老哥俱乐部

细胞培养方法
：
1

、细胞传代：细胞密度达到80-90%时即可传代
①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶）
，使覆盖整个瓶或皿，盖好放入培养箱消化；
③1-2min后，显微镜下观察细胞，若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入*培养基终止消化；若细胞还是贴壁
，放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止；
④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清；
⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中

，T25培养瓶加6-8ml培养基
；
⑥悬浮细胞直接离心收集
，细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中
。
2、细胞复苏：
①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化，时间1min左右
，加入4-5ml培养基混匀
。
②在1000RPM左右条件下离心4min，弃上清,加1-2ml培养基吹匀，将细胞悬液加入培养瓶中，补加适量培养基

。
3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种
①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次
，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后
，显微镜下观察细胞，大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入*培养基终止消化
；
③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清，加1ml冻存液重悬细胞；
④将冻存管放入程序降温盒

，放入-80℃冰箱
，4小时后将冻存管转入液氮罐储存。

下列是产品的订购信息：

细胞培养的优点：
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中，根据要求可始终保持细胞活力
，并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况
，包括活细胞的形态

、结构
、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件，可以根据实际需要进行人为的控制，同时，可以施加化学
、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察，这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后
，所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞
，需要时，可采用克隆化等方法使细胞达到纯化
。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术：如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术
、激光共焦显微镜
、免疫组织化学
、原位杂交
、同位素标记等各种仪器设备。
​
培养操作步骤 ：
1．用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出，用无菌丝绸布擦拭干净，不要用纱布
； 
2．将盖玻片轻轻放入6孔培养板（每孔一片）或培养皿中（每个平皿可放置2-3片）
； 
3．在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时； 
4．将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中
，使盖玻片*浸在培养液中
； 
5．将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时
，将培养板取出
，用盖片镊轻轻取出盖玻片


，用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。 
实验要点及说明：
1．本方法适用于贴壁细胞培养，而不适用于悬浮细胞培养
，悬浮细胞可使用滴片法； 
2．所使用的盖玻片应该为优质玻璃，并经过铬酸洗液处理
； 
3．盖玻片非常薄，易碎，取放盖玻片时动作要轻

； 
4．如果需要更多生长状态一致的细胞
，可以使用较大的培养皿，但不宜过大，以避免培养液的浪费和增加污染机率

； 
5．如果细胞贴壁生长能力较差，可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。

苦参新醇 F CAS 34981-24-3 规格：HPLC≥98%;20mg 订购|咨询

辛酰溴苯腈;纯品型;标准品;有证书 CAS 1689-99-2 规格：0.1g 订购|咨询

胡萝卜苷 CAS 474-58-8 规格：20mg 订购|咨询

刺五加甙E;刺五加苷E CAS 39432-56-9 规格：HPLC≥98%,20mg/支 订购|咨询

三七素 CAS 5302-45-4 规格
：HPLC≥98%;20mg 订购|咨询

白花前胡素E CAS 72463-77-5 规格：HPLC≥98%

；20mg/vial 订购|咨询

10-羟基攀援山橙碱;10-Hydrox CAS 119188-47-5 规格
：20mg 订购|咨询

左旋碱; L(-)-Carnitine CAS 541-15-1 规格：20mg 订购|咨询

常山乙素 CAS 24159-07-7 规格：HPLC≥98%;20mg 订购|咨询

芹甙元-7-葡萄糖苷 CAS 578-74-5 规格：HPLC≥98%，5mg/vial 订购|咨询

4-N-去甲基乃近 CAS  规格：100mg 订购|咨询

SH-SY5Y细胞，神经母细胞瘤细胞说明书G蛋白偶联受体γ14抗体 英文名称：G gamma14 0.2ml

肠高血糖素相关肽抗体 英文名称：GLP 2 0.2ml

葡萄糖转运蛋白10抗体 英文名称：GLUT10 0.2ml

肠高血糖素相关肽抗体 英文名称：GRPP 0.1ml

G蛋白偶联受体120抗体 英文名称：GPR120 0.2ml

20号染色体开放阅读框100抗体 英文名称
：GCX1/C20orf100 0.2ml

G蛋白偶联受体40抗体 英文名称：GPR40 0.2ml

促性腺素释放激素受体2抗体 英文名称：GNRHR2 0.1ml

G蛋白偶联受体106抗体 英文名称：GPR106 0.2ml

G0/G1期开关调节蛋白2抗体 英文名称：G1switch 2 0.2ml

G蛋白偶联受体GPR162蛋白抗体 英文名称
：GPR162 0.2ml