老哥俱乐部

细胞培养方法：
1、细胞传代：细胞密度达到80-90%时即可传代
①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆盖整个瓶或皿，盖好放入培养箱消化；
③1-2min后，显微镜下观察细胞
，若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入*培养基终止消化；若细胞还是贴壁，放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止；
④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清
；
⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中，T25培养瓶加6-8ml培养基；
⑥悬浮细胞直接离心收集，细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。
2、细胞复苏：
①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化，时间1min左右，加入4-5ml培养基混匀
。
②在1000RPM左右条件下离心4min

，弃上清,加1-2ml培养基吹匀
，将细胞悬液加入培养瓶中
，补加适量培养基。
3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种
①弃去培养上清
，用PBS或生理盐水清洗1-2次
，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，显微镜下观察细胞
，大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入*培养基终止消化；
③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清
，加1ml冻存液重悬细胞；
④将冻存管放入程序降温盒，放入-80℃冰箱，4小时后将冻存管转入液氮罐储存
。

下列是产品的订购信息：

细胞培养的优点：
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中，根据要求可始终保持细胞活力，并可长时间监控
、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况，包括活细胞的形态
、结构
、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件，可以根据实际需要进行人为的控制，同时，可以施加化学
、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察

，这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后，所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞，需要时，可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术：如倒置生物显微镜、荧光显微镜
、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜

、免疫组织化学、原位杂交

、同位素标记等各种仪器设备。
​
培养操作步骤 
：
1．用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出

，用无菌丝绸布擦拭干净，不要用纱布； 
2．将盖玻片轻轻放入6孔培养板（每孔一片）或培养皿中（每个平皿可放置2-3片）； 
3．在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时
； 
4．将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中，使盖玻片*浸在培养液中
； 
5．将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天
，当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时
，将培养板取出，用盖片镊轻轻取出盖玻片
，用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测

。 
实验要点及说明：
1．本方法适用于贴壁细胞培养，而不适用于悬浮细胞培养，悬浮细胞可使用滴片法
； 
2．所使用的盖玻片应该为优质玻璃，并经过铬酸洗液处理； 
3．盖玻片非常薄

，易碎

，取放盖玻片时动作要轻
； 
4．如果需要更多生长状态一致的细胞，可以使用较大的培养皿，但不宜过大，以避免培养液的浪费和增加污染机率； 
5．如果细胞贴壁生长能力较差，可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。

3,3',4',7-四羟基黄 CAS 528-48-3 规格
：HPLC≥98%，20mg/vial 订购|咨询

刺芒柄花素;Formonetin CAS 485-72-3 规格：20mg 订购|咨询

乙型肝炎病表面抗体（Anti-HBs） CAS  规格：24支/套 订购|咨询

啡醇 CAS 469-83-0 规格：HPLC≥98%;20mg 订购|咨询

木蘭花鹼 CAS 88273 规格
：HPLC≥98%；10mg/vial 订购|咨询

1-羟基-3,4,5-*氧山 CAS  规格
：10mg 订购|咨询

乙酰甲喹 对照品 CAS  规格：100mg;99.6％ 订购|咨询

L-茶氨酸 CAS 3081-61-6 规格：HPLC≥98%;20mg 订购|咨询

9-羟基芴 CAS 1689-64-1 规格：5g 订购|咨询

羊藿次苷II;Icarisid II CAS 113558-15-9 规格：20mg 订购|咨询

荆芥穗 CAS  规格
：1g 订购|咨询

LTEP-a-2细胞
，人肺腺癌细胞规格泛素样蛋白Sumo2抗体 英文名称：Sumo 2 0.2ml

泛素样蛋白Sumo3抗体 英文名称：Sumo 3 0.2ml

泛素样蛋白Sumo2/3抗体 英文名称：Sumo 2+3 0.1ml

上皮钠离子通道蛋白D/δENaC抗体 英文名称

：SCNN1D 0.2ml

转录因子同源框蛋白SIX2抗体 英文名称：SIX2 0.2ml

斯钙素2抗体 英文名称：Stanniocalcin 2 0.2ml

硫酸酯酶修饰因子1抗体 英文名称：SUMF1 0.2ml

/激酶33抗体 英文名称：STK33 0.2ml

磷酸化/蛋白激酶39抗体 英文名称
：phospho-STK39(Ser325) 0.1ml

磷酸化转录生长因子SP1抗体 英文名称
：phospho-SP1 (Thr453) 0.1ml

分选连接蛋白4抗体 英文名称
：SNX4 0.2ml