老哥俱乐部

ELISA 试验时
，注意事项如下： 
     1. 正式试验时，应分别以阳性对照与阴性对照控制试验条件，待检样品应作一式二份
，以保证实验结果的准确性。有时本底较高
，说明有非特异性反应，可采用羊血清
、兔血清或BSA等封闭
。 
     2. 在ELISA中，进行各项实验条件的选择是很重要的
，其中包括: 
     （1） 固相载体的选择
：许多物质可作为固相载体，如聚氯乙烯

、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纤维素等。其形式可以是凹孔平板
、试管
、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何种载体，在使用前均可进行筛选：用等量抗原包被，在同一实验条件下进行反应，观察其显色反应是否均一性，据此判明其吸附性能是否良好。 
     （2） 包被抗体（或抗原）的选择：将抗体（或抗原）吸附在固相载体表面时，要求纯度要好,吸附时一般要求PH在9.0～9.6之间。吸附温度，时间及其蛋白量也有一定影响,一般多采用4℃18～24小时。蛋白质包被的zui适浓度需进行滴定：即用不同的蛋白质浓度（0.1、1.0和10μg／ml等）进行包被后
，在其它试验条件相同时，观察阳性标本的OD值
。选择OD值zui大而蛋白量zui少的浓度。对于多数蛋白质来说通常为1～10μg／ml。 
     （3） 酶标记抗体工作浓度的选择
：首先用直接ELISA法进行初步效价的滴定（见酶标记抗体部份）
。然后再固定其它条件或采取“方阵法”（包被物、待检样品的参考品及酶标记抗体分别为不同的稀释度）在正式实验系统里准确地滴定其工作浓度
。 
     （4） 酶的底物及供氢体的选择：对供氢体的选择要求是价廉、安全、有明显地显色反应，而本身无色
。有些供氢体（如OPD等）有潜在的致癌作用

，应注意防护。有条件者应使用不致癌、灵敏度高的供氢体，如TMB和ABTS是目前较为满意的供氢体
。底物作用一段时间后

，应加入强酸或强碱以终止反应
。通常底物作用时间

，以10-30分钟为宜
。底物使用液必须新鲜配制，尤其是H2O2在临用前加入 。

产品名称：γ氨基丁酸A型受体ELISA检测试剂盒
英文名称
：Gamma-aminobutyric acid type A receptor
产品货号：EY-E98204
产品规格
：48T/96T
产品保存：2-8℃
，有效期6个月
主要组成成分：试剂 
    性状：液体 
    产品规格：96T/48T 
    96T指可以做94个标本，2个标准对照 
    48T指可以做47个标本，1个标准对照 
    96T-84个样本 
    48T-42个样本 
    待检样本：体液
，血清，血浆
，细胞培养上清液，尿液，组织匀浆,心房水标本等等。 

样品收集、处理及保存方法
1）血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后，1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2）血浆-----EDTA、柠檬酸盐
、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒
。
3）细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物
。
4）组织匀浆-----将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟，取上清液
5）保存------如果样品不立即使用，应将其分成小部分-70 ℃保存，避免反复冷冻
。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒，检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻
。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻
。
注意事项
1）试剂应按标签说明书储存
，使用前恢复到室温
。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存
。
2）实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存
，以免变质。
3）不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
4）使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。
5）使用干净的塑料容器配置洗涤液
。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
6）洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
7）底物A应挥发，避免长时间打开盖子
。底物B对光敏感
，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。
8）加入试剂的顺序应一致

，以保证所有反应板孔温育的时间一样
。
9）按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。

肝细胞HBV病毒株HEPG2.2.15

H9c2(2-1) (大鼠心肌细胞)5×106cells/瓶×2

酸球菌亚种 Lactococcus lactis subsp.lactisRL95-2, 内膜腺细胞系

戊糖杆菌 Lactobacillus pentosus293(胚肾细胞)

小鼠肾足突细胞*培养基100mL

绒猴EBV转化的白细胞

小鼠肝实质细胞*培养基100mL

暗黑橄榄链霉菌 Streptomyces atroolivaceus酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

白蛋白(ALB)天然蛋白 Native Albumin (ALB)

蛋白胨水(肉汤)发酵管BR20支国产/进口

小鼠艾氏腹水细胞EAC

γ氨基丁酸A型受体ELISA检测试剂盒兔葡萄糖磷酸变位酶(PGM)酶联免疫吸附测定试剂盒

兔染色盒同源物3(CBX3)酶联免疫吸附测定试剂盒

兔通用转录因子II B(GTF2B)酶联免疫吸附测定试剂盒

兔载脂蛋白A2(ApoA2)酶联免疫吸附测定试剂盒

兔腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶1(*)酶联免疫吸附测定试剂盒

兔α-胞衬蛋白(SPTAN1)酶联免疫吸附测定试剂盒

兔Dickkopf 相关蛋白4(DKK4)酶联免疫吸附测定试剂盒

兔血管内皮细胞生长因子受体1(VEGFR1/Flt1)酶联免疫吸附测定试剂盒

兔基质细胞衍生因子2(SDF-2)酶联免疫吸附测定试剂盒

兔血管生成素样蛋白2(ANGPTL2)酶联免疫吸附测定试剂盒  

兔过氧化物酶体增殖激活物受体γ辅激活因子1α(PPARγC1α)酶联免疫吸附测定试剂盒

兔全细胞色素C合酶(HCCS)酶联免疫吸附测定试剂盒

兔D-多巴色素变位酶(DDT)酶联免疫吸附测定试剂盒

兔白介素23(IL-23)酶联免疫吸附测定试剂盒