老哥俱乐部

培养操作步骤 ：
1．用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出，用无菌丝绸布擦拭干净
，不要用纱布； 
2．将盖玻片轻轻放入6孔培养板（每孔一片）或培养皿中（每个平皿可放置2-3片）

； 
3．在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时； 
4．将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中，使盖玻片*浸在培养液中； 
5．将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天
，当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时，将培养板取出
，用盖片镊轻轻取出盖玻片，用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。 

下列是产品的订购信息：

细胞培养的优点：
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中，根据要求可始终保持细胞活力，并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况，包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气
、二氧化碳
、张力等物理化学的条件
，可以根据实际需要进行人为的控制，同时，可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察，这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后，所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞，需要时
，可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术
：如倒置生物显微镜、荧光显微镜
、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜
、免疫组织化学
、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备
。
​
实验要点及说明

：
1．本方法适用于贴壁细胞培养
，而不适用于悬浮细胞培养
，悬浮细胞可使用滴片法； 
2．所使用的盖玻片应该为优质玻璃
，并经过铬酸洗液处理
； 
3．盖玻片非常薄
，易碎，取放盖玻片时动作要轻； 
4．如果需要更多生长状态一致的细胞，可以使用较大的培养皿，但不宜过大，以避免培养液的浪费和增加污染机率； 
5．如果细胞贴壁生长能力较差，可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。

细胞培养方法：
1、细胞传代：细胞密度达到80-90%时即可传代
①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次
；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆盖整个瓶或皿，盖好放入培养箱消化
；
③1-2min后，显微镜下观察细胞，若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落
，轻轻吹打下确认消化情况后加入*培养基终止消化；若细胞还是贴壁
，放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止
；
④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min
，弃上清；
⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中，T25培养瓶加6-8ml培养基；
⑥悬浮细胞直接离心收集，细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。
2

、细胞复苏：
①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化
，时间1min左右，加入4-5ml培养基混匀
。
②在1000RPM左右条件下离心4min
，弃上清,加1-2ml培养基吹匀，将细胞悬液加入培养瓶中，补加适量培养基。
3、细胞冻存
：待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种
①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后
，显微镜下观察细胞
，大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入*培养基终止消化
；
③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min

，弃上清
，加1ml冻存液重悬细胞；
④将冻存管放入程序降温盒，放入-80℃冰箱
，4小时后将冻存管转入液氮罐储存。

喹烯 对照品 CAS  规格：50mg;99.6％ 订购|咨询

玄参对照药材 CAS  规格：1g 订购|咨询

角鲨烯;Squalene CAS 7683-64-9 规格：20mg 订购|咨询

β-倒捻子素 CAS  规格：HPLC≥98%;20mg 订购|咨询

荷叶碱 CAS 475-83-2 规格：20mg 订购|咨询

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二氢辣椒素;Dihydrocapsaic CAS 19408-84-5 规格：20mg 订购|咨询

异泽兰黄素 CAS 22368-21-4 规格：20mg 订购|咨询

地戈辛(Dig) CAS  规格：3支/套
，0.5ml/支 订购|咨询

司帕星 CAS 111542-93-9 规格：200mg 订购|咨询

涕威;纯品型;标准品;有证书 CAS 116-06-3 规格：0.1g 订购|咨询

A549[A-549]细胞
，肺癌细胞说明书糖皮质激素调节元件结合蛋白1抗体 英文名称：GMEB1 0.2ml

糖皮质激素调节元件结合蛋白2抗体 英文名称：GMEB2 0.2ml

胶浆成熟因子γ/GMF-γ抗体 英文名称：GMFG 0.2ml

转移酶GMPS抗体 英文名称：GMP Synthase 0.2ml

GDP甘露糖焦磷酸化酶B抗体 英文名称：GMPPB 0.2ml

葡萄糖6-磷酸脱氨酶1抗体 英文名称：GNPDA1 0.2ml

G蛋白偶联胆汁酸受体1 英文名称
：GPBAR1 0.2ml

葡萄糖6-磷酸脱氨酶2抗体 英文名称
：GNPDA2 0.2ml

葡萄糖6-N-乙酰基转移酶1抗体 英文名称
：GNPNAT1 0.2ml

酶1抗体 英文名称
：GLS1 0.2ml

G蛋白偶联受体GPR161蛋白抗体 英文名称
：GPR161 0.2ml