老哥俱乐部

人膀胱癌细胞；J82运输在运输的过程中，细胞培养瓶中的贴壁细胞有可能从瓶壁中脱落下来，因此客户在收到货以后的*时间是要先观察产品的状况，显微镜下观察会出现细胞悬浮的情况，出现此状态时，请不要立即打开培养瓶，应立即将培养瓶置于细胞培养箱过夜，并于次日在显微镜下观察

，此时多数细胞会重新贴附于瓶壁
。如果发现细胞仍不能贴壁，请试着用台盼蓝染色法鉴定细胞活力
，如台盼蓝染色证实细胞活力正常请按悬浮细胞的方法处理


；如若证实细胞无活力
，请在收到货后48小时内将细胞状态反馈给我公司，老哥俱乐部将尽快帮助解决。

细胞名称  人膀胱癌细胞

；J82运输
形态特性 上皮细胞样

生长特性 贴壁生长

特征特性 该细胞源自一名58岁患有膀胱移行细胞癌的白人男性
。胞内无桥粒
，有大量粗面内质网及突出绒毛，表达ras基因。

培养条件 MEM-EBSS：

Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS  

传代方法 1:2～1:10传代，每周换液2～3次

传代情况 P62

冻存条件 基础培养基+8%DMSO+20%FBS

细胞培养步骤：
一．人膀胱癌细胞；J82运输培养基及培养冻存条件准备：
1）准备MEM培养基(MEM:GIBCO,货号11095-080)
，85%；北美胎牛血清(United States，GIBCO
，货号16000-044)
，15%。
2）培养条件： 气相：空气，95%


；二氧化碳
，5%。 温度
：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%
。
3）冻存液：90%*培养基
，10%DMSO
，现用现配。液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀
。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液
，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中
，加入约8ml培养基
，培养过夜）

。第二天换液并检查细胞密度
。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%
，即可进行传代培养。
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法
：
1.弃去培养上清，用不含钙
、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中
，置于37℃培养箱中消化1-2分钟
，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落
，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3.按6-8ml/瓶补加培养基
，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀
。
4.将细胞悬液按1：2到1

：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中
。
3）细胞冻存

：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存
。贴壁细胞冻存时
，弃去培养基后加入少量，细胞变圆脱落后
，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。
注意事项：
1.收到人膀胱癌细胞
；J82运输后，若发现干冰已挥发干净
、冻存管瓶盖脱落
、破损及细胞有污染，请立即与老哥俱乐部联络。
2.收到细胞先不开瓶盖
，瓶身擦拭酒精后放在培养箱静置2-4小时（视细胞密度而定）稳定细胞状态。接着在倒置显微镜下观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照（建议收细胞时就整体外观拍一张照片，观察培养基的颜色和是否有漏液情况，随后在显微镜下拍下细胞状态，100*
，200*各一张），观察记录细胞在运输过程中是否有污染情况。作为我方进行销售依据。
3.由于细胞状态受环境
、操作和运输等多方面因素影响，故本公司只保证客户收到细胞后一周内的细胞状态，故客户需要售后时需出示收到细胞的时间证明及客户提供收货时间和发现问题后客服人员沟通的时间证明，期间间隔时间不能大于7天
。
4.所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性，必须在二级生物安全台内操作

，并请注意防护
，所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。
本公司代理ATCC细胞，提供人膀胱癌细胞
；J82运输售前售后一条龙服务，若要获取详细的说明书或价格信息，点击了解更多肿瘤细胞。500克Yeast extract酵母浸膏

25克Bile salt No. 33号胆盐

25克Bile salt No. 55号胆盐

25克Bile salt No.77号胆盐

25克Bile salt from sheep羊胆盐

25克Bile salt from ox牛胆盐

1公斤

WT-1/Wilms Tumor Protein  肾母细胞瘤蛋白抗体   规格 0.1ml*

WSTF  转录因子WSTF抗体   规格 0.2ml*

WSB2/WD SOCS box protein 2  信号传导抑制蛋白WD重复蛋白2抗体   规格 0.2ml*

WRCH-1  WRCH1抗体   规格 0.1ml*

WNT9A  信号通路Wnt9a抗体   规格 0.1ml*

Wnt8b  WNT蛋白家族Wnt8b抗体   规格 0.2ml*

Wnt8A  信号通路WNT8A抗体   规格 0.2ml*

WNT7B  Wnt蛋白家族7B抗体   规格 0.2ml*

WNT7A  原癌基因wnt7a蛋白抗体   规格 0.1ml*

Wnt6  信号通路Wnt6抗体   规格 0.2ml*

WNT5A  信号通路Wnt5a抗体   规格 0.1ml*

WNT4  信号通路Wnt4抗体   规格 0.2ml*
人膀胱癌细胞
；J82运输OTOA/DFNB22  耳聋、常染色体隐性遗传22多克隆抗体   规格 0.2ml*

OTC  氨基甲酰转移酶多克隆抗体   规格 0.1ml*

OSTM1  骨硬化病相关跨膜蛋白1多克隆抗体   规格 0.2ml*

Osterix  成骨相关转录因子多克隆抗体   规格 0.1ml*

OST-beta  有机溶质转运蛋白OSTβ多克隆抗体   规格 0.2ml*

OSMR/OSMRB  抑瘤素M受体多克隆抗体   规格 0.1ml*

OSM/Oncostatin M  抑瘤素M多克隆抗体   规格 0.1ml*

OSGIN1  氧化应激诱导生长抑制因子1多克隆抗体   规格 0.2ml*

OS9  OS-9蛋白多克隆抗体   规格 0.2ml*

Os05g0477200 protein  水稻白叶枯病菌Os05g0477200蛋白多克隆抗体   规格 1ml*

ORP8  氧化固醇结合蛋白8多克隆抗体   规格 0.2ml*

ORP4/OSBP2  氧化固醇结合蛋白4多克隆抗体   规格 0.2ml*