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細胞膜染色試劑盒(橘紅色熒光)

產品名稱 :細胞膜染色試劑盒(橘紅色熒光)

產品特點 :細胞膜染色試劑盒(橘紅色熒光)的相關產品 :DAPK1(Death associated protein kinase 1 0.5mgDAPK1(Death associated protein kinase 1) 凋亡相關蛋白激酶1抗原
INSR Protein Human 重組人 Insulin Receptor / INSR / CD220 蛋白 (His & GST 標簽)

產品型號 :

更新日期 :2024-11-19

訪問次數 :83

細胞膜染色試劑盒(橘紅色熒光)的詳細資料 :

產品僅供研究使用 ,不適用於人類或臨床診斷
商品屬性 :

英文名稱

Cell Plasma   Membrane Staining Kit (Orange Fluorescence)

貨號

EY-01X8556

規格

100 T/500 T/2000 T

 

特點&優勢:

  能夠在多種哺乳動物細胞類型中均勻染色細胞膜 ,不論是活細胞和固定細胞 ,懸浮細胞或貼壁細胞 。

  針試劑盒針對各種熒光分析平台進行了優化 ,具有廣泛的適用性 ,如熒光微孔板分析 ,流式細胞儀和熒光顯微鏡等 。

  CPM Orange  (Ex/Em = 549/569 nm)-在膜內快速擴散 ,在用甲醛固定後也能保持染色 ,適用於熒光多標實驗 。

保存建議:請參閱說明書中各個組分的存儲條件 。自發貨之日起 ,在推薦溫度下至少穩定6個月 。

運輸條件:藍冰運輸

背景

細胞膜(質膜)是一種薄的半透膜 ,由含有嵌入蛋白質的脂質雙層組成 ,將所有細胞的內部與環境隔開 。細胞膜的基本功能是保護細胞免受周圍環境的影響 。細胞膜控製物質進出細胞和細胞器的運動 。這樣 ,它可選擇性地滲透離子和有機分子 。細胞膜參與多種細胞過程 ,如細胞粘附 、離子傳導和細胞信號傳導 ,並作為幾種細胞外結構的附著表麵,包括細胞壁 、糖萼和細胞內骨架 。

細胞膜染色試劑盒(橘紅色熒光)

本產品具有下列特點:

 1.操作簡便 、快捷 。可直接加入到檢測平板 。在96-孔板中檢測時,無需洗滌或收獲細胞,免去溶解步驟 。

2. 無放射性。不需要配製液閃混合物,也不需要處理廢棄物 。

3. 與MTT相比,使用更安全 。不需要使用揮發性的有機溶劑來溶解甲臢產物。

4. 操作靈活,與MTT不同,平板讀數後可放回溫箱繼續孵育,使顏色進一步生成 。
公司正在出售的產品 :

Adenylate Kinase 1 (AK-1 0.5mgAdenylate Kinase 1 (AK-1) 腺苷酸激酶-1

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細胞膜染色試劑盒(橘紅色熒光)FCGR4重組小鼠 CD16-2 / FCGR4 蛋白 (His & AVI 標簽) Protein

Adenylate Kinase 1 (AK-1 0.5mgAdenylate Kinase 1 (AK-1) 腺苷酸激酶-1

FAM19A2重組人 FAM19A2 蛋白  Protein

FCGR3A Protein Human 重組人 CD16a / FCGR3A 蛋白 (176 Val, His & AVI 標簽), Biotinylated

CLEC1A Protein Rat 重組大鼠 CLEC1A / CLEC-1 蛋白

操作步驟 :

(一)獲得目的基因

1 、通過PCR方法:以含目的基因的克隆質粒為模板,按基因序列設計一對引物(在上遊和下遊引物分別引入不同的酶切位點),PCR循環獲得所需基因片段 。

2 、通過RT-PCR方法:用TRIzol法從細胞或組織中提取總RNA,以mRNA為模板,逆轉錄形成cDNA第一鏈,以逆轉錄產物為模板進行PCR循環獲得產物 。

(二)構建重組表達載體

1 、載體酶切:將表達質粒用限製性內切酶(同引物的酶切位點)進行雙酶切,酶切產物行瓊脂糖電泳後,用膠回收Kit或凍融法回收載體大片段 。

2 、PCR產物雙酶切後回收,在T4DNA連接酶作用下連接入載體 。

(三)  獲得含重組表達質粒的表達菌種

1 、 將連接產物轉化大腸杆菌DH5α,根據重組載體的標誌(抗Amp或藍白斑)作篩選,挑取單斑,堿裂解法小量抽提質粒,雙酶切初步鑒定 。

2 、 測序驗證目的基因的插入方向及閱讀框架均正確,進入下步操作 。否則應篩選更多克隆,重複亞克隆或亞克隆至不同酶切位點 。

3 、 以此重組質粒DNA轉化表達宿主菌的感受態細胞 。

(四)誘導表達

1 、挑取含重組質粒的菌體單斑至2ml LB(含Amp50μg/ml)中37℃過夜培養 。

2 、按1∶50比例稀釋過夜菌,一般將1ml菌加入到含50mlLB培養基的300ml培養瓶中, 37℃震蕩培養至OD600≌0.4-1.0(*0.6,大約需3hr) 。

3 、取部分液體作為未誘導的對照組,餘下的加入IPTG誘導劑至終濃度0.4mM作為實驗組,兩組繼續37℃震蕩培養3hr 。

4 、分別取菌體1ml, 離心12000g×30s收獲沉澱,用100μl 1%SDS重懸,混勻, 70℃10min 。

5 、離心12000g×1min,取上清作為樣品,可做SDS-PAGE等分析 。


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