本公司代理ATCC細胞 ，提供小鼠黑色素瘤細胞 ；B16-F0保存售前售後一條龍服務 ，若要獲取詳細的說明書或價格信息 ，點擊了解更多小鼠源細胞 。
細胞名稱  小鼠黑色素瘤細胞 ；B16-F0保存
形態特性 上皮細胞樣

生長特性 貼壁生長

特征特性 B16-Fo是一株小鼠黑絲素瘤細胞係 。它可在體外常規傳代培養 ，產生高濃度的黑色素。可用於分子生物學中黑色素基因的表達研究 。

培養條件 DMEM-H ：

Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS  

傳代方法 1 ：

3傳代,2-3天傳一代  

傳代情況 C24

凍存條件 基礎培養基+5%DMSO+20%FBS

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小鼠黑色素瘤細胞 ；B16-F0保存在運輸的過程中 ，細胞培養瓶中的貼壁細胞有可能從瓶壁中脫落下來 ，因此客戶在收到貨以後的*時間是要先觀察產品的狀況 ，顯微鏡下觀察會出現細胞懸浮的情況 ，出現此狀態時 ，請不要立即打開培養瓶 ，應立即將培養瓶置於細胞培養箱過夜 ，並於次日在顯微鏡下觀察 ，此時多數細胞會重新貼附於瓶壁 。如果發現細胞仍不能貼壁 ，請試著用台盼藍染色法鑒定細胞活力 ，如台盼藍染色證實細胞活力正常請按懸浮細胞的方法處理 ；如若證實細胞無活力 ，請在收到貨後48小時內將細胞狀態反饋給我公司 ，老哥俱樂部將盡快幫助解決。
細胞培養步驟 ：
一．小鼠黑色素瘤細胞 ；B16-F0保存培養基及培養凍存條件準備 ：
1）準備MEM培養基(MEM:GIBCO,貨號11095-080) ，85% ；北美胎牛血清(United States ，GIBCO ，貨號16000-044) ，15% 。
2）培養條件 ： 氣相 ：空氣 ，95% ；二氧化碳 ，5% 。 溫度 ：37攝氏度 ，培養箱濕度為70%-80% 。
3）凍存液 ：90%*培養基 ，10%DMSO ，現用現配 。液氮儲存 。
二．細胞處理 ：
1）複蘇細胞 ：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍 ，加入4mL培養基混合均勻 。在1000RPM條件下離心4分鍾 ，棄去上清液 ，補加1-2mL培養基後吹勻 。然後將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜（或將細胞懸液加入10cm皿中 ，加入約8ml培養基 ，培養過夜） 。第二天換液並檢查細胞密度 。
2）細胞傳代 ：如果細胞密度達80%-90% ，即可進行傳代培養 。
對於貼壁細胞 ，傳代可參考以下方法 ：
1.棄去培養上清 ，用不含鈣 、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次 。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於培養瓶中 ，置於37℃培養箱中消化1-2分鍾 ，然後在顯微鏡下觀察細胞消化情況 ，若細胞大部分變圓並脫落 ，迅速拿回操作台 ，輕敲幾下培養瓶後加少量培養基終止消化 。
3.按6-8ml/瓶補加培養基 ，輕輕打勻後吸出 ，在1000RPM條件下離心4分鍾 ，棄去上清液 ，補加1-2mL培養液後吹勻 。
4.將細胞懸液按1 ：2到1 ：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中 。
3）細胞凍存 ：待細胞生長狀態良好時 ，可進行細胞凍存 。貼壁細胞凍存時 ，棄去培養基後加入少量 ，細胞變圓脫落後 ，加入約1ml含血清的培養基後加入凍存管中 ，再添加10%DMSO後進行凍存 。
注意事項 ：
1.收到小鼠黑色素瘤細胞 ；B16-F0保存後 ，若發現幹冰已揮發幹淨 、凍存管瓶蓋脫落 、破損及細胞有汙染 ，請立即與老哥俱樂部聯絡 。
2.收到細胞先不開瓶蓋 ，瓶身擦拭酒精後放在培養箱靜置2-4小時（視細胞密度而定）穩定細胞狀態 。接著在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況 ，並對細胞進行不同倍數拍照（建議收細胞時就整體外觀拍一張照片 ，觀察培養基的顏色和是否有漏液情況 ，隨後在顯微鏡下拍下細胞狀態 ，100* ，200*各一張） ，觀察記錄細胞在運輸過程中是否有汙染情況 。作為我方進行銷售依據 。
3.由於細胞狀態受環境 、操作和運輸等多方麵因素影響 ，故本公司隻保證客戶收到細胞後一周內的細胞狀態 ，故客戶需要售後時需出示收到細胞的時間證明及客戶提供收貨時間和發現問題後客服人員溝通的時間證明 ，期間間隔時間不能大於7天 。
4.所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性 ，必須在二級生物安全台內操作 ，並請注意防護 ，所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌後方能丟棄 。
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質量規格 ：分子生物學級N-Stearoyldihydro-D-erythro-SphingosineN-十八烷酰二氫-D-赤-鞘氨醇

質量規格 ：BR,UV>30%N-tert-Butyl-α-phenylnitroneN-叔丁基-α-苯基硝酮(>98.0%(HPLC)(T))

質量規格 ：BRBOC-L-MethionineN-叔丁氧羰基-L-

質量規格 ：>98%,BRBoc-Asn-(Xan)-OHN-叔丁氧羰基-N'-氧蒽基-L-天

質量規格 ：分子生物學級Boc-O-(2-bromo-Cbz)-L-TyrosineN-叔丁氧羰基-O-(2-溴苄氧羰基)-L-

質量規格 ：38000~42000mpa.sN6-Cbz-L-LysineN-碳苄氧基賴氨酸,N6-Cbz-L-賴氨酸

質量規格 ：>99%，BRFmoc-Lys(Z)-OHN'-芴甲氧羰基-N-苄氧羰基-L-賴氨酸

質量規格 ：>99% ，5NN'-Nitro-D-arginineN'-硝基-D-

pKD1pRC250g

pKH3pRC/CMV250g

pKJE7PrecipitatedTMBChromogenicKit250g

pKK223-3批次1PrehybridizationSolutionsinSSC250g

pKK232-8PrehybridizationSolutionsinSSPE250g

pKK233-3PremixedAcr-BisPowder250g

pKLAC1PremixedAcr-BisPowder250g

pLacZPremixedBCIP/NBTSolution250g

pLAMBLA1305.2PreScissiomProtease250g

pLAPSNPrestainedProteinMarker250g

pLEGFP-C1PrestainedProteinMarker250g

pLEGFP-N1pRetro-Off250g

pAdTrackpRetro-On250g

pLEGFP-N2pRetro-on-EGFP250g

pLentG-KOSMpRetro-on-RFP250g
小鼠黑色素瘤細胞 ；B16-F0保存Caspase 2  半胱胺酸蛋白酶-2多克隆抗體     0.1ml

Caspase 4  半胱胺酸蛋白酶蛋白-4多克隆抗體     0.1ml

Caspase 4/Caspase 11  半胱胺酸蛋白酶4/11多克隆抗體     0.2ml

Caspase 5  半胱胺酸蛋白酶蛋白5多克隆抗體     0.1ml

Caspase 8  半蛋白酶8多克隆抗體     0.1ml

Caspase-1(actived P10)  天冬氨酸-特異性蛋白酶家族多克隆抗體     0.1ml

Caspase-10  半胱胺酸蛋白酶-10多克隆抗體     0.1ml

Caspase-12  半胱胺酸蛋白酶蛋白-12多克隆抗體     0.1ml

Caspase-12  半胱胺酸蛋白酶蛋白-12多克隆抗體     0.1ml

Caspase-13/4  半胱胺酸蛋白酶蛋白-13多克隆抗體     0.2ml

caspase-3 p11  半胱天冬酶-3酶原多克隆抗體     0.1ml

caspase-3 p12 subunit  活化半胱胺酸蛋白酶蛋白-3多克隆抗體     0.1ml