老哥俱乐部

ELISA 试验时
，注意事项如下
： 
     1. 正式试验时，应分别以阳性对照与阴性对照控制试验条件
，待检样品应作一式二份，以保证实验结果的准确性。有时本底较高，说明有非特异性反应，可采用羊血清、兔血清或BSA等封闭。 
     2. 在ELISA中，进行各项实验条件的选择是很重要的
，其中包括: 
     （1） 固相载体的选择
：许多物质可作为固相载体

，如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纤维素等。其形式可以是凹孔平板、试管
、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何种载体，在使用前均可进行筛选
：用等量抗原包被，在同一实验条件下进行反应，观察其显色反应是否均一性，据此判明其吸附性能是否良好
。 
     （2） 包被抗体（或抗原）的选择
：将抗体（或抗原）吸附在固相载体表面时，要求纯度要好,吸附时一般要求PH在9.0～9.6之间
。吸附温度
，时间及其蛋白量也有一定影响,一般多采用4℃18～24小时。蛋白质包被的适浓度需进行滴定
：即用不同的蛋白质浓度（0.1、1.0和10μg／ml等）进行包被后，在其它试验条件相同时
，观察阳性标本的OD值。选择OD值大而蛋白量少的浓度。对于多数蛋白质来说通常为1～10μg／ml
。 
     （3） 酶标记抗体工作浓度的选择：首先用直接ELISA法进行初步效价的滴定（见酶标记抗体部份）

。然后再固定其它条件或采取“方阵法”（包被物、待检样品的参考品及酶标记抗体分别为不同的稀释度）在正式实验系统里准确地滴定其工作浓度。 
     （4） 酶的底物及供氢体的选择：对供氢体的选择要求是价廉、安全、有明显地显色反应

，而本身无色。有些供氢体（如OPD等）有潜在的致癌作用，应注意防护。有条件者应使用不致癌
、灵敏度高的供氢体
，如TMB和ABTS是目前较为满意的供氢体。底物作用一段时间后，应加入强酸或强碱以终止反应。通常底物作用时间，以10-30分钟为宜。底物使用液必须新鲜配制
，尤其是H2O2在临用前加入 。

产品名称：细胞色素P450 11A;BELISA检测试剂盒
英文名称：Cytochrome P450 11A;B
产品货号：EY-E98663
产品规格：48T/96T
产品保存
：2-8℃，有效期6个月
主要组成成分：试剂 
    性状
：液体 
    产品规格
：96T/48T 
    96T指可以做94个标本，2个标准对照 
    48T指可以做47个标本，1个标准对照 
    96T-84个样本 
    48T-42个样本 
    待检样本：体液，血清，血浆，细胞培养上清液，尿液，组织匀浆,心房水标本等等。 

样品收集、处理及保存方法
1）血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管
。收集血液后
，1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离
。
2）血浆-----EDTA、柠檬酸盐
、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。
3）细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4）组织匀浆-----将组织加入适量盐水捣碎。1000×g离心10分钟，取上清液
5）保存------如果样品不立即使用，应将其分成小部分-70 ℃保存，避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒，检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻
。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
注意事项
1）试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温
。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。
2）实验中不用的板条应立即放回包装袋中
，密封保存

，以免变质。
3）不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用

。保质前使用


。
4）使用一次性的吸头以免交叉污染
，吸取终止液和底物A、B液时
，避免使用带金属部分的加样器。
5）使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
6）洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
7）底物A应挥发，避免长时间打开盖子

。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触

，有毒。实验完成后应立即读取OD值。
8）加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。
9）按照说明书中标明的时间
、加液的量及顺序进行温育操作

。

Goat Anti-Chicken IgG  羊抗鸡IgG 规格: 1mg*

Band3/CD233  红细胞阴离子交换蛋白1抗体 规格: 0.2ml*

NDUFS3  线粒体复合物NDUFS3蛋白抗体 规格: 0.2ml*

phospho-TCF3/E47/E2A(Thr355)  磷酸化转录因子3抗体 规格: 0.1ml*

phospho-EGFR (Tyr1172)  磷酸化表皮生因子受体抗体 规格: 0.1ml*

CACH3/CaV1.3  L型钙通道蛋白a1亚型3抗体 规格: 0.2ml*

MALT1  粘膜相关淋巴组织淋巴瘤转运蛋白1抗体 规格: 0.2ml*

Rabbit Anti-human IgG F(ab')2/Cy5  Cy5标记的兔抗人IgG F(ab')2  规格: 0.1ml*

ABCA7  三磷酸苷结合盒转运蛋白7抗体 规格: 0.2ml*

GIRK1  G蛋白激活内向钾通道1抗体 规格: 0.1ml*

gremlin  骨形态形成蛋白拮抗蛋白抗体 规格: 0.1ml*

CLCA4  钙激活氯离子通道4抗体 规格: 0.1ml*

BST2/CD317  骨髓基质干细胞抗原2抗体 规格: 0.2ml*

phospho-Rb/p105-Rb(Ser780)  磷酸化成视网膜细胞瘤抑蛋白抗体 规格: 0.1ml*

ED-1  外胚层发育不良抗体 规格: 0.1ml*

细胞色素P450 11A;BELISA检测试剂盒兔CXC趋化因子受体1(CXCR1)酶联免疫吸附测定试剂盒

兔蛋白激酶C-β1(PKCβ1)酶联免疫吸附测定试剂盒

兔线粒体解偶联蛋白2(UCP-2)酶联免疫吸附测定试剂盒

兔(TP5)酶联免疫吸附测定试剂盒

兔核受体相互作用蛋白1(NRIP1)酶联免疫吸附测定试剂盒

兔信号传导转录激活因子4(STAT4)酶联免疫吸附测定试剂盒

兔泛素蛋白D(UBD)酶联免疫吸附测定试剂盒

兔泛素交叉反应蛋白 (UCRP)酶联免疫吸附测定试剂盒

兔前列腺素D2合成酶(PGD2S)酶联免疫吸附测定试剂盒

兔β1连接素(CTNNβ1)酶联免疫吸附测定试剂盒

兔巨噬细胞炎性蛋白5(MIP-5)酶联免疫吸附测定试剂盒

兔特异性抗原2(SSFA2)酶联免疫吸附测定试剂盒

兔四旋蛋白30 (TSPAN30)酶联免疫吸附测定试剂盒

兔脱氧吡酚(DPD)酶联免疫吸附测定试剂盒