老哥俱乐部

培养操作步骤 ：
1．用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出
，用无菌丝绸布擦拭干净

，不要用纱布
； 
2．将盖玻片轻轻放入6孔培养板（每孔一片）或培养皿中（每个平皿可放置2-3片）

； 
3．在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时； 
4．将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中，使盖玻片*浸在培养液中； 
5．将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时，将培养板取出
，用盖片镊轻轻取出盖玻片
，用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测

。 

下列是产品的订购信息：

细胞培养的优点：
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中，根据要求可始终保持细胞活力
，并可长时间监控
、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况，包括活细胞的形态
、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳
、张力等物理化学的条件

，可以根据实际需要进行人为的控制
，同时，可以施加化学
、物理

、生物等因素作为条件而进行实验观察
，这些因素同样可以处于严格控制之下
。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后，所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞
，需要时
，可采用克隆化等方法使细胞达到纯化
。
4.研究内容便于观察
、检测和记录
采用各种研究技术：如倒置生物显微镜
、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术
、激光共焦显微镜
、免疫组织化学、原位杂交
、同位素标记等各种仪器设备。
​
实验要点及说明
：
1．本方法适用于贴壁细胞培养
，而不适用于悬浮细胞培养
，悬浮细胞可使用滴片法； 
2．所使用的盖玻片应该为优质玻璃

，并经过铬酸洗液处理； 
3．盖玻片非常薄，易碎，取放盖玻片时动作要轻； 
4．如果需要更多生长状态一致的细胞，可以使用较大的培养皿，但不宜过大，以避免培养液的浪费和增加污染机率； 
5．如果细胞贴壁生长能力较差，可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。

细胞培养方法
：
1、细胞传代
：细胞密度达到80-90%时即可传代
①弃去培养上清
，用PBS或生理盐水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆盖整个瓶或皿，盖好放入培养箱消化
；
③1-2min后
，显微镜下观察细胞
，若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入*培养基终止消化；若细胞还是贴壁
，放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止；
④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清；
⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中，T25培养瓶加6-8ml培养基；
⑥悬浮细胞直接离心收集，细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中
。
2、细胞复苏
：
①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化
，时间1min左右，加入4-5ml培养基混匀
。
②在1000RPM左右条件下离心4min，弃上清,加1-2ml培养基吹匀，将细胞悬液加入培养瓶中，补加适量培养基
。
3

、细胞冻存：待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种
①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后
，显微镜下观察细胞，大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入*培养基终止消化

；
③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min
，弃上清，加1ml冻存液重悬细胞；
④将冻存管放入程序降温盒，放入-80℃冰箱，4小时后将冻存管转入液氮罐储存。

素 CAS 63968-64-9 规格
：100mg 订购|咨询

;纯品型;标准品;有证书 CAS 98-92-0 规格：0.25g 订购|咨询

丹参新 CAS 27210-57-7 规格
：10mg 订购|咨询

D-核糖 CAS  规格：10mg 订购|咨询

药根碱 CAS 960383-96-4 规格：HPLC≥98%,20mg/支 订购|咨询

锈胺;纯品型;标准品;有证书 CAS 55814-41-0 规格

：0.1g 订购|咨询

文多灵 CAS 2182-14-1 规格
：HPLC≥98%
，20mg/vial 订购|咨询

辽东楤木皂苷Ⅴ CAS  规格：20mg 订购|咨询

对照品 CAS  规格：1g 订购|咨询

开环异落叶松树脂酚 CAS 29388-59-8 规格：HPLC≥98%;20mg 订购|咨询

没食子酸 CAS 149-91-7 规格：HPLC≥98%，20mg/vial 订购|咨询

SK-HEP-1细胞，人肝癌细胞规格白细胞介素4诱导蛋白1抗体 英文名称：IL-4I1 0.1ml

分化相关基因2蛋白/立即早期反应蛋白抗体 英文名称
：IEX1 0.2ml

细胞间粘附分子4抗体 英文名称：ICAM4 0.2ml

整联蛋白重复蛋白3抗体 英文名称

：ITFG3 0.2ml

胰岛素样生长因子ⅡmRNA结合蛋白1抗体 英文名称
：IGF2BP1 0.2ml

磷酸化整合素β4抗体 英文名称：phospho-ITGB4(Tyr1530) 0.1ml

胰岛素样生长因子ⅡmRNA结合蛋白2抗体 英文名称：IGF2BP2 0.2ml

胰岛素样生长因子结合蛋白1抗体 英文名称
：IGFBP1 0.1ml

胰岛素样生长因子结合蛋白4抗体 英文名称：IGFBP4/IBP4 0.1ml

整合素α7抗体 英文名称：ITGA7 0.1ml

白介素7抗体 英文名称
：IL-7 0.1ml