老哥俱乐部

培养操作步骤 ：
1．用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出，用无菌丝绸布擦拭干净，不要用纱布； 
2．将盖玻片轻轻放入6孔培养板（每孔一片）或培养皿中（每个平皿可放置2-3片）； 
3．在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时； 
4．将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中，使盖玻片*浸在培养液中； 
5．将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时，将培养板取出，用盖片镊轻轻取出盖玻片，用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。 

下列是产品的订购信息：

细胞培养的优点：
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中，根据要求可始终保持细胞活力，并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况，包括活细胞的形态
、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气

、二氧化碳、张力等物理化学的条件，可以根据实际需要进行人为的控制
，同时，可以施加化学
、物理
、生物等因素作为条件而进行实验观察，这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后，所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞

，需要时
，可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察
、检测和记录
采用各种研究技术：如倒置生物显微镜
、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜
、免疫组织化学
、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。
​
实验要点及说明
：
1．本方法适用于贴壁细胞培养

，而不适用于悬浮细胞培养
，悬浮细胞可使用滴片法
； 
2．所使用的盖玻片应该为优质玻璃，并经过铬酸洗液处理； 
3．盖玻片非常薄

，易碎，取放盖玻片时动作要轻
； 
4．如果需要更多生长状态一致的细胞，可以使用较大的培养皿，但不宜过大，以避免培养液的浪费和增加污染机率； 
5．如果细胞贴壁生长能力较差

，可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。

细胞培养方法：
1、细胞传代：细胞密度达到80-90%时即可传代
①弃去培养上清
，用PBS或生理盐水清洗1-2次
；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆盖整个瓶或皿
，盖好放入培养箱消化
；
③1-2min后
，显微镜下观察细胞，若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入*培养基终止消化；若细胞还是贴壁，放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止；
④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清；
⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中
，T25培养瓶加6-8ml培养基；
⑥悬浮细胞直接离心收集，细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。
2、细胞复苏：
①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化，时间1min左右，加入4-5ml培养基混匀。
②在1000RPM左右条件下离心4min，弃上清,加1-2ml培养基吹匀

，将细胞悬液加入培养瓶中，补加适量培养基。
3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种
①弃去培养上清
，用PBS或生理盐水清洗1-2次
，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后
，显微镜下观察细胞，大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入*培养基终止消化；
③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清，加1ml冻存液重悬细胞；
④将冻存管放入程序降温盒，放入-80℃冰箱，4小时后将冻存管转入液氮罐储存
。

克雷伯氏显色培养基250克国产/进口

SDS-PAGE浓胶缓冲液(4x)植物杆菌 Lactobacillus plantarum

巴固氮螺菌 Azospirillum brasilense

CRT(人神经胶质瘤细胞)5×106cells/瓶×2

植物杆菌 Lactobacillus plantarum泾阳链霉菌 Streptomyces jingyangensis

细胞外信号调节激酶2(ERK2)重组蛋白Recombinant Extracellular Signal Regulated Kinase 2 (ERK2)

草菇 Volvariella bombycina

SuperPolymer Rabbit&Mouse HRP Kit(DAB)/Super Polymer-二步法IHC试剂盒(带DAB显色液)3ml
、18ml国产

圆弧青霉 Penicillium cyclopiumCW-2(人结肠细胞)

HUVEC(HUV-EC-C) (人脐静脉血管内细胞)5×106cells/瓶×2

大鼠脑静脉血管平滑肌细胞*培养基100mL

IEC-6细胞
，大鼠小肠隐窝上皮细胞供应商人胰岛素样生长因子结合蛋白4IGFBP-4(Human insulin-like growth factors binding protein 4) ELISA Kit 96T

人胰岛素样生长因子结合蛋白3IGFBP-3(Human insulin-like growth factors binding protein 3) ELISA Kit 96T

小鼠胰岛素样生长因子结合蛋白1IGFBP-1(Mouse Insulin-like growth factor binding protein 1) ELISA Kit 96T

大鼠β-防御素Beta-DF ELISA Kit 96T

小鼠胰岛素样生长因子结合蛋白2IGFBP-2(Mouse Insulin-like growth factor binding protein 2) ELISA Kit 96T

人胰岛素样生长因子结合蛋白2IGFBP2(Human insulin-like growth factors binding protein 2) ELISA Kit 96T

大鼠多巴胺D1受体D1R ELISA Kit 96T

人胰岛素样生长因子结合蛋白1IGFBP-1(Human insulin-like growth factors binding protein 1) ELISA Kit 96T

大鼠肾上腺素能a1A受体ADRA1A ELISA Kit  96T

小鼠白介素16IL-16(Mouse Interleukin 16) ELISA Kit 96T

小鼠白介素3IL-3(Mouse Interleukin 3) ELISA Kit 96T