老哥俱乐部

下列是产品的订购信息：

细胞培养的优点：
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中
，根据要求可始终保持细胞活力，并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况，包括活细胞的形态、结构
、生命活动等
。
2.研究条件可以人为控制
pH
、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件，可以根据实际需要进行人为的控制
，同时，可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察，这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后，所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞，需要时，可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术：如倒置生物显微镜
、荧光显微镜

、电子显微镜
、流式细胞术、激光共焦显微镜
、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备
。
​
培养操作步骤 ：
1．用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出，用无菌丝绸布擦拭干净，不要用纱布； 
2．将盖玻片轻轻放入6孔培养板（每孔一片）或培养皿中（每个平皿可放置2-3片）； 
3．在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时
； 
4．将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中，使盖玻片*浸在培养液中
； 
5．将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时，将培养板取出，用盖片镊轻轻取出盖玻片，用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测
。 
实验要点及说明：
1．本方法适用于贴壁细胞培养，而不适用于悬浮细胞培养，悬浮细胞可使用滴片法； 
2．所使用的盖玻片应该为优质玻璃
，并经过铬酸洗液处理； 
3．盖玻片非常薄
，易碎，取放盖玻片时动作要轻； 
4．如果需要更多生长状态一致的细胞

，可以使用较大的培养皿，但不宜过大
，以避免培养液的浪费和增加污染机率
； 
5．如果细胞贴壁生长能力较差
，可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干
。

96孔PCR硅胶封板膜 10个/包  包

Estrone 雌酚酮 53-16-7  20mg

Weigert苏木素染色液 2×500ml  瓶

Clobetasol propionate 丙酸倍他索 1g  瓶

Rifampicin 250mg  支

DM130大孔吸附树脂 500g  瓶

Umbelliferone 7-羟基豆素 93-35-6  20mg

Gum tragacanth powder 黄蓍树胶粉 100g  瓶

0.4%吕氏碱性美蓝染色液 100ml  瓶

Urea 尿素 500g  瓶

PhosphoMycin disodiuM salt 钠 5g  瓶

Magnesium chloride, hexahydrate 化镁六水 100g  瓶

COS-6细胞

，非洲绿猴肾细胞说明书包含氧化还原酶的WW域抗原WWOX (WW domain-containing oxidoreductase) 0.5mg

X-连锁凋亡蛋白/性连锁凋亡抑制蛋白抗原XIAP(X-linked Inhibitor of Apoptosis Protein) 0.5mg

XIAP相关因子1凋亡抑制蛋白抗原XAF1(XIAP-associated factor 1) 0.5ml

X射线修复交叉互补蛋白/细胞碱基切除修复基因抗原XRCC1(X-ray Repair Cross Complementing 1) 0.5mg

胞质紧密粘连蛋白1抗原ZO-1 peptide 0.5mg

血管紧张素Ⅱ受体(抗原)Angiotensin II receptor(Ang II ) 0.5mg

ARC(多肽抗原)Ag-ARC(ARG3.1/ARC, Activity-regulated cytoskeleton-associated protein) 0.5mg

蛋白激酶C（多肽抗原）Akt/PKC(Protein Kinase C,PKC) 0.5mg

肾上腺素能受体β1(抗原)Beta1-adrenergic receptor 0.5mg

膜粘连蛋白-5(抗原)Annexin V 0.5mg

水通道蛋白-4（抗原）AQP4(aquaporin Protein-4) 0.5mg

细胞培养方法

：
1
、细胞传代：细胞密度达到80-90%时即可传代
①弃去培养上清
，用PBS或生理盐水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆盖整个瓶或皿，盖好放入培养箱消化
；
③1-2min后，显微镜下观察细胞，若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落
，轻轻吹打下确认消化情况后加入*培养基终止消化；若细胞还是贴壁，放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止；
④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清；
⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中
，T25培养瓶加6-8ml培养基；
⑥悬浮细胞直接离心收集，细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。
2
、细胞复苏：
①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化，时间1min左右，加入4-5ml培养基混匀。
②在1000RPM左右条件下离心4min
，弃上清,加1-2ml培养基吹匀
，将细胞悬液加入培养瓶中，补加适量培养基
。
3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种
①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次
，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，显微镜下观察细胞，大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入*培养基终止消化；
③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清，加1ml冻存液重悬细胞；
④将冻存管放入程序降温盒，放入-80℃冰箱
，4小时后将冻存管转入液氮罐储存
。