
，鬼笔环肽丧失对肌动蛋白的亲和力
。

本产品具有下列特点:

 1.操作简便、快捷
。可直接加入到检测平板。在96-孔板中检测时,无需洗涤或收获细胞,免去溶解步骤
。

2. 无放射性。不需要配制液闪混合物,也不需要处理废弃物。

3. 与MTT相比,使用更安全。不需要使用挥发性的有机溶剂来溶解甲臜产物
。

4. 操作灵活,与MTT不同,平板读数后可放回温箱继续孵育,使颜色进一步生成。
公司正在出售的产品
：

Akt/PKC(Protein Kinase C,PKC 0.5mgAkt/PKC(Protein Kinase C,PKC) 蛋白激酶C(多肽抗原)

CD46 Protein Human 重组人 CD46 蛋白

FCGR3重组小鼠 CD16 / FCGR3 蛋白 Protein

CD79B Protein Rat 重组大鼠 CD79B / B29 蛋白 (Fc 标签)

CD1B重组人 CD1B / CD1A 蛋白 (Fc 标签) Protein

小鼠血管内皮细胞生长因子C(VEGF-C)ELISA 试剂盒 96T/48T

Human kaliuretic peptide (KP) ELISA Kit 人利尿肽(KP)检测试剂盒

HumanAcrineOrange,AOELISAKit 人橙(AO)检测试剂盒 96T/48T 进口分装

bullfroggrowthhormone,GH检测试剂盒牛蛙生长激素(GH)检测试剂盒规格
：96T/48T

鱼类受精卵细胞冻存试剂盒(超低温)50次

MouseInsulin-likegrowthfactor1,IGF-1ELISAKit小鼠胰岛素样生长因子1(IGF-1)检测试剂盒规格
：96T/48T

小鼠氧化型高密度脂蛋白(ox-HDL）检测试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

小鼠氧化型低密度脂蛋白（ox-LDL）检测试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

小鼠氧化低密度脂蛋白抗体(OLAb)检测试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

小鼠氧化低密度脂蛋白(OxLDL)检测试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

大鼠血管非性蛋白1(VNN1)检测试剂盒 
，英文名
： VNN1 ELISA Kit

Plas of 25 hydroxy vitamin D3 (25 (OH) ELISA kit D3/25 HVD3) ELISA kit E 植物25羟基3(25(OH)检测试剂盒D3/25 HVD3)检测试剂盒E

MousePlateletFactor4,PF-4ELISAKit 小鼠血小板因子4(PF-4/CXCL4)检测试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitforHumanapelin12,AP12ELISAKit人apelin12

细胞ERK1激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)20次

ELISAKitMCP-2/CCL8大鼠单核细胞趋化蛋白2

AbFluor•  555-鬼笔环肽IgG3重组小鼠 IgG3-Fc 蛋白 Protein

表面活性物质关联蛋白J(SPJ)重组蛋白 Recombinant Surfactant Associated Protein J (SPJ)

CARHSP1重组人 CARHSP1 蛋白 Protein

CD46 Protein Human 重组人 CD46 蛋白

EDAR Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 EDAR 蛋白

操作步骤：

(一)获得目的基因

1、通过PCR方法:以含目的基因的克隆质粒为模板,按基因序列设计一对引物(在上游和下游引物分别引入不同的酶切位点),PCR循环获得所需基因片段。

2
、通过RT-PCR方法:用TRIzol法从细胞或组织中提取总RNA,以mRNA为模板,逆转录形成cDNA第一链,以逆转录产物为模板进行PCR循环获得产物。

(二)构建重组表达载体

1、载体酶切:将表达质粒用限制性内切酶(同引物的酶切位点)进行双酶切,酶切产物行琼脂糖电泳后,用胶回收Kit或冻融法回收载体大片段。

2
、PCR产物双酶切后回收,在T4DNA连接酶作用下连接入载体。

(三)  获得含重组表达质粒的表达菌种

1
、 将连接产物转化大肠杆菌DH5α,根据重组载体的标志(抗Amp或蓝白斑)作筛选,挑取单斑,碱裂解法小量抽提质粒,双酶切初步鉴定。

2、 测序验证目的基因的插入方向及阅读框架均正确,进入下步操作
。否则应筛选更多克隆,重复亚克隆或亚克隆至不同酶切位点
。

3
、 以此重组质粒DNA转化表达宿主菌的感受态细胞。

(四)诱导表达

1、挑取含重组质粒的菌体单斑至2ml LB(含Amp50μg/ml)中37℃过夜培养。

2、按1∶50比例稀释过夜菌,一般将1ml菌加入到含50mlLB培养基的300ml培养瓶中, 37℃震荡培养至OD600≌0.4-1.0(*0.6,大约需3hr)。

3
、取部分液体作为未诱导的对照组,余下的加入IPTG诱导剂至终浓度0.4mM作为实验组,两组继续37℃震荡培养3hr。

4
、分别取菌体1ml, 离心12000g×30s收获沉淀,用100μl 1%SDS重悬,混匀, 70℃10min。

5
、离心12000g×1min,取上清作为样品,可做SDS-PAGE等分析。