老哥俱乐部

产品名称
：神经酰胺激酶ELIS检测试剂盒
英文名称：Ceramide Kinase
产品货号
：EY-E98141
产品规格：48T/96T
产品保存：2-8℃，有效期6个月
主要组成成分

：试剂 
    性状
：液体 
    产品规格：96T/48T 
    96T指可以做94个标本

，2个标准对照 
    48T指可以做47个标本，1个标准对照 
    96T-84个样本 
    48T-42个样本 
    待检样本：体液
，血清，血浆，细胞培养上清液，尿液，组织匀浆,心房水标本等等
。 

样品收集
、处理及保存方法
1）血清-----操作过程中避免任何细胞刺激
。使用不含热原和内毒素的试管
。收集血液后，1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离
。
2）血浆-----EDTA、柠檬酸盐
、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。
3）细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4）组织匀浆-----将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟
，取上清液
5）保存------如果样品不立即使用，应将其分成小部分-70 ℃保存，避免反复冷冻
。尽可能的不要使用溶血或高血脂血
。如果血清中大量颗粒
，检测前先离心或过滤
。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻
。
注意事项
1）试剂应按标签说明书储存
，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。
2）实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质
。
3）不用的其它试剂应包装好或盖好
。不同批号的试剂不要混用。保质前使用
。
4）使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A

、B液时

，避免使用带金属部分的加样器。
5）使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品
。
6）洗涤酶标板时应充分拍干
，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
7）底物A应挥发，避免长时间打开盖子
。底物B对光敏感
，避免长时间暴露于光下。避免用手接触
，有毒
。实验完成后应立即读取OD值
。
8）加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。
9）按照说明书中标明的时间
、加液的量及顺序进行温育操作。

EA.hy926(脐静脉细胞融合细胞)5×106cells/瓶×2

大鼠成肌细胞L6

椭孢青霉 Penicillium ellipsoideosporum玫瑰栗色链霉菌 Streptomyces rosecastaneus

NCI-H295R(肾上腺皮质腺细胞)大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum

MR-VP发酵管BR20支国产/进口

EB-3(Burkitt淋巴瘤细胞)腺腺细胞

爪哇根霉 Rhizopus javanicus大鼠肺大动脉内皮细胞*培养基

小鼠膀胱上细胞*培养基100mL

液体改良马丁培养基/Martin Broth,Modified(Liquid)菌苗、生物制品和血液制品真菌无菌检验250克国产/进口

His标签蛋白裂解液20 ug

毛柄金钱菌(金针菇) Flammulina velutipes吸水链霉菌井岗变种 Streptomyces hygroscopicus var. jinggangensis

神经酰胺激酶ELIS检测试剂盒兔氧化低密度脂蛋白(OxLDL)酶联免疫吸附测定试剂盒

兔丛生蛋白(CLU)酶联免疫吸附测定试剂盒

兔粒细胞趋化蛋白2(GCP-2)酶联免疫吸附测定试剂盒

兔C-肽(C-P)酶联免疫吸附测定试剂盒

兔中间α球蛋白抑制因子H4(ITIH4)酶联免疫吸附测定试剂盒

兔补体因子D(CFD)酶联免疫吸附测定试剂盒

兔普列克底物蛋白同源物样结构域家族A成员2(PHLDA2)酶联免疫吸附测定试剂盒

兔微管蛋白α3C(TUBα3C)酶联免疫吸附测定试剂盒

兔γ1肌动蛋白(ACTG1)酶联免疫吸附测定试剂盒

兔肿瘤特异生长因子/肿瘤相关因子(TSGF)酶联免疫吸附测定试剂盒

兔过氧化还原酶5(PRDX5)酶联免疫吸附测定试剂盒

兔半蛋白酶抑制剂(CSTA)酶联免疫吸附测定试剂盒

兔嗜环蛋白/亲环素D(CYPD)酶联免疫吸附测定试剂盒  

兔抗磷脂酰抗体(APSA)酶联免疫吸附测定试剂盒  

ELISA 试验时

，注意事项如下： 
     1. 正式试验时，应分别以阳性对照与阴性对照控制试验条件，待检样品应作一式二份，以保证实验结果的准确性。有时本底较高，说明有非特异性反应，可采用羊血清
、兔血清或BSA等封闭
。 
     2. 在ELISA中
，进行各项实验条件的选择是很重要的，其中包括: 
     （1） 固相载体的选择：许多物质可作为固相载体，如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纤维素等
。其形式可以是凹孔平板、试管
、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何种载体
，在使用前均可进行筛选
：用等量抗原包被，在同一实验条件下进行反应，观察其显色反应是否均一性，据此判明其吸附性能是否良好。 
     （2） 包被抗体（或抗原）的选择
：将抗体（或抗原）吸附在固相载体表面时
，要求纯度要好,吸附时一般要求PH在9.0～9.6之间。吸附温度，时间及其蛋白量也有一定影响,一般多采用4℃18～24小时
。蛋白质包被的zui适浓度需进行滴定
：即用不同的蛋白质浓度（0.1
、1.0和10μg／ml等）进行包被后，在其它试验条件相同时，观察阳性标本的OD值。选择OD值zui大而蛋白量zui少的浓度

。对于多数蛋白质来说通常为1～10μg／ml
。 
     （3） 酶标记抗体工作浓度的选择：首先用直接ELISA法进行初步效价的滴定（见酶标记抗体部份）。然后再固定其它条件或采取“方阵法”（包被物
、待检样品的参考品及酶标记抗体分别为不同的稀释度）在正式实验系统里准确地滴定其工作浓度。 
     （4） 酶的底物及供氢体的选择
：对供氢体的选择要求是价廉
、安全、有明显地显色反应，而本身无色
。有些供氢体（如OPD等）有潜在的致癌作用，应注意防护。有条件者应使用不致癌、灵敏度高的供氢体，如TMB和ABTS是目前较为满意的供氢体。底物作用一段时间后

，应加入强酸或强碱以终止反应。通常底物作用时间，以10-30分钟为宜。底物使用液必须新鲜配制，尤其是H2O2在临用前加入 
。