產品名稱 :LM3細胞,人高轉移肝癌細胞說明書
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產品型號 :
更新日期 :2021-03-19
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LM3細胞 ,人高轉移肝癌細胞說明書的詳細資料 :
培養操作步驟
:
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出
,用無菌絲綢布擦拭幹淨
,不要用紗布
;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養板(每孔一片)或培養皿中(每個平皿可放置2-3片)
;
3.在距離紫外燈直射範圍內20-30 厘米處照射2-3小時
;
4.將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中
,使蓋玻片*浸在培養液中
;
5.將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天
,當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3麵積時
,將培養板取出
,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片
,用蒸餾水漂洗後即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測
。
下列是產品的訂購信息 :
產品名稱 | LM3細胞 ,人高轉移肝癌細胞說明書 |
英文名稱 | LM3 cells, human high metastatic liver cancer cells |
貨號 | EY-X63711 |
細胞培養的優點
:
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中
,根據要求可始終保持細胞活力
,並可長時間監控
、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況
,包括活細胞的形態、結構
、生命活動等
。
2.研究條件可以人為控製
pH
、溫度
、氧氣
、二氧化碳
、張力等物理化學的條件
,可以根據實際需要進行人為的控製
,同時
,可以施加化學
、物理
、生物等因素作為條件而進行實驗觀察
,這些因素同樣可以處於嚴格控製之下
。
3.研究的樣本可以達到比較均一性
通過細胞培養一定代數後
,所得到的細胞係則可以達到均一性而屬於同一類型的細胞
,需要時
,可采用克隆化等方法使細胞達到純化
。
4.研究內容便於觀察
、檢測和記錄
采用各種研究技術
:如倒置生物顯微鏡
、熒光顯微鏡
、電子顯微鏡
、流式細胞術
、激光共焦顯微鏡
、免疫組織化學
、原位雜交
、同位素標記等各種儀器設備
。
實驗要點及說明
:
1.本方法適用於貼壁細胞培養
,而不適用於懸浮細胞培養
,懸浮細胞可使用滴片法
;
2.所使用的蓋玻片應該為優質玻璃
,並經過鉻酸洗液處理
;
3.蓋玻片非常薄
,易碎
,取放蓋玻片時動作要輕
;
4.如果需要更多生長狀態一致的細胞
,可以使用較大的培養皿,但不宜過大
,以避免培養液的浪費和增加汙染機率
;
5.如果細胞貼壁生長能力較差
,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鍾並自然晾幹
。
細胞培養方法
:
1
、細胞傳代
:細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養上清
,用PBS或生理鹽水清洗1-2次
;
②加入2ml0.25%(T25瓶)
,使覆蓋整個瓶或皿
,蓋好放入培養箱消化
;
③1-2min後
,顯微鏡下觀察細胞
,若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落
,輕輕吹打下確認消化情況後加入*培養基終止消化
;若細胞還是貼壁
,放回培養箱繼續消化至可以輕輕吹打下為止
;
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清
;
⑤用新鮮培養基重懸後加入培養瓶或皿中
,T25培養瓶加6-8ml培養基
;
⑥懸浮細胞直接離心收集
,細胞沉澱重懸後分到新培養瓶中
。
2
、細胞複蘇
:
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化
,時間1min左右
,加入4-5ml培養基混勻
。
②在1000RPM左右條件下離心4min
,棄上清,加1-2ml培養基吹勻
,將細胞懸液加入培養瓶中
,補加適量培養基
。
3
、細胞凍存
:待細胞生長狀態良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養上清
,用PBS或生理鹽水清洗1-2次
,加入1mL 0.25%(T25瓶)
②1-2min後
,顯微鏡下觀察細胞
,大部分細胞回縮且有少量細胞脫落
,輕輕吹打下確認消化情況後加入*培養基終止消化
;
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min
,棄上清
,加1ml凍存液重懸細胞
;
④將凍存管放入程序降溫盒
,放入-80℃冰箱
,4小時後將凍存管轉入液氮罐儲存
。
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磷酸化/激酶p90RSK蛋白抗體 英文名稱 :Phospho-p90RSK (Thr359 + Ser363) 0.1ml
纖維蛋白溶酶原抗體 英文名稱 :Plasminogen 0.1ml
DNA修複蛋白NBS1抗體 英文名稱 :p95 NBS1 0.2ml
蛋白質甲基轉移酶1抗體 英文名稱 :PRMT1 0.1ml
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