老哥俱乐部

产品名称
：细胞分裂周期相关基因8ELIS检测试剂盒
英文名称
：cell division cycle associated 8
产品货号
：EY-E97481
产品规格：48T/96T
产品保存：2-8℃，有效期6个月
主要组成成分
：试剂 
    性状：液体 
    产品规格：96T/48T 
    96T指可以做94个标本
，2个标准对照 
    48T指可以做47个标本，1个标准对照 
    96T-84个样本 
    48T-42个样本 
    待检样本
：体液

，血清
，血浆
，细胞培养上清液，尿液，组织匀浆,心房水标本等等。 

样品收集、处理及保存方法
1）血清-----操作过程中避免任何细胞刺激
。使用不含热原和内毒素的试管
。收集血液后，1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2）血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测

。1000×g离心30分钟去除颗粒。
3）细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4）组织匀浆-----将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟
，取上清液
5）保存------如果样品不立即使用
，应将其分成小部分-70 ℃保存，避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒，检测前先离心或过滤
。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻

。
注意事项
1）试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存
。
2）实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。
3）不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
4）使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。
5）使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
6）洗涤酶标板时应充分拍干
，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水
。
7）底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值
。
8）加入试剂的顺序应一致
，以保证所有反应板孔温育的时间一样。
9）按照说明书中标明的时间
、加液的量及顺序进行温育操作。

Methyl Stearate 硬脂酸甲酯 112-61-8  50mg

Glass beads acid-Washed 玻璃珠 10g  瓶

多用离心管架0.2ml-1.5ml-15ml-50ml 32-32-12-4  个

Artemether 蒿甲 71963-77-4  20mg

Stachyose 水苏糖 54261-98-2  20mg

PVDF膜(0.45um) 30cm×3m  卷

2,5-Dihydroxybenzoic acid 龙胆酸 490-79-9  20mg

Chloroquine diphosphate 磷酸喹 25g  瓶

靛基质试剂 10ml  瓶

PVDF膜(0.45um 13.25cm×15cm 13.25×15cm  张

Indirubin 479-41-4  20mg

Ampicillin Trihydrate 三水合物 7177-48-2  200mg

细胞分裂周期相关基因8ELIS检测试剂盒自噬微管相关蛋白轻链3抗原MAP1LC3A(microtubule-associated protein 1 light chain 3) 0.5mg

肺癌肿瘤阻抑基因1抗原TSLC1 (tumor suppressor in lung cancer-1) 0.5mg

甲状腺核转录因子-1抗原TTF-1 (Thyroid Transcription Factor-1) 0.5mg

微管蛋白-γ抗原Tubulin- Gamma 0.5mg

TWIST蛋白抗原TWIST protein peptide 0.5mg

新型血管活性因子UCN抗原(小鼠、大鼠)UCN(Urocortin)mouse ret 0.5mg

β10抗原T Beta10 peptide 0.5ml

上游刺激因子1抗原USF-1(upstream stimulatory factor 1) 0.5mg

泛素蛋白Ubiquitin 0.5mg

兔抗血管抑制蛋白1抗原VASH1(Vasohibin 1) 0.5mg

血管内皮细胞粘附分子抗原VCAM-1/CD106(Vascular cell adhesion molecule 1 isoform b precusor; CD106 antigen) 0.5mg

ELISA 试验时，注意事项如下： 
     1. 正式试验时

，应分别以阳性对照与阴性对照控制试验条件，待检样品应作一式二份，以保证实验结果的准确性。有时本底较高
，说明有非特异性反应，可采用羊血清
、兔血清或BSA等封闭。 
     2. 在ELISA中

，进行各项实验条件的选择是很重要的，其中包括: 
     （1） 固相载体的选择：许多物质可作为固相载体，如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纤维素等。其形式可以是凹孔平板、试管、珠粒等
。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何种载体
，在使用前均可进行筛选：用等量抗原包被，在同一实验条件下进行反应
，观察其显色反应是否均一性，据此判明其吸附性能是否良好。 
     （2） 包被抗体（或抗原）的选择
：将抗体（或抗原）吸附在固相载体表面时，要求纯度要好,吸附时一般要求PH在9.0～9.6之间。吸附温度
，时间及其蛋白量也有一定影响,一般多采用4℃18～24小时
。蛋白质包被的zui适浓度需进行滴定
：即用不同的蛋白质浓度（0.1、1.0和10μg／ml等）进行包被后，在其它试验条件相同时
，观察阳性标本的OD值。选择OD值zui大而蛋白量zui少的浓度。对于多数蛋白质来说通常为1～10μg／ml。 
     （3） 酶标记抗体工作浓度的选择：首先用直接ELISA法进行初步效价的滴定（见酶标记抗体部份）
。然后再固定其它条件或采取“方阵法”（包被物、待检样品的参考品及酶标记抗体分别为不同的稀释度）在正式实验系统里准确地滴定其工作浓度。 
     （4） 酶的底物及供氢体的选择：对供氢体的选择要求是价廉
、安全
、有明显地显色反应
，而本身无色
。有些供氢体（如OPD等）有潜在的致癌作用
，应注意防护。有条件者应使用不致癌、灵敏度高的供氢体，如TMB和ABTS是目前较为满意的供氢体。底物作用一段时间后，应加入强酸或强碱以终止反应。通常底物作用时间，以10-30分钟为宜。底物使用液必须新鲜配制，尤其是H2O2在临用前加入 。